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1 Flow PRA 法の検査状況の解析 福岡赤十字病院 検査部 移植検査課 / 輸血細胞治療部 金本人美

2 参加施設数 -Flow PRA- Screening ClassⅠ 25 施設 ClassⅡ 24 施設 Single antigen ClassⅠ 2 施設 ClassⅡ 2 施設 18th 17th Screening ClassⅠ 22 施設 ClassⅡ 20 施設 Single antigen ClassⅠ 4 施設 ClassⅡ 3 施設

3 参加部門内訳 -Flow PRA- 18 ~ 重複 ~ 臓器 - 輸血 - 造血 3 施設臓器 - 輸血 - 造血 2 施設臓器 - 輸血 - 造血 2 施設 臓器移植輸血関連造血細胞 その他

4 Lab ID 輸血関連臓器移植造血細胞その他 I II 26S S S S I II S S S S S S S S S S S S S S S S S S FlowPRA Screening Single antigen 26S S S

5 試薬キットの使用期限 Lot Screening ClassⅠ Lot.15 使用期限切れ 偽陰性 偽陽性の原因となる 受領後 キットの箱を開封せず -80 ~-65 フリーザー保管 箱に記載された有効期限は安定 解凍後 試薬 2 ~5 保管し 一度解凍したビーズ FITC は再凍結しない解凍したビーズは 3 ヵ月または有効期限内 Wash Buffer FITC は 12 ヵ月または有効期限内

6 測定機器 48% 52% EpicsXL EPICS XL, 3, 12% FC500 FC500, 4, 16% Calibur, 8, 32% FACS Calibur NAVIOS, 5, 20% CantoII, 5, 20% Navios FACS Canto2

7 スコア比較判定結果記入表 Screening 検体別抗体の有無 ( 有 =8, 無 =1) 抗原 /ID Class I Class II 記載漏れ 記載漏れ lab CLASS Ⅰ CLASS Ⅱ S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S N 一致率 (%)

8 判定スコア一致率 Screening ClassⅠ 25/25 25/25 25/25 25/25 100% 100% 100% 100% ClassⅡ 24/24 24/24 24/24 24/24 100% 100% 100% 100%

9 %PRA の考え方 数値として結果は出るが 定量性はさほどなく あくまでも多い 少ないの目安程度に考える UNOS では %PRA 高い患者は 移植選定時にポイントが加算されていたが %PRA の値の信憑性 移植成績との相関が疑問視されて現在は ポイント加算はなくなっている %PRA が変動する要因 1) マーカー位置設定 2) 機器設定汎用機のフローサイトメーターを用いるので 各施設での機器調整は必要

10 マーカーの設定 Negative Serum Sample Serum ネガティブピークがはっきり分かる形状の場合 ネガティブコントロール血清で設定した M1 をそのまま用いるのではなく ネガティブピークのすぐ横のピーク谷間に合わせて M2 を再設定して %PRA を求める

11 陽性検体 多峰性 膨らみ

12 Screening/ClassⅠ/2601~2604/%PRA CLASS Ⅰ lab PC total 26S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S N Mean SD CV Min Max

13 Screening/ClassⅡ/2601~2604/%PRA CLASS Ⅱ lab PC total 26S S S S S S S S S S25 26S S S S S S S S S S S S S S S N Mean SD CV Min Max

14 Screening/ClassⅠ/2601~2604/%PRA/ 機器別 2601.ClassⅠ.ALL 2602.ClassⅠ.ALL 2603.ClassⅠ.ALL 2604.ClassⅠ.ALL N 25 N 25 N 25 N 25 Mean Mean Mean Mean SD SD 7.31 SD SD CV CV 9.94 CV CV Min Min 59.7 Min 3.56 Min 56.2 Max Max 89.6 Max 60.7 Max ClassⅠ.Calibur 2602.ClassⅠ.Calibur 2603.ClassⅠ.Calibur 2604.ClassⅠ.Calibur N 8 N 8 N 8 N 8 Mean Mean Mean Mean SD 9.58 SD 6.29 SD SD CV CV 8.61 CV CV Min Min Min 3.56 Min Max Max 78.4 Max Max ClassⅠ.Canto ClassⅠ.Canto ClassⅠ.Canto ClassⅠ.Canto2 N 5 N 5 N 5 N 5 Mean Mean Mean Mean SD 9.05 SD 8.69 SD SD CV CV CV CV Min 63.8 Min Min Min 68.7 Max 86.1 Max 89.6 Max 60.7 Max ClassⅠ.EPICS XL 2602.ClassⅠ.EPICS XL 2603.ClassⅠ.EPICS XL 2604.ClassⅠ.EPICS XL N 3 N 3 N 3 N 3 Mean Mean Mean Mean SD 7.62 SD 9.21 SD 8.49 SD 3.91 CV CV CV CV 4.80 Min 63.8 Min 61.9 Min 4.3 Min 77.2 Max 77.1 Max 80.1 Max 21 Max ClassⅠ.FC ClassⅠ.FC ClassⅠ.FC ClassⅠ.FC500 N 4 N 4 N 4 N 4 Mean Mean Mean Mean SD SD 6.26 SD 0.98 SD 7.09 CV CV 8.72 CV 4.88 CV 8.13 Min Min Min 18.8 Min 78.8 Max 86.9 Max Max 20.9 Max ClassⅠ.NAVIOS 2602.ClassⅠ.NAVIOS 2603.ClassⅠ.NAVIOS 2604.ClassⅠ.NAVIOS N 5 N 5 N 5 N 5 Mean Mean Mean Mean SD SD 7.76 SD SD CV CV CV CV Min Min 59.7 Min 18.7 Min 56.2 Max 92.1 Max Max Max 94.44

15 Screening/ClassⅡ/2601~2604/%PRA/ 機器別 2601.ClassⅡ.ALL 2602.ClassⅡ.ALL 2603.ClassⅡ.ALL 2604.ClassⅡ.ALL N 24 N 24 N 24 N 24 Mean 2.20 Mean Mean Mean SD 1.12 SD 1.57 SD SD 8.27 CV CV 1.58 CV CV 9.70 Min 0.75 Min 92.9 Min Min Max 5.86 Max 100 Max 70.2 Max ClassⅡ.Calibur 2602.ClassⅡ.Calibur 2603.ClassⅡ.Calibur 2604.ClassⅡ.Calibur N 8 N 8 N 8 N 8 Mean 1.91 Mean Mean Mean SD 1.69 SD 0.82 SD SD 6.87 CV CV 0.83 CV CV 8.10 Min 0.75 Min Min Min Max 5.86 Max Max Max ClassⅡ.Canto ClassⅡ.Canto ClassⅡ.Canto ClassⅡ.Canto2 N 5 N 5 N 5 N 5 Mean 2.61 Mean Mean Mean SD 0.42 SD 0.12 SD SD 9.28 CV CV 0.12 CV CV Min 2.06 Min Min 24.5 Min 69.9 Max 3.19 Max 100 Max 70.2 Max ClassⅡ.EPICS XL 2602.ClassⅡ.EPICS XL 2603.ClassⅡ.EPICS XL 2604.ClassⅡ.EPICS XL N 3 N 3 N 3 N 3 Mean Mean Mean Mean SD SD 3.40 SD 4.99 SD 2.08 CV CV 3.51 CV CV 2.39 Min 1.07 Min 92.9 Min 21 Min 84.7 Max 1.7 Max 99.5 Max 30.9 Max ClassⅡ.FC ClassⅡ.FC ClassⅡ.FC ClassⅡ.FC500 N 4 N 4 N 4 N 4 Mean 2.37 Mean Mean Mean SD 0.63 SD 1.41 SD SD CV CV 1.43 CV CV Min 1.5 Min 97 Min 26.5 Min Max 2.88 Max 100 Max Max ClassⅡ.NAVIOS 2602.ClassⅡ.NAVIOS 2603.ClassⅡ.NAVIOS 2604.ClassⅡ.NAVIOS N 4 N 4 N 4 N 4 Mean 2.69 Mean Mean Mean SD 0.91 SD 0.25 SD 5.73 SD 0.91 CV CV 0.25 CV CV 1.02 Min 1.52 Min Min Min 89.3 Max 3.72 Max 100 Max Max 91.22

16 Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ/Reagent Lot,16/Calibur/Negative Control Control/Lot.20 26S04 26S10 26S24 26S46 Control/Lot.17 Control/Lot.19 自家製 26S31 26S33 26S55 26S30 Reagent/Lot,15

17 Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅡ/Reagent Lot,18/Calibur/Negative Control Lot.20 26S04 26S10 26S24 26S46 Lot.17 Lot.19 自家製 26S31 26S33 26S55 26S30

18 Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/CantoⅡ/Negative Control Lot.20 自家製 26S03 26S35 26S36 26S45 26S09

19 Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/ Epics-XL /Negative Control Lot.20 Lot.19 Lot. 不明 26S06 26S50 26S27

20 Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/ FC500 /Negative Control Lot.20 Lot. 不明 自家製 26S22 26S52 26S26 26S34

21 Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/ NAVIOS/Negative Control Lot.20 Lot.19 Lot.17 Lot.16 26S25 26S32 26S18 26S42 26S05

22 Flow PRA Single Antigen 26S09 26S35 機器 FACS Canto II FACS Canto II 陰性対象血清自家製 / ドナー血清 One Lambda/FlowPRA Negative Control Serum/020 ClassⅠ Group 1-4(Lot.13) Group 1-4(Lot.13) Group 5-7 (5,7 Lot.10) (6 Lot.11 ) ClassⅡ Group 1-4(Lot.11) Group 1-4(Lot.11)

23 Flow PRA Single Antigen ClassⅠ Antigen Distribution,Group1-4,5,6,7

24 Flow PRA Single Antigen ClassⅡ Antigen Distribution,Group1-4

25 判定スコア一致率 Consensus vs. Flow PRA Single Antigen Class Ⅰ SH2601_Ⅰ SH2602_Ⅰ SH2603_Ⅰ SH2604_Ⅰ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 FP 0 0 FP 7 2 FP 4 0 FP 5 1 FN 0 0 FN 1 0 FN 1 0 FN 2 0 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 一致 一致 一致 一致 未検査 未検査 未検査 未検査 Class Ⅱ SH2601_Ⅱ SH2602_Ⅱ SH2603_Ⅱ SH2604_Ⅱ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 FP 0 0 FP 0 0 FP 0 1 FP 0 0 FN 0 0 FN 3 2 FN 0 0 FN 1 1 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 一致 一致 一致 一致 未検査 0 0 未検査 0 0 未検査 0 0 未検査 0 0

26 HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus Single Antigen Consensus_HLA-A SH2601_Ⅰ SH2602_Ⅰ SH2603_Ⅰ SH2604_Ⅰ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 A1 1 1 A1 8 8 A1 1 1 A1 1 1 A2 8 8 A2 1 1 A2 1 1 A2 1 1 A3 1 1 A3 8 8 A3 1 1 A3 1 1 A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A36 A36 A36 A36 A43 A43 A43 A43 A66 A66 A66 A66 A A A A A69 A69 A69 A69 A74 A74 A74 A74 A80 A80 A80 A80 False Positive?

27 Single Antigen Consensus_HLA-B SH2601_Ⅰ SH2602_Ⅰ SH2603_Ⅰ SH2604_Ⅰ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 B7 1 1 B7 8 8 B7 1 1 B7 8 8 B B B B B B B B B B B B B37 8 B37 1 B37 1 B37 1 B B B B B39 1 B39 1 B39 1 B39 8 B B B B B46 1 B46 1 B46 8 B46 8 B48 1 B48 8 B48 1 B48 8 B B B B B B B B B54 1 B54 1 B54 1 B54 1 B B B B B56 1 B56 1 B56 1 B56 1 B58 8 B58 1 B58 1 B58 1 B59 8 B59 1 B59 1 B59 8 B B B B B61 1 B61 8 B61 1 B61 8 B B B B B67 1 B67 1 B67 1 B67 1 B71 B71 B71 B71 B75 1 B75 1 B75 1 B75 8 B64 1 B64 1 B64 8 B64 1 B B B B B72 1 B72 1 B72 1 B72 1 B8 1 1 B8 8 1 B8 1 1 B8 8 8 B B B B B41 1 B41 1 B41 1 B41 8 B42 1 B42 1 B42 1 B42 8 B B B B B47 8 B47 8 B47 1 B47 8 B B B B B50 1 B50 8 B50 8 B50 8 B53 8 B53 1 B53 1 B53 1 B B B B B63 8 B63 1 B63 1 B63 8 B73 1 B73 8 B73 8 B73 8 B76 1 B76 1 B76 1 B76 8 B77 8 B77 1 B77 1 B77 8 B78 1 B78 1 B78 1 B78 8 B81 1 B81 8 B81 1 B81 8 B82 B82 B82 B82 False Negative? Group7 B67:01beads False Negative? HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus

28 Single Antigen Consensus_HLA-DR SH2601_Ⅱ SH2602_Ⅱ SH2603_Ⅱ SH2604_Ⅱ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 DR1 1 1 DR1 1 1 DR1 1 1 DR1 1 1 DR4 1 1 DR4 1 1 DR4 1 1 DR4 1 1 DR7 1 1 DR7 8 8 DR7 8 8 DR7 8 8 DR8 1 1 DR8 8 8 DR8 8 8 DR8 8 8 DR9 1 1 DR9 8 8 DR9 1 1 DR9 1 1 DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DR DQ2 1 1 DQ2 1 1 DQ2 1 1 DQ2 1 1 DQ4 1 1 DQ4 1 8 DQ4 1 1 DQ4 1 1 DQ5 1 1 DQ5 8 8 DQ5 1 1 DQ5 1 1 DQ6 1 1 DQ6 8 8 DQ6 1 1 DQ6 1 1 DQ7 1 1 DQ7 1 1 DQ7 1 1 DQ7 1 1 DQ8 1 1 DQ8 1 1 DQ8 1 1 DQ8 1 1 DQ9 1 1 DQ9 1 1 DQ9 1 1 DQ9 1 1 LAB Screen Single antigen Antigen Distribution DR4 Beads 9 種類 DRB1*04:01 DRB1*04:02 DRB1*04:03 DRB1*04:04 DRB1*04:05 DRB1*04:06 DRB1*04:07 DRB1*04:10 DRB1*04:11 Flow PRA Single antigen Antigen Distribution DR4 Beads 3 種類 DRB1*04:01 DRB1*04:04 DRB1*04:05 HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus

29 Flow PRA Single Antigen Score_SH2601_ClassⅠ SH2601_Ⅰ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score A1 A*01: B7 Bw6 B*07: B52 Bw4 B*52: A2 A*02: B7 Bw6 B*07:14 0 B53 Bw4 B*53: A2 A*02: B8 Bw6 B*08: B54 Bw6 B*54: A2 A*02: B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55: A2 A*02: B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55:02 0 A2 A*02: B18 Bw6 B*18: B55 Bw6 B*55:04 0 A210 A*02: B22 Bw6 B*56:03 0 B56 Bw6 B*56: A3 A*03: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57: A11 A*11: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57: A11 A*11:02 2 B27 Bw6 B*27:08 3 B58 Bw4 B*58: A23 A*23: B35 Bw6 B*35: B59 Bw4 B*59: A24 A*24: B35 Bw6 B*35:02 0 B60 Bw6 B*40: A24 A*24: B35 Bw6 B*35:03 0 B61 Bw6 B*40: A25 A*25: B37 Bw4 B*37: B61 Bw6 B*40:06 7 A26 A*26: B38 Bw4 B*38: B61 Bw6 B*40:03 0 A26 A*26:02 0 B38 Bw4 B*38: B62 Bw6 B*15: A26 A*26:03 0 B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15:04 0 A29 A*29:01 46 B3902 Bw6 B*39:02 9 B62 Bw6 B*15:07 0 A29 A*29: B39 Bw6 B*39:04 0 B62 Bw6 B*15:20 4 A30 A*30: B39 Bw6 B*39:05 0 B62 Bw4 B*15: A30 A*30:02 4 B39 Bw6 B*39:13 11 B62 Bw6 B*15:27 0 A31 A*31: B4005 Bw6 B*40:05 0 B63 Bw4 B*15: A32 A*32: B41 Bw6 B*41: B63 Bw4 B*15: A33 A*33: B42 Bw6 B*42: B64 Bw6 B*14: A33 A*33:03 6 B44 Bw4 B*44: B65 Bw6 B*14: A34 A*34: B44 Bw4 B*44: B67 Bw6 B*67: A34 A*34:02 12 B45 Bw6 B*45: B71 Bw6 B*15:10 3 A36 A*36:01 13 B46 Bw6 B*46: B71 Bw6 B*15:18 0 A43 A*43:01 5 B47 Bw4 B*47: B72 Bw6 B*15: A66 A*66:01 14 B48 Bw6 B*48: B73 Bw6 B*73: A66 A*66:02 17 B48 Bw6 B*48:02 0 B75 Bw6 B*15: A68 A*68: B49 Bw4 B*49: B75 Bw6 B*15:11 1 A68 A*68:02 9 B50 Bw6 B*50: B76 Bw6 B*15: A69 A*69:01 11 B45 Bw6 B*50:02 0 B77 Bw4 B*15: A74 A*74:01 13 B51 Bw4 B*51: B78 Bw6 B*78: A80 A*80:01 50 B51 Bw4 B*51: B81 Bw6 B*81: B82 Bw6 B*82:01 13 HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus 測定スコア 80% 8 50% 6 20% 4 10% 2 0% 1 NT 0 26S35 記入ミス? 0 1 で解析

30 Flow PRA Single Antigen Score_SH2602_ClassⅠ SH2602_Ⅰ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score A1 A*01: B7 Bw6 B*07: B52 Bw4 B*52: A2 A*02: B7 Bw6 B*07: B53 Bw4 B*53: A2 A*02: B8 Bw6 B*08: B54 Bw6 B*54: A2 A*02:05 27 B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55: A2 A*02: B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55: A2 A*02:07 33 B18 Bw6 B*18: B55 Bw6 B*55: A210 A*02:10 85 B22 Bw6 B*56: B56 Bw6 B*56: A3 A*03: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57: A11 A*11: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57: A11 A*11: B27 Bw6 B*27: B58 Bw4 B*58: A23 A*23: B35 Bw6 B*35: B59 Bw4 B*59: A24 A*24: B35 Bw6 B*35:02 23 B60 Bw6 B*40: A24 A*24: B35 Bw6 B*35:03 14 B61 Bw6 B*40: A25 A*25: B37 Bw4 B*37: B61 Bw6 B*40: A26 A*26: B38 Bw4 B*38: B61 Bw6 B*40: A26 A*26: B38 Bw4 B*38:02 16 B62 Bw6 B*15: A26 A*26: B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15:04 3 A29 A*29:01 36 B3902 Bw6 B*39:02 27 B62 Bw6 B*15:07 3 A29 A*29: B39 Bw6 B*39:04 12 B62 Bw6 B*15:20 28 A30 A*30: B39 Bw6 B*39:05 10 B62 Bw4 B*15:24 13 A30 A*30: B39 Bw6 B*39:13 9 B62 Bw6 B*15:27 4 A31 A*31: B4005 Bw6 B*40:05 16 B63 Bw4 B*15: A32 A*32: B41 Bw6 B*41: B63 Bw4 B*15:17 16 A33 A*33: B42 Bw6 B*42: B64 Bw6 B*14: A33 A*33:03 16 B44 Bw4 B*44: B65 Bw6 B*14: A34 A*34: B44 Bw4 B*44: B67 Bw6 B*67: A34 A*34: B45 Bw6 B*45: B71 Bw6 B*15:10 12 A36 A*36: B46 Bw6 B*46: B71 Bw6 B*15:18 4 A43 A*43: B47 Bw4 B*47: B72 Bw6 B*15: A66 A*66: B48 Bw6 B*48: B73 Bw6 B*73: A66 A*66: B48 Bw6 B*48:02 15 B75 Bw6 B*15: A68 A*68: B49 Bw4 B*49: B75 Bw6 B*15:11 14 A68 A*68: B50 Bw6 B*50: B76 Bw6 B*15: A69 A*69:01 11 B45 Bw6 B*50:02 9 B77 Bw4 B*15: A74 A*74:01 35 B51 Bw4 B*51: B78 Bw6 B*78: A80 A*80: B51 Bw4 B*51: B81 Bw6 B*81: B82 Bw6 B*82:01 26

31 Flow PRA Single Antigen Score_SH2603_ClassⅠ SH2603_Ⅰ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score A1 A*01: B7 Bw6 B*07: B52 Bw4 B*52: A2 A*02: B7 Bw6 B*07: B53 Bw4 B*53: A2 A*02: B8 Bw6 B*08: B54 Bw6 B*54: A2 A*02: B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55: A2 A*02: B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55: A2 A*02:07 96 B18 Bw6 B*18: B55 Bw6 B*55: A210 A*02: B22 Bw6 B*56: B56 Bw6 B*56: A3 A*03: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57: A11 A*11: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57:03 82 A11 A*11: B27 Bw6 B*27: B58 Bw4 B*58: A23 A*23: B35 Bw6 B*35: B59 Bw4 B*59: A24 A*24: B35 Bw6 B*35: B60 Bw6 B*40: A24 A*24: B35 Bw6 B*35: B61 Bw6 B*40: A25 A*25: B37 Bw4 B*37: B61 Bw6 B*40: A26 A*26: B38 Bw4 B*38: B61 Bw6 B*40: A26 A*26: B38 Bw4 B*38: B62 Bw6 B*15: A26 A*26: B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15: A29 A*29: B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15:07 52 A29 A*29: B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15: A30 A*30: B39 Bw6 B*39: B62 Bw4 B*15: A30 A*30: B3902 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15: A31 A*31: B4005 Bw6 B*40:05 67 B63 Bw4 B*15: A32 A*32: B41 Bw6 B*41: B63 Bw4 B*15:17 89 A33 A*33: B42 Bw6 B*42: B64 Bw6 B*14: A33 A*33:03 88 B44 Bw4 B*44: B65 Bw6 B*14: A34 A*34: B44 Bw4 B*44:03 73 B67 Bw6 B*67: A34 A*34: B45 Bw6 B*45: B71 Bw6 B*15: A36 A*36: B46 Bw6 B*46: B71 Bw6 B*15:18 61 A43 A*43: B47 Bw4 B*47: B72 Bw6 B*15: A66 A*66: B48 Bw6 B*48: B73 Bw6 B*73: A66 A*66: B48 Bw6 B*48: B75 Bw6 B*15: A68 A*68: B49 Bw4 B*49: B75 Bw6 B*15: A68 A*68: B50 Bw6 B*50: B76 Bw6 B*15: A69 A*69: B45 Bw6 B*50: B77 Bw4 B*15: A74 A*74: B51 Bw4 B*51: B78 Bw6 B*78: A80 A*80: B51 Bw4 B*51: B81 Bw6 B*81: B82 Bw6 B*82:01 232

32 Flow PRA Single Antigen Score_SH2604_ClassⅠ SH2604_Ⅰ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score A1 A*01: B7 Bw6 B*07: B52 Bw4 B*52: A2 A*02: B7 Bw6 B*07: B53 Bw4 B*53: A2 A*02:03 1 B8 Bw6 B*08: B54 Bw6 B*54: A2 A*02:06 0 B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55: A2 A*02:05 4 B13 Bw4 B*13: B55 Bw6 B*55: A2 A*02:07 0 B18 Bw6 B*18: B55 Bw6 B*55: A210 A*02:10 47 B22 Bw6 B*56: B56 Bw6 B*56: A3 A*03: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57: A11 A*11: B27 Bw4 B*27: B57 Bw4 B*57: A11 A*11:02 57 B27 Bw6 B*27: B58 Bw4 B*58: A23 A*23: B35 Bw6 B*35: B59 Bw4 B*59: A24 A*24: B35 Bw6 B*35:02 0 B60 Bw6 B*40: A24 A*24: B35 Bw6 B*35:03 0 B61 Bw6 B*40: A25 A*25: B37 Bw4 B*37: B61 Bw6 B*40: A26 A*26: B38 Bw4 B*38: B61 Bw6 B*40: A26 A*26:02 0 B38 Bw4 B*38: B62 Bw6 B*15: A26 A*26:03 0 B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15: A29 A*29: B3902 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15: A29 A*29: B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15: A30 A*30: B39 Bw6 B*39: B62 Bw4 B*15: A30 A*30: B39 Bw6 B*39: B62 Bw6 B*15: A31 A*31: B4005 Bw6 B*40: B63 Bw4 B*15: A32 A*32: B41 Bw6 B*41: B63 Bw4 B*15: A33 A*33: B42 Bw6 B*42: B64 Bw6 B*14: A33 A*33:03 8 B44 Bw4 B*44: B65 Bw6 B*14: A34 A*34: B44 Bw4 B*44: B67 Bw6 B*67: A34 A*34:02 0 B45 Bw6 B*45: B71 Bw6 B*15:10 91 A36 A*36:01 42 B46 Bw6 B*46: B71 Bw6 B*15:18 99 A43 A*43: B47 Bw4 B*47: B72 Bw6 B*15: A66 A*66:01 2 B48 Bw6 B*48: B73 Bw6 B*73: A66 A*66: B48 Bw6 B*48:02 30 B75 Bw6 B*15: A68 A*68: B49 Bw4 B*49: B75 Bw6 B*15: A68 A*68:02 1 B50 Bw6 B*50: B76 Bw6 B*15: A69 A*69:01 4 B45 Bw6 B*50: B77 Bw4 B*15: A74 A*74: B51 Bw4 B*51: B78 Bw6 B*78: A80 A*80:01 40 B51 Bw4 B*51: B81 Bw6 B*81: B82 Bw6 B*82:01 24

33 Flow PRA Single Antigen Score_SH2601_ClassⅡ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score SH2601_Ⅱ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score DR1 DRB1*01: DR51 DRB5*01: DR1 DRB1*01: DR51 DRB5*01:02 34 DR103 DRB1*01: DR51 DRB5*02:02 7 DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*01:01 14 DR4 DRB1*04:02 6 DR52 DRB3*02:01 35 DR4 DRB1*04:03 1 DR52 DRB3*02: DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*03:01 64 DR4 DRB1*04: DR53 DRB4*01:01 60 DR4 DRB1*04:06 0 DR53 DRB4*01: DR4 DRB1*04:07 0 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*02: DR4 DRB1*04:10 0 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*03:01 22 DR4 DRB1*04:11 4 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*04:01 16 DR7 DRB1*07: DQ2 DQB1*02:01 DQA1*05:01 3 DR8 DRB1*08: DQ2 DQB1*02:02 DQA1*02:01 34 DR8 DRB1*08:02 0 DQ4 DQB1*04:01 DQA1*02:01 28 DR8 DRB1*08:03 21 DQ4 DQB1*04:01 DQA1*03:03 0 DR8 DRB1*08:07 8 DQ4 DQB1*04:02 DQA1*02: DR9 DRB1*09: DQ4 DQB1*04:02 DQA1*04:01 7 DR9 DRB1*09:02 20 DQ5 DQB1*05:01 DQA1*01: DR10 DRB1*10: DQ5 DQB1*05:02 DQA1*01:02 19 DR11 DRB1*11: DQ5 DQB1*05:03 DQA1*01:01 58 DR11 DRB1*11:04 6 DQ6 DQB1*06:01 DQA1*01:03 0 DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01: DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01:02 12 DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:03 DQA1*01:03 0 DR13 DRB1*13:02 70 DQ6 DQB1*06:04 DQA1*01:02 36 DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:09 DQA1*01:02 1 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*02: DR14 DRB1*14:02 12 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*03:01 9 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05:03 6 DR14 DRB1*14:04 18 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05:05 1 DR14 DRB1*14:05 51 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*06:01 1 DR14 DRB1*14:06 13 DQ7 DQB1*03:19 DQA1*02:01 33 DR14 DRB1*14:54 12 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*01: DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*02:01 13 DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:01 12 DR15 DRB1*15:03 2 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:02 0 DR16 DRB1*16: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*02: DR16 DRB1*16:02 2 DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:01 12 DR17 DRB1*03: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:02 0 DR18 DRB1*03:

34 Flow PRA Single Antigen Score_SH2602_ClassⅡ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score SH2602_Ⅱ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score DR1 DRB1*01: DR51 DRB5*01: DR1 DRB1*01: DR52 DRB5*01: DR103 DRB1*01: DR51 DRB5*02:02 50 DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*01: DR4 DRB1*04: DR53 DRB3*02:01 3 DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*02: DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*03: DR4 DRB1*04: DR53 DRB4*01:01 37 DR4 DRB1*04:06 0 DR53 DRB4*01: DR4 DRB1*04:07 18 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*02: DR4 DRB1*04:10 12 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*03:01 8 DR4 DRB1*04:11 1 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*04:01 17 DR7 DRB1*07: DQ2 DQB1*02:01 DQA1*05: DR8 DRB1*08: DQ2 DQB1*02:02 DQA1*02:01 22 DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:01 DQA1*02: DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:01 DQA1*03: DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:02 DQA1*02: DR9 DRB1*09: DQ4 DQB1*04:02 DQA1*04: DR9 DRB1*09:02 63 DQ5 DQB1*05:01 DQA1*01: DR10 DRB1*10: DQ5 DQB1*05:02 DQA1*01: DR11 DRB1*11: DQ5 DQB1*05:03 DQA1*01: DR11 DRB1*11: DQ6 DQB1*06:01 DQA1*01: DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01: DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01: DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:03 DQA1*01: DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:04 DQA1*01: DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:09 DQA1*01: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*02: DR14 DRB1*14:02 4 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*03:01 30 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05: DR14 DRB1*14:05 1 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*06: DR14 DRB1*14:06 1 DQ7 DQB1*03:19 DQA1*02:01 14 DR14 DRB1*14: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*01: DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*02:01 30 DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:01 4 DR15 DRB1*15:03 15 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:02 1 DR16 DRB1*16: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*02: DR16 DRB1*16: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:01 3 DR17 DRB1*03: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03: DR18 DRB1*03:

35 Flow PRA Single Antigen Score_SH2603_ClassⅡ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score SH2603_Ⅱ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score DR1 DRB1*01: DR51 DRB5*01: DR1 DRB1*01: DR51 DRB5*01: DR103 DRB1*01: DR51 DRB5*02:02 94 DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*01: DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*02: DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*02: DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*03: DR4 DRB1*04: DR53 DRB4*01: DR4 DRB1*04: DR53 DRB4*01: DR4 DRB1*04: DQ2 DQB1*02:01 DQA1*02: DR4 DRB1*04: DQ2 DQB1*02:01 DQA1*03: DR4 DRB1*04: DQ2 DQB1*02:01 DQA1*04: DR7 DRB1*07: DQ2 DQB1*02:01 DQA1*05: DR8 DRB1*08: DQ2 DQB1*02:02 DQA1*02: DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:01 DQA1*02:01 96 DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:01 DQA1*03: DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:02 DQA1*02: DR9 DRB1*09: DQ4 DQB1*04:02 DQA1*04: DR9 DRB1*09:02 94 DQ5 DQB1*05:01 DQA1*01: DR10 DRB1*10: DQ5 DQB1*05:02 DQA1*01: DR11 DRB1*11: DQ5 DQB1*05:03 DQA1*01: DR11 DRB1*11: DQ6 DQB1*06:01 DQA1*01: DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01: DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01:02 50 DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:03 DQA1*01: DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:04 DQA1*01:02 86 DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:09 DQA1*01:02 21 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*02: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*03:01 48 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*06:01 76 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:19 DQA1*02: DR14 DRB1*14: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*01: DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*02:01 31 DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:01 20 DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:02 4 DR16 DRB1*16: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*02: DR16 DRB1*16: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:01 18 DR17 DRB1*03: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:02 12 DR18 DRB1*03:

36 Flow PRA Single Antigen Score_SH2604_ClassⅡ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score SH2604_Ⅱ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score DR1 DRB1*01: DR51 DRB5*01: DR1 DRB1*01: DR51 DRB5*01: DR103 DRB1*01: DR51 DRB5*02:02 35 DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*01: DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*02: DR4 DRB1*04:03 4 DR52 DRB3*02: DR4 DRB1*04: DR52 DRB3*03: DR4 DRB1*04: DR53 DRB4*01:01 39 DR4 DRB1*04:06 0 DR53 DRB4*01: DR4 DRB1*04:07 0 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*02: DR4 DRB1*04:10 0 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*03:01 8 DR4 DRB1*04:11 43 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*04: DR7 DRB1*07: DQ2 DQB1*02:01 DQA1*05: DR8 DRB1*08: DQ2 DQB1*02:02 DQA1*02:01 2 DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:01 DQA1*02:01 54 DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:01 DQA1*03:03 2 DR8 DRB1*08: DQ4 DQB1*04:02 DQA1*02: DR9 DRB1*09: DQ4 DQB1*04:02 DQA1*04: DR9 DRB1*09:02 9 DQ5 DQB1*05:01 DQA1*01: DR10 DRB1*10: DQ5 DQB1*05:02 DQA1*01:02 10 DR11 DRB1*11: DQ5 DQB1*05:03 DQA1*01:01 14 DR11 DRB1*11: DQ6 DQB1*06:01 DQA1*01: DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01: DR12 DRB1*12: DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01:02 29 DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:03 DQA1*01:03 85 DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:04 DQA1*01:02 46 DR13 DRB1*13: DQ6 DQB1*06:09 DQA1*01:02 3 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*02: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*03:01 15 DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:01 DQA1*06: DR14 DRB1*14: DQ7 DQB1*03:19 DQA1*02:01 0 DR14 DRB1*14: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*01: DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*02:01 14 DR15 DRB1*15: DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:01 10 DR15 DRB1*15:03 11 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:02 0 DR16 DRB1*16: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*02: DR16 DRB1*16: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:01 16 DR17 DRB1*03: DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:02 0 DR18 DRB1*03:

37 まとめ ~Flow PRA Screening~ Flow PRA Screening の結果一致率は 100% と良好であった %PRA の数値は 同一条件 ( 機器 試薬が同一 ) でも施設により 大きく違う箇所を認めた 機器設定 マーカー設定で %PRA の数値のある程度の収束は可能と考えられる

38 まとめ ~Flow PRA Single Antigen~ コンセンサスと不一致の原因として 試薬の抗原構成によるもの ビーズの反応性 設定によるものが推測された 試薬 group の Antigen Distribution を把握 確認する必要がある

MHC 2013; 20 ( 2 QC QC DNA-QC 3. QCWS 集会参加および参加証明書発行 QCWS QCWS QCWS 解析方法 DNA-QC Luminex SSO SSO SSP SBT QC FlowPRA Lab Screen WAK Flow ICFA 4 HL

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