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革新的なオートフォーカス技術と洗練された細胞計数アルゴリズムにより TC20 全自動セルカウンターは主観性を排除した信頼性の高い細胞カウントを約 30 秒で提供します 株化細胞や初代培養細胞など哺乳類細胞で正確にカウントできます サンプル中に複数の細胞種が混在する場合は すべての細胞をカウントするか または細胞サイズによるゲートを設定することにより 目的の細胞のみをカウントするかを選択することができます TC20 全自動セルカウンターにより マニュアルセルカウントの時間を短縮し 主観性を排した結果を元に より研究ワークフローをスピードアップすることができます TC20 1

TC20 全自動セルカウンターの主な特長 6 ~ 50 μm の幅広い細胞サイズと多様な細胞種に対応 株化細胞 初代培養細胞 ( 組織もしくは血液由来 ) 幹細胞 革新的なオートフォーカス技術 マニュアルフォーカスに伴う人的バイアスを除去します One-Step Counting スライドを挿すだけで ピント調整 +カウント = 30 秒の迅速セルカウント 希釈作業のない総細胞数カウント 培地やトリパンブルー溶液などで希釈作業することなく 細胞懸濁液をそのまま総細胞数をカウントできます 希釈がないため 細胞数を減らすことなく より正確に総細胞数をカウントすることができます 細胞径によるゲート機能 初代培養細胞のような複数の細胞種を含むサンプルでは目的細胞径を選択し カウントすることが可能です 細胞生存率 TC20 独自の複数焦点面解析を用いてより正確に細胞をカウントすることが可能です 簡単かつ多彩な出力 TC20 の内蔵メモリーにはカウント数値データ 100 カウント分を保存可能です カウント数値データはオプションのサーマルプリンターでラベル紙へ印刷ができます また 細胞画像をエクスポートして PC 上で TC20 Data Analyzer ソフトウェアを使用することにより 再解析や複数サンプルの比較が可能です TC20 全自動セルカウンターは とてもコンパクトなスタンドアローン機器で 操作にコンピュータを必要としません 設置面積が小さいので 限られたベンチスペースでも置き場所に困りません すぐに設置でき 直感的な操作で細胞カウントを素早く簡単に開始することができます 写真はほぼ実寸大です 2

正確かつ再現性のあるセルカウント TC20 全自動セルカウンターを使用して研究を加速してください スライドを挿入すると直ちにカウントを開始し One-Stepで細胞を自動カウントします 内蔵のオートフォーカスと洗練された画像解析アルゴリズムは 正確で再現性のあるカウント結果を提供します サンプル添加 > サンプルをスライド上に 10 μl 添加 スライドを TC20 全自 正確かつ再現性のある結果 TC20 全自動セルカウンターは 複数焦点面分析を行うオートフォーカス機能を搭載しています 測定時にユーザーが調整を行う必要はありません 洗練されたアルゴリズムによって細胞を認識し ゴミを除外します オートフォーカス機能は血球計算盤およびマニュアルフォーカスのセルカウンターに比べてユーザー間の人的変動を低減し 再現性の高い細胞計数を実現します 細胞径によるゲート機能初代培養細胞などのような複数の細胞群からなる複雑なサンプルについては カウントする対象細胞を定義するために 細胞径のゲートを設定することができます ゲート設定は細胞径の上限と下限を1 µm 刻みで設定することが可能です TC20 全自動セルカウンターは ゲート位置を保存し その後の測定に適用することができます TC20 全自動セルカウンターは血球計算盤で得られる結果と同等の精度を提供します 6 ~ 50 µm の細胞サイズの細胞をカウントでき 5 10 4 ~ 1 10 7 cells/ ml の幅広い濃度範囲に対応します そのため サンプルをカウント前に希釈する必要がなく 希釈による誤差を低減します また 細胞カウントアルゴリズムは凝集した細胞を最大 5つまで個別の細胞としてカウントできるため 個々の細胞を正確にカウントすることが可能です TC20 全自動セルカウンターは正確で再現性のあるセルカウントを実現するため ユーザーのピペッティングに関係なく カウンティングスライドのチャンバー内に細胞を均一に分布するように設計された特許出願中のカウンティングスライドを使用しています ゲート機能が有効になっている場合には 細胞径によるゲート位置を調整することによって カウント対象とする細胞も選択することができます Measured concentration, cells/ml 5.0 x 10 6 4.5 x 10 6 4.0 x 10 6 3.5 x 10 6 3.0 x 10 6 2.5 x 10 6 2.0 x 10 6 1.5 x 10 6 1.0 x 10 6 5.0 x 10 5 0 Hemocytometer TC20 automated cell counter Competitor s image-based automated cell counter PBMC Jurkat HeLa MEF Cell type TC20 全自動セルカウンターによる様々なサイズの細胞の正確な計数結果小型細胞 (PBMC Jurkat) 中型細胞 (HeLa) 大型細胞 (MEF) を血球計算盤 TC20 全自動セルカウンター並びに競合他社の画像ベースの自動セルカウンターで計数した TC20 セルカウンター 血球計算盤は統計学的に有意な差を示さなかった 精度は標準偏差で示され エラーバーは平均標準偏差を表す 1 細胞種当たりは 4 リプリケートでの計数結果 3

スライド挿入 結果の確認 > TC20 動セルカウンターに挿入 : カウントが自動的に開始 総細胞数または総細胞数と生細胞数 ( トリパンブルーあり ) を 30 秒以内に取得 細胞生存率 TC20 全自動セルカウンターは トリパンブルー色素の有無にかかわらず 細胞数をカウントすることができます 生細胞数カウントをする場合には 専用の Trypan Blue 溶液を細胞懸濁液に 1:1 で混和し スライドを挿入するだけで TC20 全自動セルカウンターはサンプル中のトリパンブルーの存在を自動検出し トリパンブルー色素排除法により細胞生存率を算出します TC20 全自動セルカウンターは 総細胞数と生細胞数 生存率 (%) を算出します 細胞生存率のための複数焦点面分析単一焦点面を使用して細胞生存率を測定した場合には 光散乱や カウントチャンバー内で細胞が異なる高さにあることによりカウント結果が不正確になることがあります 焦点面によっては生細胞を死細胞と認識してしまう可能性があります 上からの図 複数焦点面分析の模式図 トリパンブルー色素を添加した細胞を複数焦点面で取得した画像例 : 同サンプルを焦点面 ( ピント ) だけを徐々に変えて撮影した例 左から 3 つめ ( 青枠 ) の最もピントが合っている画像 ( 単一焦点面 ) では 2 つの細胞共に死細胞と識別できるが 右端 ( 赤枠 ) では右側の細胞は生細胞であることが判る TC20 全自動セルカウンターでは細胞生存率を正確に算出するために複数の焦点面で画像を取得して分析します この独自の複数焦点面分析により 正確な生死判定を迅速に行うことができます トリパンブルー色素排除法による Pan T 細胞の細胞生存率評価 TC20 全自動カウンターからエクスポートした JPEG 画像を PC 上で TC20 Data Analyzer ソフトウェアで確認したアノテーション付き画像 緑丸が生細胞 赤丸が死細胞 Measured concentration, cells/ml 4.0 x 10 6 3.5 x 10 6 3.0 x 10 6 2.5 x 10 6 2.0 x 10 6 1.5 x 10 6 1.0 x 10 6 5.0 x 10 5 0 Hemocytometer TC20 automated cell counter Competitor s image-based automated cell counter Live cells Dead cells Total cells TC20 全自動セルカウンターによる生細胞の正確なカウント Pan T 細胞をトリパンブルー色素と混合し (1:1) 血球計算盤 TC20 全自動セルカウンター および競合他社の画像ベースの自動セルカウンターを用いてカウントした TC20 全自動セルカウンターと血球計算盤では統計学的に有意な差を示さなかった エラーバーは 平均標準偏差を表す TC20 全自動セルカウンターのグラフは 4 台の機器を用いて 5 リプリケートでカウントした結果を示している 4

典型的な実験ワークフロー バイオ ラッドは細胞研究のための強力なツールを提供し 発見を早めるために必要な柔軟性と信頼性をもたらします TC20 全自動セルカウンターによって細胞カウントの精度が向上し 結果に自信を持てます バイオ ラッドの他の分析ツールと併用し 実験を効率化し より再現性のある結果が得られます 細胞培養 形態観察 細胞カウント 分析オプション TC20 全自動セルカウンターはカウント終了後に分析オプションにより多様なレポートを参照することができます Histogram/gating セルカウントの結果を細胞径と細胞数によるヒストグラム表示をさせることが可能です またこの画面でゲートを設定して目的細胞だけをカウントさせることも可能です View image セルカウント後に View image を選択すると TC20 全自動セルカウンター上でサンプル細胞の状態を画像で確認することができます Histogram/gating 画面で表示される生死細胞のヒストグラム ( トリパンブルーで染色したサンプル ) Export data 100 回分のカウント数値が TC20 全自動セルカウンター本体に保存されています カウント結果は USB メモリー経由でエクスポートして Microsoft Excel で開くことができます カウント後の画像はMeta タグを含む JPEG ファイルとして USB メモリーに保存可能です 自動エクスポート機能を使用するとカウント後自動的に USB メモリーへ画像をエクスポートすることができます エクスポートした画像は TC20 Data Analyzerソフトウェアで PC 上で再解析することが可能です Sample name 各サンプルの名前を入力することができます 複数のリプリケートをカウントする場合には 時間を節約するために 自動連番機能を有効にします Dilution calculator 希釈率計算機能を用いて 次の実験に必要な細胞濃度を調整するための希釈を計算することができます View image 画面でサンプル細胞の状態を確認することができます オプションメニュー内の Autosave/Sample name 画面では自動エクスポートやサンプル名 サンプル名の連番などを設定することができます 5

トランスフェクションの実行細胞カウントセルソーティング定量するために qpcr の実行 カウンティングスライド TC20 全自動セルカウンターでは ユーザーのピペッティング方法に関わらず正確で再現性のあるセルカウントのために スライドチャンバー内に細胞が確実に均一分布するように設計された特許出願中の専用カウンティングスライドを使用します このカウンティングスライドは ディスポーザブルであるため 準備 洗浄 およびメンテナンスのステップは不要です またバイオハザードの検体への曝露を最小限に抑えることができます 1スライドに 2サンプルチャンバーを備えたカウンティングスライドは 2つ別々のサンプルカウントや希釈率の異なる 2つのカウントを可能にします 各チャンバーに必要な容量はわずか10 μlなので 貴重な細胞を節約できます TC20 Data Analyzer ソフトウェア専用に開発された TC20 Data Analyzer ソフトウェアはTC20 全自動セルカウンターからエクスポートした画像を PC 上で再解析することができます 画像を開いてゲートを再設定したり PDF 形式でレポートを出力 またはアノテーションの付いた細胞画像をエクスポートすることができます さらに一度に複数の画像ファイルを開いて 比較することで 複数サンプル間でのヒストグラムによる比較が簡単に行えます このソフトウェアは以下のウェブページより無償ダウンロードすることができます www.bio-rad.com/tc20 サーマルプリンター TC20 全自動セルカウンターにオプションのサーマルプリンターを接続することで カウント結果をすぐに印刷することができます サーマルプリンターの用紙はラベル紙になっており プリントアウトした結果を実験ノートに貼り付けて頂くことが可能です 6 システムテストシステムテストスライドを使用して TC20 全自動セルカウンターの機能を検証することができます システムテストスライドはキャリブレーションビーズを用いたテストで問題となるピペッティングの人的ばらつきがなく 機器を安定的に検証することができます

TC20 全自動セルカウンターでのカウント実績細胞株 細胞名 形態 生物 供給源である臓器 / 疾患 増殖特性 CCD-1137Sk 繊維芽細胞 ヒト 皮膚 付着性 CHO 上皮 チャイニーズハムスター 卵巣 付着性 COS-7 繊維芽細胞 アフリカミドリザル 腎臓 付着性 HeLa 上皮 ヒト 頸癌 付着性 Jurkat リンパ芽球 ヒト 急性 T 細胞白血病 浮遊性 K562 リンパ芽球 ヒト 骨髄 / 慢性骨髄性白血病 浮遊性 MCF-7 上皮 ヒト 乳腺癌 付着性 MDCK 上皮 イヌ 腎臓 付着性 MEF 繊維芽細胞 マウス 胎芽 付着性 mesc 幹細胞 マウス 胎芽 付着性 NIH 3T3 繊維芽細胞 マウス 胎芽 付着性 Pan T リンパ球前駆細胞 ヒト 血液 浮遊性 PBMC 血球 ヒト 血液 浮遊性 PP034 リンパ ヒト B 細胞 浮遊性 TC20 全自動セルカウンターはトリプシン処理後の丸くなった細胞をカウントすることができます TC20 全自動セルカウンター仕様 平均計測時間 30 秒 データエクスポート テキスト ( カウント数 ) ファイル サンプル量 10 µl Meta タグ付 JPEG ファイル 計測濃度範囲 5 10 4-1 10 7 外部ポート USB ポート 2 最適計測濃度範囲 1 10 5-5 10 6 対応機器 USB メモリー 計測細胞サイズ 6-50 µm 専用サーマルプリンター フォーカス方式 オートフォーカス 入力電源 100-240 V/50-60 Hz 焦点面検出アルゴリズム 単一焦点面 / 複数焦点面分析 操作環境 Trypan Blue 対応 可能 ( 自動認識 ) 周辺温度 : 10 ~ 35 画像解像度 2208 1920 pixel 相対湿度 : 20 ~ 80% 保存データ数 100データ ( カウント数 ) 海 抜 : 2,000 m 以下 レポート 総細胞数 細胞画像 最大消費電力 30 W ヒストグラム ( 細胞サイズゲート機能を含む ) サイズ (W D H) 19 16 25.4 cm 生細胞数 生存率 :(Trypan Blue) 重量 2.2 kg( 外部電源を含まず ) Ordering Information カタログ番号 品名 価格 TC20 全自動セルカウンター 1450101J1 TC20 全自動セルカウンター 480,000 構成品 :TC20 本体 カウンティングスライド 30 枚 (2チャンバー ;60 サンプル ), 1.5 ml Trypan Blue 日本語マニュアル 1450109J1 TC20 全自動セルカウンター プリンター付 540,000 構成品 :TC20 本体 サーマルプリンター カウンティングスライド 30 枚 (2チャンバー ;60 サンプル ), 1.5 ml Trypan Blue 日本語マニュアル 専用アクセサリー * 1450005JA サーマルプリンター 110,000 1450007J プリンター用ラベル (500 ラベル ) 11,000 1450014 システムテストキット 80,000 専用試薬 消耗品 * 1450021 Trypan Blue 5 1.5ml (750 サンプル ) 7,000 1450022 Trypan Blue 10 1.5ml(1500 サンプル ) 10,000 1450003J1 カウンティングキット 7,600 構成品 : カウンティングスライド 30 枚 (2チャンバー ;60サンプル ), 1.5 ml Trypan Blue 1450015 カウンティングスライド 150 枚 29,700 1450015B02 カウンティングスライド 300 枚 57,000 1450015B04 カウンティングスライド 600 枚 108,000 1450015B06 カウンティングスライド 900 枚 150,000 1450015B08 カウンティングスライド 1200 枚 180,000 1450015B16 カウンティングスライド 2400 枚 310,000 *: 専用アクセサリー並びに専用試薬 消耗品は TC20 全自動セルカウンターと TC10 全自動セルカウンターで共通です All trademarks used herein are the property of their respective owner. C10460L 1809b