No.4 25- (23) 199 21 Drug Susceptibility of Fish-Pathogenic Bacteria Isolated from Cultured Marine Fishes in Oita Prefecture from 199 to 21 Yutaka Fukuda 199 21 S. dumerili Pseudocaranx dentex Vibrio anguillarum 175 1 S. aureovittata Pagrus major Oplegnathus punctatus Photobacterium damselae subsp. piscicida = Pasteurella piscicida 1576 2 Trachurus japonicus Lactococcus garviae = Enterococcus seriolocida 4166 3 Evynnis japonica Edwardsiella tarda 927 4 Stephanolepis cirrhifer Thamnaconus modestus Streptococcus iniae 37 5 V. anguillarum SMM NFS OA OTC 4 P. damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC 12 TP FF NB BCM 1 Seriola FOM 9 BCM 1992 quinqueradiata FOM 1995 Paralichthys olivaceus L. garviae ABPC OTC -25-
Vibrio anguillarum Photobacterium damselae subsp. Lactococcus garvieae 199 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2 21 14 6 6 15 9 29 11 4 1 4 5 12 125 4 1 1 3 3 2 9 6 3 32 2 1 7 3 2 3 18 16 11 7 23 15 32 13 4 12 16 11 15 175 piscicida 199 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2 21 14 76 155 82 145 218 98 115 149 79 121 29 147 4 11 5 8 17 3 48 3 4 3 5 5 6 3 1 7 8 45 1 1 3 1 2 1 4 11 3 4 31 1 1 1 3 4 1 2 13 26 2 1 1 2 4 1 1 1 4 1 1 1 9 145 82 159 96 153 242 112 133 169 92 148 45 1576 199 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2 21 65 65 11 42 691 883 237 227 2 216 356 168 3661 2 4 1 18 7 5 41 1 35 61 234 2 1 6 9 11 14 22 17 27 13 122 1 1 8 7 26 9 13 4 2 6 1 87 3 3 4 2 2 3 4 3 2 26 4 1 12 26 1 1 1 2 2 3 1 68 75 112 436 731 912 272 33 285 287 452 233 4166 (MIC : µg/ml ) µg ( ) SMM 4 2 NFS 2 1 5 15 15 OA *1.5 2 1.5 2 1 1 ABPC 3 3 15 6 6 OTC *2 3 (2) 2 1 6 6 DOTC *3 3 (2) 2 1 6 6 EM *4 3 () 1 5 3 3 LCM 3 1 5 3 3 TP 6 3 12 12 FF 4 15 6 6 NB 2 1 4 2 2 BCM 4 8 3 3 FOM 2 15 8 2 2 *1 3 *2 ( ) 1994 4 18 *3 ( ) 1994 122 *4 ( ) 1994 5 31 6 Edwardsiella tarda 199 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2 21 24 44 64 56 75 81 6 82 117 63 112 13 881 2 5 2 4 1 3 2 2 9 1 4 2 3 1 6 24 46 69 58 79 82 63 84 119 68 122 113 927 Streptococcus iniae 199 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2 21 22 24 37 25 63 33 29 26 31 28 14 2 352 2 1 2 4 1 1 Vibrio anguillarum V. anguillarum SMM NFS OA OTC 1 SMM 1991 1 1995 96 2 2 1 1 1 3 8 24 24 37 25 65 34 32 31 33 31 14 2 37 54 67% DOTC EM 78% LCM FF 6 E. tarda NFS OA OTC SMM NFS OA ABPC OTC FF 6 7% OA S. iniae NFS ABPC OTC EM LCM FF 6 Photobacterium damselae subsp. piscicida V. anguillarum L. garviae E. tarda S. iniae P. -N P. damselae subsp. piscicida damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC 1.%NaCl TP FF NB BCM FOM 2 8 ABPC 25 7~12% 24 48 76% OA 3.5 2 1µg 22~43% 2 1 NFS OA OTC TP -26-
No.4 25- (23) SMM ( n=67) SMM ( n=15) SMM ( n=9) NFS ( n=93 ) NFS ( n=21) NFS ( n=15) OA ( n=12 ) OA ( n=23) OA ( n=14) OTC ( n=122) OTC ( n=28) OTC ( n=18) Vibrio anguillarum SMM NFS OA OTC NFS ( n=145) OTC ( n=994) NB ( n=866) OA ( n=1245) TP ( n=925) BCM ( n=136)* ABPC ( n=1339) FF ( n=1327) FOM ( n=757)**. Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC TP FF NB BCM FOM. -27-
NFS ( n=28) OTC ( n=3) NB ( n=26) OA ( n=36) TP ( n=34) BCM ( n=47) ABPC ( n=48) FF ( n=46) FOM ( n=43)* Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC TP FF NB BCM FOM * 1995. NFS ( n=35 ) OTC ( n=18 ) NB ( n=29 ) OA ( n=41) TP ( n=29 ) BCM ( n=36)* ABPC ( n=44 ) FF ( n=42) FOM ( n=22)** Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC TP FF NB BCM FOM * 1992. ** 1995. -28-
No.4 25- (23) NFS ( n=23 ) OTC ( n=25 ) NB ( n=13 ) OA ( n=24) TP ( n=17 ) BCM ( n=22)* ABPC ( n=29 ) FF ( n=2) FOM ( n=19)** Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC TP FF NB BCM FOM * 1992. ** 1995. NFS ( n=1 ) OTC ( n=2 ) NB ( n=19 ) OA ( n=21) TP ( n=17 ) BCM ( n=26) ABPC ( n=26 ) FF ( n=25) FOM ( n=22)* Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC TP FF NB BCM FOM *1995. -29-
NFS ( n=6) OTC ( n=7) NB ( n=7) OA ( n=9) TP ( n=7) BCM ( n=6)* ABPC ( n=9 ) FF ( n=9) FOM ( n=6)** Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC TP FF NB BCM FOM * 1992. ** 1995. NFS ( n=9) OTC ( n=7) NB ( n=7) OA ( n=9) TP ( n=8) BCM ( n=9) ABPC ( n=9 ) FF ( n=9) FOM ( n=7)* Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC OTC TP FF NB BCM FOM *1995. -3-
No.4 25- (23) 199-92 ( n=337) 199-92 ( n=357) 199-92 ( n=336 ) 1993-95 ( n=375) 1993-95 ( n=433) 1993-95 ( n=433 ) 1996-98 ( n=255) 1996-98 ( n=299) 1996-98 ( n=349 ) 1999-1 ( n=78) 1999-1 ( n=156 ) 1999-1 ( n=221) NFS OA ABPC NFS OA ABPC Photobacterium damselae subsp. piscicida NFS OA ABPC 199-92 ( n=291) 199-92 ( n=296) 199-92 ( n=325 ) 1993-95 ( n=273) 1993-95 ( n=259) 1993-95 ( n=439 ) 1996-98 ( n=2) 1996-98 ( n=227) 1996-98 ( n=353 ) 1999-1 ( n=18) 1999-1 ( n=143) 1999-1 ( n=21 ) OTC OTC TP TP FF FF Photobacterium damselae subsp. piscicida FF -31- OTC TP
199-92 ( n=262) 1992 ( n=75) 1993-95 ( n=266) 1993-95 ( n=41) 1995 ( n=212) 1996-98 ( n=216) 1996-98 ( n=349) 1996-98 ( n=344 ) 1999-1 ( n=122) 1999-1 ( n=22) 1999-1 ( n=21 ) NB BCM FOM NB BCM FOM Photobacterium damselae subsp. piscicida NB BCM FOM 199 ( n=114) 1994 ( n=14) 1998 ( n=145 ) 1991 ( n=72) 1995 ( n=214) 1999 ( n=79) 1992 ( n=1) 1996 ( n=97) 2 ( n=113) 1993 ( n=79) 1997 ( n=17) 21 ( n=29) Photobacterium damselae subsp. piscicida ABPC -32-
大分海水研調研報 No.4 25- (23) 主要魚病細菌の薬剤感受性 すなわち NFS および OA に対しては 高感受性株 から耐性株までが連続的に分布し OTC に対しては 低感受性と耐性株の割合 ( 64 ~ 91% ) が TP に対し ては耐性株の割合 ( 55 ~ 88% ) が高かった 一方 ヒ ラメおよびマダイ由来株では NFS に対して 91% 以 上の株が中以上の感受性を示しOAOTCおよび TP に対しては 高感受性株 ( 63 ~ 89% ) が主体であった ( 図 5 7) また 由来魚種にかかわらず FF BCM および FOM に対しては 8% 以上の株が高感受性を NB に 対しては中感受性株が主体 ( 62 ~ 86% ) で 92% 以上 の株が中以上の感受性を示した ブリ由来株の供試薬剤に対する感受性分布の変化 を 199 年から 3 年ごとにまとめた結果は 図 9 ~ 11 に示したとおりである 顕著な変化が認められるのは ABPC に対する感受 性で 199 ~ 1992 年には耐性株が 64% を占めてい たが 年代とともに減少して 1999 ~ 21 年にはほ とんどみられなくなる ( 3% ) とともに 高感受性株の 割合が 92% に達した ( 図 9 右 ) 199 年から 21 年 における ブリ由来株の ABPC に対する感受性分布 の年変化は 図 12 に示したとおりである 耐性株 主体 ( 71 ~ 76% ) であった分布に変化がみられはじ めたのは 1992 年で 耐性株の減少によって 1994 年 以降は高感受性株の割合が耐性株よりも高くなっ た 1999 年以降は 88% 以上が高感受性株となって いる 2 年に 6 株の耐性株が分離されたものの 21 年に分離された 29 株は全て高感受性株であっ た NFS に対する感受性分布をみると 1993 ~ 1995 年に高感受性株がやや減少し 1996 ~ 1998 年には 低感受性および耐性株がやや減少した結果 1996 年 以降は中感受性株が主体 ( 53~55% ) となっている ( 図 9 左 ) その他の供試薬剤に対する感受性分布には 目立った変化は認められない いずれの年代におい ても OTC( 図 1 左 ) に対しては低感受性株 TP( 図 1 中 ) に対しては耐性株 NB( 図 11 左 ) に対しては 中感受性株が主体をなしている FF( 図 1 右 ) BCM ( 図 11 中 ) および FOM( 図 11 右 ) に対してはどの年 代においても高感受性株が 85% 以上を占めるが 1992 ~ 1995 年に FF 低感受性あるいは耐性株が 1997 ~ 1999 年に BCM および FOM 低感受性あるい は耐性株がわずかに認められた Lactococcus garviae の薬剤感受性 ブリ ヒラマ サ シマアジ カンパチ ヒラメ ブリヒラおよびマ アジから分離された L. garviae の ABPC OTC DOTC EM LCM および FF に対する感受性は それ ぞれ図 13 ~ 19 に示したとおりである ABPC に対しては 由来魚種にかかわらず 95% 以 上の株が中以上の感受性を示した ただし ブリ属 魚類 ( ブリ ヒラマサ カンパチ ブリヒラ ) およびマ アジ由来株においては高感受性株の割合が高かった が シマアジおよびヒラメ由来株では中感受性株が 多かった また ブリ シマアジおよびカンパチ由 来株にはわずか ( 1 ~ 5% ) ではあるが耐性株が認め られた OTC に対しては 高感受性株から耐性株までが連 続的に分布するが ブリおよびカンパチ由来株では 中感受性株の比率が高いのに対して その他の魚種 由来の株には高感受性株が多い傾向があった DOTC に対しては 由来魚種にかかわらず高感受性 株主体 ( 56 ~ % ) で 79% 以上の株が中以上の感 受性を示した DOTC 耐性株は ブリおよびヒラマ サ由来株のなかにみられた ( 1% ) EM に対する感受性分布をみると ブリ属魚類お よびシマアジ由来株が 中感受性と耐性の 2 峰性の 分布を示したのに対して ヒラメおよびマアジ由来 株では 85% 以上の株が 中以上の感受性を示した ( 図 17 19) LCM に対する感受性分布は ヒラマサ シマアジ およびブリヒラ由来株を除いて中感受性と耐性の 2 峰性を示した 耐性株の比率は ヒラメ由来株を除 いて % 以上であったが もっとも高いブリヒラ 由来株では 85% を占めていた ( 図 18) FF に対する感受性は ブリ属魚類およびシマアジ 由来株では 中感受性株が主体 ( 74 ~ 87% ) であった のに対して ヒラメおよびマアジ由来株では高感受 性株の比率が中感受性株よりも高かった ( 図 17 19) ブリ由来株の供試薬剤に対する感受性分布の変化を 199年から 3 年ごとにまとめた結果は 図 2および 21 に示したとおりである OTC に対する感受性分布をみると 199 ~ 1992 年に主体 ( 68% ) をなしていた中感受性株が減少し 1996 年 ~ 1998 年以降は高感受性株が増加した ( 46 ~ 49% ) が 低感受性および耐性株の比率は変わっていない ( 図 2 中 ) 199 年から 21 年における ブリ由来株の OTC に対する感受性分布の年変化は 図 22 に示したとおりである 中感受性株が減少し高感受性株が増加したのは 1994 年以降である OTC 耐性株は 1994 年に多く ( 7% ) 分離されたが そ の後減少して 1998 ~ 1999 年にはみられなくなった -33-
ABPC ( n=74) DOTC ( n=111) LCM ( n=3259) OTC ( n=346) EM ( n=3614) FF ( n=2653 ) Lactococcus garviae ABPCOTCDOTCEMLCM FF ABPC ( n=69 ) DOTC ( n=88 ) LCM ( n=155 ) OTC ( n=21 ) EM ( n=225 ) FF ( n=2 ) Lactococcus garviae ABPC OTC DOTC EM LCM FF ABPC ( n=51 ) DOTC ( n=52 ) LCM ( n=18 ) OTC ( n=112 ) EM ( n=12 ) FF ( n=111 ) Lactococcus garviae ABPC OTC DOTC EM LCM FF -34-
No.4 25- (23) ABPC ( n=21 ) DOTC ( n=34 ) LCM ( n=77 ) OTC ( n=79) EM ( n=82) FF ( n=67 ) Lactococcus garviae ABPC OTC DOTC EM LCM FF ABPC ( n=4) DOTC ( n=5) LCM ( n=12) OTC ( n=25) EM ( n=2) FF ( n=19 ) Lactococcus garviae ABPC OTC DOTC EM LCM FF ABPC ( n=4) DOTC ( n=8) LCM ( n=13) OTC ( n=2) EM ( n=26) FF ( n=23 ) Lactococcus garviae ABPC OTC DOTC EM LCM FF -35-
福田 穣 ABPC ( n=1) DOTC ( n=7) LCM ( n=1) OTC ( n=9) EM( n=1) FF( n=9) 図 19. マアジから分離された Lactococcus garviae の ABPC OTC DOTC EM LCM および FF に対する感受性. 199-92 ( n=42 ) 199-92 ( n=24 ) 199-92 ( n=162) 1993-95 ( n=23) 1993-95 ( n=1937) 1993-95 ( n=32) 1996-98 ( n=25) 1996-98 ( n=699) 1996-98 ( n=31) 1999-1 ( n=227) 1999-1 ( n=62) 1999-1 ( n=246) ABPC ABPC OTC OTC DOTC DOTC 図 2. 各年代にブリから分離された Lactococcus garviae の ABPC OTC および DOTC に対する感受性. しかし 2 ~ 21 年には増加傾向にある ( 5 ~ 13%) EM に対しては どの年代でも中感受性株が主体 ( 54 ~ 68% ) であるが 199 ~ 1992 年と比較して 1993 年以降は高感受性株が減少し 耐性株が増加している ( 図 21 左 ) 199 年から 21 年における ブ リ由来株の EM に対する感受性分布の年変化は 図 23 に示したとおりである EM 耐性株は 1991 年に分離されて以来 1992 年以降は 15 ~ 35% を占めてきた 耐性株の比率は 2 年に急増して 21 年には 48% に達した 同様に EM に対する感受性分布の変化をブリ 歳魚由来株についてまとめた結果は -36-
No.4 25- (23) 199-92 ( n=23) 199-92 ( n=22) 199-92 ( n=16) 1993-95 ( n=1957) 1993-95 ( n=1962) 1993-95 ( n=1123) 1996-98 ( n=698) 1996-98 ( n=643) 1996-98 ( n=696) 1999-1 ( n=729) 1999-1 ( n=434) 1999-1 ( n=674) EM LCM FF EM LCM Lactococcus garviae EM LCM FF FF 199 ( n=6) 1994 ( n=663) 1998 ( n=241) 1991 ( n=62) 1995 ( n=883) 1999 ( n=21) 1992 ( n=82) 1996 ( n=233) 2 ( n=274) 1993 ( n=391) 1997 ( n=225 ) 21 ( n=145) Lactococcus garviae OTC -37-
199 ( n=64) 1994 ( n=679) 1998 ( n=243) 1991 ( n=65) 1995 ( n=877) 1999 ( n=213) 1992 ( n=11) 1996 ( n=231) 2 ( n=349 ) 1993 ( n=41) 1997 ( n=224) 21 ( n=167 ) Lactococcus garviae EM 199 ( n=4) 1994 ( n=32) 1998 ( n=182) 1991 ( n=28) 1995 ( n=31) 1999 ( n=125) 1992 ( n=58) 1996 ( n=149) 2 ( n=254) 1993 ( n=151) 1997 ( n=144) 21 ( n=6 ) Lactococcus garviae EM -38-
No.4 25- (23) 24 6% 76% 23 28 1992 OTC 29 1994 52% 69 83% 1996 98 11% 2 47% 21 1999 21 21% 42% 199 21 LCM 199 1992 OTC 78% 1993 3 OTC 1995 1996 1998 1997 4 15% 84 91% 21 199 1998 17% 21 25% 21 LCM 25 LCM 1991 NFS 28 OA 28 1994 49% 1996 77 FF 29 92% 199 1991 NFS 1996 83 89% 1 1997 1997 2 1 4% 21 OA 1991 1994 FF ABPC 2 DOTC 9% 1997 2 ABPC ABPC 29 1994 1995 4 DOTC 199 1993 1995 5 1992 1998 2 FF 21 Streptococcus iniae 58 81% 199 2 S. iniae NFS ABPC OTC EM LCM Edwardsiella tarda FF 31 32 E. tarda SMM NFS OA ABPC OTC FF 26 27 OTC EM LCM FF SMM OTC 1 54% 77% NFS OA ABPC OTC FF 199 3 33 34 EM 34 81 96% 1996 OA.7% ABPC 13% OTC 1998 14% 14 17% EM 1997 1 199 3 28 LCM 34 29 SMM 1996 1998 1996 1998 1996-39-
199 ( n=63) 1994 ( n=684) 1998 ( n=199) 1991 ( n=6) 1995 ( n=879) 1999 ( n=137) 1992 ( n=97) 1996 ( n=232) 2 ( n=24) 1993 ( n=399) 1997 ( n=212) 21 ( n=93 ) Lactococcus garviae LCM SMM ( n=156 ) OA ( n=758) OTC ( n=853) NFS ( n=738) ABPC ( n=181) FF ( n=384 ) Edwardsiella tarda SMM NFS OA ABPC OTC FF 199 1 1997 1994 2 1 1998 2 1999 1 NFS 33 1991 1 Vibrio OTC 33 2 3 199 1 1999 V. anguillarum FF 34 V. anguillarum -4-
No.4 25- (23) SMM ( n=13) OA ( n=46) OTC ( n=46) NFS ( n=23) ABPC ( n=2) FF ( n=39 ) Edwardsiella tarda SMM NFS OA ABPC OTC FF 199-92 ( n=52) 199-92 ( n=96 ) 199-92 ( n=124) 1993-95 ( n=2) 1993-95 ( n=79 ) 1993-95 ( n=25) 1996-98 ( n=34) 1996-98 ( n=233 ) 1996-98 ( n=211) 1999-1 ( n=7) 1999-1 ( n=213) 1999-1 ( n=218) SMM NFS OA SMM NFS OA Edwardsiella tarda SMM NFS OA 1977 1978 1.56µg/m l.1µg/m l.8µg/ml 45 V. anguillarum 3 SMM 1981 1982 199 SMM 35 34 NFS OA OTC NFS OA OTC MIC SMM -41-
福田 穣 199-92 ( n=25) 199-92 ( n=127 ) 199-92 ( n=81) 1993-95 ( n=35) 1993-95 ( n=21 ) 1993-95 ( n=8) 1999-1 ( n=58) 1999-1 ( n=27 ) 1999-1 ( n=115) 1996-98 ( n=63) 1996-98 ( n=255 ) 1996-98 ( n=18) ABPC OTC FF ABPC OTC FF 図 29. 各年代にヒラメから分離された Edwardsiella tarda の ABPC OTC および FF に対する感受性. 199 ( n=23) 1994 ( n=65) 1998 ( n=116 ) 1991 ( n=42) 1995 ( n=8) 1999 ( n=61 ) 1992 ( n=62) 1996 ( n=6) 2 ( n=17 ) 1993 ( n=56) 1997 ( n=79) 21 ( n=12 ) 図 3. ヒラメから分離された Edwardsiella tarda の OTC に対する感受性分布の経年変化. -42-
大分海水研調研報 No.4 25- (23) 主要魚病細菌の薬剤感受性 NFS ( n=166) OTC ( n=334) LCM ( n=295 ) ABPC ( n=42) EM ( n=33) FF ( n=221) 図 31. ヒラメから分離された Streptococcus iniae の NFS ABPC OTC EM LCM および FF に対する感受性. NFS ( n=5 ) OTC ( n=16 ) LCM ( n=18 ) ABPC ( n=5) EM ( n=16) FF ( n=15) 図 32. カワハギ科魚類から分離された Streptococcus iniae の NFS ABPC OTC EM LCM および FF に対する感受性. の V. anguillarum の薬剤感受性については 大きな変化がなかったと考えても良いであろう 現在 スズキ目魚類のビブリオ病治療薬として スルフォンアミド化合物の SMM とスルフィソゾール ( SIZ ) テトラサイクリン系抗生物質の OTC クロラムフェニコール系抗生物質 TP の製剤が承認されている これらのうち 現在養殖現場で汎用されている薬剤は OTC であるが V. anguillarum の OTC に対する感受性低下がみられないことから V. anguillarum 感染症の治療においては 現在までに薬剤耐性の問題がおこっていないものと思われる P. damselae subsp. piscicida は ブリの類結節症の 6-8) 原因細菌であるが ブリ以外のブリ属魚類をはじ 1) め多くの魚種に感染することが知られている ブリの類結節症発見の初期に P. damselae subsp. piscicida 分離株は ABPC や NB に感受性を示すこと 7-9) が報告されているが その後の P. damselae subsp. piscicida の薬剤感受性の変化についても ブリ由来株を主体とした耐性株の出現情報を含む比較的多く 451-21) の報告がある 現在 スズキ目魚類の類結節症治療薬として承認されている薬剤は スルフォンアミド化合物の SIZ キノロン系合成抗菌剤の OA とフルメキン ( FMQ ) βラクタム系抗生物質の ABPC とアモキシシリン -43-
199-92 ( n=23) 199-92 ( n=15 ) 199-92 ( n=8) 1993-95 ( n=35) 1993-95 ( n=9) 1993-95 ( n=18) 1996-98 ( n=71) 1996-98 ( n=7) 1996-98 ( n=85) 1999-1 ( n=37) 1999-1 ( n=11 ) 1999-1 ( n=61) NFS ABPC OTC NFS ABPC OTC Streptococcus iniae NFS ABPC OTC 199-92 ( n=81) 199-92 ( n=8 ) 199-92 ( n=43) 1993-95 ( n=112) 1993-95 ( n=11) 1993-95 ( n=81) 1996-98 ( n=81) 1996-98 ( n=7 ) 1996-98 ( n=64) 1999-1 ( n=56) 1999-1 ( n=35 ) 1999-1 ( n=33) EM LCM FF EM LCM FF Streptococcus iniae EM LCM FF -44-
No.4 25- (23) AMPC TP FF FF NB BCM FOM 1989 P. damselae subsp. piscicida OA FMQ ABPC AMPC TP ABPC FFBCMFOM OA ABPC 1994 ABPC P. damselae subsp. piscicida NFS 2 ABPC 9 ABPC 1981 P. ABPC damselae subsp. piscicida ABPC FF BCM FOM 1982 ABPC ABPC MIC 25µg/ml 51-12 1983 ABPC ABPC 1314221 OA 199 1984 MIC 3.1µg/m l OA OA 1314192 1985 ABPC 1999 OA 1316 P. damselae subsp. piscicida NFS ABPC 1982 MIC 112 6.2µg/m l 1984 1314 OTC TP P. damselae subsp. piscicida 1979 MIC OTC TP µg/m l 198 12 199 1992 P. damselae subsp. piscicida 199 NFS P. damselae subsp. piscicida OTC 22 2 1989 NB 199 FF 1992 BCM P. damselae subsp. piscicida 21 1994 FOM 199 FF OTC OTC 23 BCM FOM 3 ABPC OA OTC 1986 1988 P. damselae 2425 subsp. piscicida NB L. garviae 16 26 MIC.78µg/m l 1989 1992 18221 199 1992 TBPC NB OTC DOTC EM OL 1998 FF BCM LM JM FOM SPM FF 3 LCM 199 FF 21 TBPC 1992 21 1989 1992 1995 19 FF MIC 6.25 25µg/ml 1981 L. garviae -45-
427 OTC MIC1.6µg/m l DOTC MIC LCM 42728.78µg/ml LCM 1982 DOTC MIC.4µg/m l L. garviae FF OTC MIC 6.2 25µg/ml FF 1 1987 DOTC 199 L. garviae FF MIC25µg/ml MIC 15µg/m l 28 199 1992 L. garviae 1991 21 OTC DOTC FF L. garviae FF 1994 OTC 1993 OTC TBPC TBPC L. L. garviae OTC garviae ABPC 1986 L. garviae 1974 1986 EM MIC.2µg/ml L. garviae ABPC 45128-33 4527-2935 LCM MIC MIC.1 1.6µg/m l 282932.8µg/m l 1987 199 1992 MIC 3 EM LCM L. garviae MIC 15µg/ml 4% 1994 1995 28 µg/ml MIC 6µg/ml 199 EM LCM ABPC MIC 5 3µg/ml MIC 3µg/ml L. garviae ABPC EM LCM 1991 EM L. garviae 1992 1991 EM L. garviae EM 1991 EM L. garviae 198 EM LCM 1997 L. garviae 1992 2 9 1993 21 2 1995 L. garviae LCM 1 EM 34 EM 1993 1995 L. garviae L. garviae EM 1997 OTC EM LCM -46-
No.4 25- (23) EM NFS 2 21 41 NFS E. tarda NFS 198 1995 E. tarda OA 4539 1991 MIC 2 1µg/m l 1994 MIC 1µg/ml 1992 L. garviae OA 42 E. tarda E. tarda SMM ABPC FF E. tarda 36-38 1982 E. tarda SMM MIC 1.56 3.13µg/m l ABPC MIC 3.13µg/ml OTC 5 1986 1995 SMM MIC E. tarda µg/m l ABPC 45394 198 1982 FF MIC.2 E. tarda OTC 39 1.56µg/ml MIC.39.78µg/m l 45 1986 1983 1992 1989 MIC 1.56 SMM MIC 6.25µg/ml 12.5µg/m l 199 4 SMM MIC µg/ml ABPC 39 1983 1992 39 FF MIC.2.39µg/m l 1989 1991 1 OTC MIC µg/ml E. tarda 4 199 1974 2 NFS MIC 6µg/m l OA MIC.1µg/m l ABPC MIC.8µg/m l OTC MIC E. tarda OTC.2µg/m l SMM MIC 36 µg/m l 198 1982 1998 OTC OTC SMM MIC 3.13µg/m l NFS MIC.4µg/m l OA OTC MIC.2µg/m l ABPC MIC 1.56µg/m l OTC MIC.78µg/ml 45 E. tarda 198 1982 NFS MIC SMM.1 3.1µg/m l 45 1986 1995 2 MIC.1 6.25µg/ml 39 43 1996 NFS MIC S. iniae 15µg/ml 1 1997 MIC 5 15µg/ml 44 S. iniae -47-
福田 穣 ズキ目では L. garviae 感染症の治療薬が利用できるが 現在ヒラメで使用できる薬剤は OTC 製剤だけである 1981 ~ 1985 年に長崎 三重および徳島県のヒラメから分離された S. iniae は NFS( MIC.125 ~.2µg/m l) ABPC( MIC.125 ~.5µg/m l) OTC ( MIC.39 ~.8µg/m l) EM( MIC.5 ~.1µg/m l) LCM( MIC.2µg/ml) のいずれにも高い感受性を示す 4545) ことが報告されている しかし 1986 ~ 1995 年の間に愛媛県のヒラメからはOTCEMおよびLCM 耐性 ( MIC > µg/m l) 株が分離され NFS( MIC.1 ~ 12.5µg/ml) や ABPC( MIC.1 ~ 3.13µg/ml) に対し 39) ても感受性の低下が認められている また 愛媛株は FF に対して高から中感受性 ( MIC.39 ~ 39) 6.25µg/ml) を示すことが報告されている 本県に おける 199 年以降の分離株にも NFS OTC EM および LCM 低感受性および耐性株が含まれており さらに 1994 年以降には FF 低感受性および耐性株が出現していることから これらの薬剤に対する S. iniae の耐性化の進行が危惧される 特に ヒラメ養殖で唯一使用できるレンサ球菌症治療薬である OTC に対して 低感受性および耐性株が存在することは重要な問題である S. iniae の耐性化を助長しないよう ヒラメ養殖における OTC の使用は慎重に行わなければならない 摘 1) 199 ~ 21 年の薬剤感受性測定記録を集計し 大分県の海産魚類から分離された主要魚病細菌の薬剤感受性について整理を行った 2) V. anguillarum については SMM に中感受性 NFS OA および OTC に高感受性を示す株が主体であった 3) P. damselae subsp. piscicida ブリ由来株における ABPC 耐性株の割合は 1994 年以降減少し 1999 ~ 21 年には耐性株がほとんどみられなくなった 4) P. damselae subsp. piscicida は薬剤感受性分布から OTC と TP に対して低感受性株が主体のブリ型と 高感受性株主体のヒラメ型に分けることができる 5) ブリ由来 L. garviae の EM 耐性および LCM 耐性株はともに 1991 年に出現し その後増加した 6) ブリレンサ球菌症ワクチンの普及に伴う L. garviae の薬剤感受性回復傾向は 21 年までの 要 本報の結果からは確認できなかった 7 ) 199 年に存在していたヒラメ由来 E. tarda OTC 耐性株は 1998 年以降に割合が増加傾向にある 8) ヒラメ由来 S. iniae についても 各種薬剤に対する低感受性および耐性株が出現している 謝 本報で使用した 12 年間にわたる魚病細菌の薬剤 感受性測定結果は 大分県水産試験場ならびに海洋 水産研究センターで実施された疾病診断に付随して 残されていた記録です 薬剤感受性測定を実施され た歴代の疾病診断担当の方々に深く敬意を表しま す また 膨大な測定結果の整理にあたり 多大な 助力をいただいた高野順子女史に厚く感謝いたしま す 文 1) 福田穣 : 198 年から 1997 年に大分県で発生し た養殖海産魚介類の疾病. 大分海水研調研報 ( 2 ) 41-73 ( 1999 ). 2) 室賀清邦 : Vibrio anguillarum およびその感染症 に関する研究. 広大水畜産学部紀要 14( 1 ) 11-215 ( 1975 ). 3) 城泰彦 大西圭二 室賀清邦 : 養殖ハマチ病 魚から分離された Vibrio anguillarum. 魚病研究 14( 1 ) 43-47 ( 1979 ). 4) 小川七朗 畑井喜司雄 安元進 平川栄一 安永統男 : 近年長崎県内の養殖魚から分離され た各種魚病細菌の薬剤感受性. 長崎水試研報 ( 8 ) 91- ( 1982 ). 5) 畑井喜司雄 安元進 塚原淳一郎 平川栄一 安永統男 市来忠彦: 1982 年に長崎県内の養 殖魚から分離された各種魚病細菌の薬剤感受 性. 長崎水試研報 ( 9 ) 13-23 ( 1983 ). 6)Gauthier G. B. Lafay R. Ruimy V. Breittmayer J. L. Nicolas M. Gauthier and R. Christen:Small-subunit rrna sequences and whole DNArelatedness concur for the reassignment of Pasteurellapiscicida( Snieszko et al. ) Janssen and Surgalla to thegenus Photobacterium as Photobacterium damsela subsp. piscicida comb. nov.. Int. J. Syst. Bacteriol. 45 139-144 ( 1995 ). 7)Simidu U. and S. Egusa: A re-examination of the fish-pathogenic bacterium that had been reported as a 辞 献 -48-
大分海水研調研報 No.4 25- (23) 主要魚病細菌の薬剤感受性 Pasteurella piscicida. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish. 38 ( 8 ) 83-812 ( 1972 ). 8) 楠田理一 山岡政興 : 養殖ハマチの細菌性類結節症の原因菌に関する研究 -Ⅰ. 形態学的なら びに生化学的性状による種の同定. 日水誌 38 ( 12 ) 1325-1332 ( 1972 ). 9) 楠田理一 井上喜久治 : 養殖ハマチの類結節症 に対するアンピシリンの水産薬としての応用に 関する研究 - Ⅰ. 類結節症に対する in vitro での 抗菌力 耐性獲得および耐性消失. 日水誌 42 ( 9 ) 969-973 ( 1976 ). 1 ) 和田有二 : 1982 年に愛媛県内で分離された α-haemolytic Streptococcus sp. および Pasteurellapiscicida の薬剤感受性. 愛媛水試研報 ( 3 ) 14-21 ( 1983 ). 11) Takashima N. T. Aoki and T. Kitao:Epidemiological surveillance of drug-resistant strain of Pasteurella piscicida. Fish Pathol. 2( 2-3 ) 29-217 ( 1985 ). 12 ) 楠田理一 川合研児 安部和智 : 1978 年から 1982 年までの間に養殖ブリから分離された Pasteurella piscicida の薬剤感受性. 高知大 海洋 生物研報 ( 8 ) 15-23 ( 1986 ). 13 ) 楠田理一 板岡睦 川合研児 : 1984 年および 1985 年に養殖ブリから分離された Pasteurella piscicida の薬剤感受性. 日水誌 54( 9 ) 1521-1526 ( 1988 ). 14 ) 塚原淳一郎 平川栄一 安永統男 : 長崎県内で 分離された類結節症の原因菌 Pasteurella piscicida の薬剤感受性. 長崎水試研報 ( 14 ) 51-56 ( 1988 ). 15) Takahashi Y. and T. Endo: Evaluation of the efficacy of an ultrafine preparation of oxolinic acid in the treatment of pseudotuberculosis in yellowtail. Nippon Suisan Gakkaishi 53( 12 ) 2157-2162 ( 1987 ). 16 ) 楠田理一 杉浦浩義 川合研児 : 1986 年から 1988 年に養殖ブリから分離された Pasteurella piscicida の薬剤感受性. 日水誌 56( 2 ) 239-242 ( 199 ). 17) Palmer R. K. Kawai and R. Kusuda: In vitro activity of quinolone antibacterials against selected fish pathogens. Gyobyo Kenkyu 27( 3 ) 131-142 ( 1992 ). 18) Kim E. and T. Aoki: Drig resistance and broad geographical distribution of identical R plasmids of Pasteurella piscicida isolated from cultured yellowtail in Japan. Microbiol. Immunol. 37( 2 ) 13-19 ( 1993 ). 19 ) 松岡学 : 愛媛県下の養殖海産魚における疾病の発生状況および Pasteurella piscicida 感染症に関する研究. 愛媛水試研報 ( 8 ) 1-177 ( 2 ). 2) Kitao T. T. Yoshida R. Kusuda T. Matsuoka S. Nakano M. Okada and T. Ooshima: In vitro antibacterial activity of bicozamycin against Pasteurella piscicida. Gyobyo Kenkyu 27( 2 ) 19-113 ( 1992 ). 21) Sano M H. Nakano T. Kimura and R. Kusuda:Therapeutic effect of fosfomycin on experimentally induced pseudotuberculosis in yellowtail. Fish Pathol. 29( 3 ) 187-192 ( 1994 ). 22) Fukui H. Y. Fujikara and T. Kano: In vitro and in vivo antibacterial activities of florfenicol a new fluorinated analog of thiamphenicol against fish pathogens. Fish Pathol. 22( 4 ) 21-27 ( 1987 ). 23 ) 福田穣 松岡学 水野芳嗣 成田公義 : 養殖ヒラメ稚魚に発生した Pasteurella piscicida 感染症. 魚病研究 31( 1 ) 33-38 ( 1996 ). 24) Elder A. C. Ghittino L. Asanta E. Bozzetta M. Goria M. Prearo and H. Bercovier: Enterococcus seriolicida is a junior synonym of Lactococcus garviae a causative agent of septicemia and meningoencephalitis in fish. Curr. Microbiol. 32 85-88 ( 1996) 25) Teixeira L. M. V. L. C. Merquior M. C. E. Vianni M. G. S. Carvalho S. E. L. Fracalanzza A. G. Steigerwalt D. J. Branner and R. R. Facklam:Phenotypic and genotypic characterization of atypical Lactococcus garviae strains isolated from water buffalos with subclinical mastitis and confirmation of L. garviae as a senior subjective synonym of Enterococcus seriolicida. Int. J. Syst. Bacteriol. 46 664-668 ( 1996) 26 ) 楠田理一 川合研児 豊嶋利雄 小松功 : 養 殖ハマチから分離された Streptococcus 属の新魚 病細菌について. 日水誌 42( 12 ) 1345-1352 ( 1976 ). 27 ) 中村吉成 : ドキシサイクリンのすべて. 魚病研 究 17( 1 ) 67-76 ( 1982 ). 28) Aoki T. K. Takami and T. Kitao: Drug resistance in a non-hemolytic Streptococcus sp. isolated from cultured yellowtail Seriola quinqueradiata. Dis. Aquat. Org. 8 171-177 ( 199 ). 29) Aoki T. S. Takeshita and T. Kitao: Antibacterial action of chemotherapeutic agents against non-hemolytic Streptococcus sp. isolated from -49-
福田 穣 cultured marine fish yellowtail Seriola quinqueradiata. Bull. Japan. Soc. Sci. Fish. 49 ( 11 ) 1673-1677 ( 1983 ). 3 ) 塩満捷夫 楠田理一 大須賀穂作 宗清正廣 : エリスロマイシンに関する魚病化学療法的研究 -Ⅱ. 養殖ハマチの連鎖球菌症に対する野外治療効果. 魚病研究 15( 1 ) 17-23 ( 198 ). 31 ) 片江宏巳 : エリスロマイシンのすべて. -ブリ連鎖球菌症への応用に関する研究 -. 魚病研究 17( 1 ) 77-85 ( 1982 ). 32 ) 楠田理一 鬼崎忍 : ブリ連鎖球菌 Streptococcus sp. に対するマクロライド系抗生物質およびリンコマイシンの試験管内作用. 魚病研究 2( 4 ) 453-457 ( 1985 ). 33 ) 竹丸巌 楠田理一 : Streptococcus sp. および各種魚病細菌に対するジョサマイシンの試験管内抗菌作用. 日水誌 54( 9 ) 1527-1531 ( 1988 ). 34 ) 佐藤公一 : ブリ連鎖球菌症耐性菌対策として一斉休薬の取り組み. 平成 6 年度投薬手法効率化対策事業養殖現場における薬剤耐性菌対策事例集 日本水産資源保護協会 7-1 ( 1995 ). 35) 柏木哲 杉本昇 渡辺和子 大田外之 楠田理一 : 養殖ハマチの連鎖球菌症に対するニフルスチレン酸ナトリウムの化学療法学的研究 - Ⅰ. 連鎖球菌症原因菌に対する試験管内作用. 魚病研究 12( 1 ) 11-14 ( 1977 ). 36 ) 楠田理一 伊丹利明 宗清正広 中島博司 : 養殖チダイから分離された Edwardsiella tarda の性状について. 日水誌 43( 2 ) 129-134 ( 1977 ). 37 ) 安永統男 小川七朗 畑井喜司雄 : 数種の海産 養殖魚から分離された病原性 Edwardsiella tarda の性状について. 長崎水試研報 ( 8 ) 57-65 ( 1982 ). 38 ) 中津川俊雄 : ヒラメ幼魚から分離された Edwardsiella tarda. 魚病研究 18( 2 ) 99-11 ( 1983 ). 39 ) 松岡学 和田有二 : 1986 年から 1995 年にヒラ メ病魚から分離された Edwardsiella tarda および Streptococcus iniae の薬剤感受性. 水産増殖 44 ( 4 ) 445-449 ( 1996 ). 4 ) 金井欽也 : スルファモノメトキシン オルメト プリム合剤のヒラメエドワジエラ症に対する治 療効果. 長崎大学水産学部研究報告 ( 83 ) 1-4 ( 22 ). 41 ) 福田穣 柏木哲 椎原宏 : 養殖ヒラメの滑 走細菌症に対するニフルスチレン酸ナトリウム の治療効果. 大分県水試調研報 ( 15 ) 57-61 ( 1993 ). 42 ) 福田穣 小原義隆 : ヒラメ稚魚におけるオキ ソリン酸の吸収と排泄. 大分県水試調研報 ( 14 ) 66-73 ( 199 ). 43 ) 佐古浩 : 海水魚および淡水魚から分離された β 溶血性連鎖球菌の性状ならびに病原性. 水産 増殖 41( 3 ) 387-395 ( 1993 ). 44 ) 中津川俊雄 : 養殖ヒラメの連鎖球菌症について. 魚病研究 17( 4 ) 281-285 ( 1983 ). 45 ) 佐古浩 : 各種化学療法剤に対するβ 溶血性連 鎖球菌症原因菌の感受性. 水産増殖 41( 3 ) 397-44 ( 1993 ). --