愛媛県農林水産研究所果樹研究センター研究報告第 6 号 一方 これらの育成品種が全国的な注目を集めることで 品種の不適切な持ち出しなどの事例が発生する懸念が高まりつつある 長い年月をかけて開発した研究成果である新品種は 知的財産として適切に管理し本県カンキツ生産の発展に有効活用する必要がある このた
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1 愛媛果樹セ研報第 6 号 1-10 (2018) 愛媛県育成カンキツ品種識別法の妥当性検証に 利用可能な CAPS マーカーの選抜 岡本充智 奥貞丈博 山本紗綺 二宮泰造 Selection of cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) markers to identify original citrus cultivars released in the breeding program in Ehime prefecture Mitsutoshi Okamoto, Takehiro Okusada, Saki Yamamoto and Taizou Ninomiya. Summary Protection of breeder s rights in citrus cultivar development is very important. Cultivar identification based on cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) makers has been developed. 1. From 29 CAPS markers previously described, 22 CAPS markers were selected and the specific genotypes were obtained for three new citrus cultivars and eight breeding lines in the breeding program of Ehime prefecture. 2. Concerning the identification ility of these 22 markers, the maximum value of probility was P1= , based on the variety identification theory by Ukai. For obtaining the specific electrophoresis pattern of each citrus, the maximum number of markers was 15, while the minimum was five. In hybrids crossed by using the same seed parent (Ehimekashi dai-28-gou), a small number of marker sets were necessary to identify. It seems that difficulty to identify depends on the degree of inbreeding. 3. For saving the detection time and cost, minimized CAPS marker sets were found to identify 11 varieties from the genotype data based on 22 markers. The marker sets were obtained in 36 combinations with six markers as one set. Key Words: citrus, CAPS markers, smallest marker set, PCR Ⅰ 緒言本県のカンキツ生産は それぞれの地域の立地や気候条件を活かして各地で特徴ある産地を形成している 特に 愛媛果試第 28 号 ' 現在 : 南予地方局産業振興課 ( 全農登録商標 紅まどんな ) や 甘平 ' など本県が独自に育成した品種 ( 重松ら ) は市場評価も高く 生産量は年々拡大しており 各産地においては 生産振興や流通 販売強化などに努めている - 1-1
2 愛媛県農林水産研究所果樹研究センター研究報告第 6 号 一方 これらの育成品種が全国的な注目を集めることで 品種の不適切な持ち出しなどの事例が発生する懸念が高まりつつある 長い年月をかけて開発した研究成果である新品種は 知的財産として適切に管理し本県カンキツ生産の発展に有効活用する必要がある このため 権利の侵害と思われる事例が発生した場合 科学的な根拠に基づく調査 解析が必要となることから 果実の形状や重さその他の表現形質の比較法や より効率的で精度の高い DNA による品種識別技術の開発が急務となっている カンキツにおける品種識別技術開発に関する報告は Shimada ら (2014) が開発した 708 個の CAPS マーカーを基本に これまで二宮ら (2015) や Nonaka ら (2017) による品種識別法の報告など複数存在し 国内流通するカンキツ品種の大半を識別することが可能である ところが 平成 27 年 6 月 24 日の知的財産高等裁判所の判決で DNA 分析の手法は 全ゲノムを解析するのではなく 特定のプライマーを用いることにより 品種に特徴的であると考えられる一部のDN A 配列を分析するものであるから 品種識別に利用する際には その正確性 信頼性を担保するためにも 妥当性が確認されたものとして確立された分析手法を採用することが必要である とされた事から 今後 これらの識別技術の妥当性を検証する事が必要となった 妥当性検証を行うためには 品種により増幅が不安定なマーカーや 電気泳動後のバンド像が不明瞭なマーカーなどをあらかじめ除く必要がある さらに 保護の対象とする品種については 登録品種はもちろんのこと 近年登録前の有望系統における不適切な持ち出しと考えられる事例も国内において散見される ( 吉岡 2017) ことから 育成中の有望系統も含めて検討する必要がある そこで 本稿では二宮ら (2015) および Nonaka ら (2017) の論文掲載のマーカーの中から 妥当性検証が実施可能なマーカーを選抜するとともに 選抜したマーカーを用いた場合の愛媛県育成品種や有望な育成系統における遺伝子型データを取得した 表 1 供試材料の名称と交配組合せ 調査番号 供試品種系統名称 交配組合せ 品種系統の別 1 愛媛果試第 28 号 南香 天草 品種 2 甘平 西之香 ポンカン 品種 3 媛小春 清見 黄金柑 品種 4 愛媛 43 号 愛媛 27 号 ( 清見 ミネオラ ) 中間母本 ( アンコール 不知火 ) 系統 5 愛媛 44 号 日向夏 はるみ 系統 6 愛媛 45 号 愛媛 27 号 ( 清見 ミネオラ ) 中間母本 ( アンコール 不知火 ) 系統 7 愛媛 46 号 愛媛果試第 28 号 はるみ 系統 8 愛媛 47 号 愛媛果試第 28 号 中間母本 ( アンコール 興津早生 ) 系統 9 愛媛 48 号 愛媛果試第 28 号 甘平 系統 10 愛媛 49 号 愛媛果試第 28 号 中間母本 ( アンコール 興津早生 ) 系統 11 愛媛 50 号 はれひめ 愛媛 14 号 ( アンコール 大谷伊予柑 ) 系統 Ⅱ 材料及び方法培している愛媛県が独自に育成した3 品種と 1 供試材料と DNA の抽出育成中の8 系統を用いた ( 表 1) ゲノム DNA 品種識別の供試材料は みかん研究所で栽は6 月に採取した各品種 系統の当年葉 80 mg - 2-2
3 岡本 奥貞 山本 二宮 : 愛媛県育成カンキツ品種識別法の妥当性検証に利用可能な CAPS マーカーの選抜 から DNeasy R Plant Mini Kit(( 株 ) キアゲ ン ) を用いて キット添付のプロトコルにより抽出した 2 CAPS マーカー二宮ら (2015) および Nonaka ら (2017) に記載されている品種識別に利用可能な CAPS マーカーのうち 27 種 ( 表 2) を適用した 表 2 供試した遺伝子マーカーの名称及びプライマー配列 マーカー名称 制限 酵素 Forward mer Reverce mer z 温度 条件 y 引用 AI0326/NdeⅡ NdeⅡ CAGAACAAAGCGATGGAACC 20 CCCAAGTCCTGACCAACACTA AI0413/ MspⅠ MspⅠ ATACCATTCCGGTCCTGAAAG 21 GCTCCACTTGCTCCAAACA AI0636/EcoRⅠ EcoRⅠ AAAGATTGGCCACTATTTTGA 21 GGGCGATTGCTTATTTTGT Bf0029/StyⅠ StyⅠ GAGCCTGAGATTCGGAACATA 21 GGAGGCCAACATCAACTG Bf0036/MspⅠ MspⅠ TCAAAACCCCAATCTACCGT 20 CTGCTTGAGTAACCCCAACTT Bf0145/MspⅠ MspⅠ CATCTCCATCAGTCCCCACAG 21 CAACCATCAAGGCAAGAACCA Bf0158/PvuⅡ PvuⅡ GGAATTCGAACCCAAGCCTAA 21 GCGATAACGGCGACAGTAGAG CP1624/MspⅠ Msp Ⅰ ACCTCTGTCTTGGCAAGC 18 AGTTTGATCAAAGAGTGACCG 21 Td 1 Gn0043/HincⅡ HincⅡ TTTCCAGTTCCCTTTTGAGAG 21 AGAGCTTTCCATGCAACGGCTT IF0208/HinfⅠ HinfⅠ AATATTTCTGCGAATCACTGA 22 GCAAACCACACCAAGGA Mf0097/DraⅠ DraⅠ GCAACTCATTATTCATTTCTC 21 CTCCATTTTCTTGTTGGCACA Tf0062/RsaⅠ RsaⅠ ACTTCATCAGCTGCGACAACT 21 CGATTGCGTGAAGATTGGTAT 21 Td 1 Tf0150/HinfI HinfI ACAGAAGAGGCCACAATCT 19 TTTCTTCAGCTAAAGCGTCAC 21 Td 1 Tf0168/RsaⅠ RsaⅠ TTTGATCCTCCGTGGGCATAC 21 CGCCTATCACAGCCGAAATG 20 Td 1 Tf0235/HaeⅢ HaeⅢ ATTCTTGACGAAGGGCATATC 21 GAGCAGGAACGGCATGAC 18 Td 1 Tf0271/RsaⅠ RsaⅠ AGTTATCCAACGGAATCT 18 CATGGCAATACTTTGTAGTTC 21 Td 1 Tf0326/HhaⅠ HhaⅠ TTGACGCCACTAAGTA 16 AGCATTTGGGTATCATATCTA Tf0300/BamHⅠ BamHⅠ GCTGCGATTAGGGTTGC 17 TAAACATATCCCACGGAACAT 21 Td 1 Cp0089/HindⅢ HindⅢ CGGGCACTTTCAATAATCGT 20 CAATTTCAGGCCTCCGCTTTC 21 Td 2 Cp0635/DraⅠ DraⅠ GGCCTGGTGTCAATCAT 17 TGCAAGCTGCCATCTTACAAC 21 Td 2 Tf0001/MspⅠ MspⅠ AAAAGTTCACAAGTACGAGGG 21 AGCAATCCTTGAGAATACGCA 21 Td 2 Tf0013/RsaⅠ RsaⅠ GTTCTATGCGTTGTTAAGGTT 21 GCCCTGAAGTTGAACGAGAC 20 Td 2 Tf0293/HindⅢ HindⅢ CTTTCTTTCCGGTTATCTAA 20 TGCAGCAGAAGGCCTCTTATA 21 Td 2 Tf0318/HincⅡ HincⅡ GACGACTACCGCTACTACTAC 21 ACAGCCAGGAACAAGCTTT 19 Td 2 Tf0386/MspⅠ MspⅠ GACAAGAAAATTACTATACGG 21 GGAATCAACCATGAGTGACA 20 Td 2 Tf0419/PvuⅡ PvuⅡ GGTGATGAGAAGCCAACTTAT 21 ATCTTGATCATGGCGAAAT 19 Td 2 Tf0420/HaeⅢ HaeⅢ TGGAGGCCATTTCTTATTAGA 21 CTCTGACCACGGGATCA 17 Td 2 注 )z 温度条件の数字はアニーリング温度 Td は Touch down PCR である y 1 は Nonaka et. al.(2017) 2 は二宮ら (2015) に基づく - 3-3
4 愛媛県農林水産研究所果樹研究センター研究報告第 6 号 3 PCR 条件 1) 反応液組成 PCR には Ampli Taq Gold R DNA Polymerase (Roche, Branchburg, NJ, USA) を用い 各サンプルあたり表 3に掲げた組成で実施した 2) 反応条件 DNA の増幅は 表 2に記載した各マーカーを用いて コンベンショナル法またはタッチダウン法により実施した コンベンショナル法は 94 で 10 分間の変性反応を行った後 94 で 40 秒間 表 2に掲げた温度で1 分間 72 で2 分間の反応ステップを 35 サイクル さらに伸長反応を 72 で7 分間の条件で実施した タッチダウン法は 94 で 10 分間の変性反応後 94 で 30 秒間 62 で 30 秒間 72 で1 分間の反応ステップを2サイクル その後アニーリング温度のみを に変更してそれぞれ2サイクル行い 続いてアニーリング温度を 56 に変更して 30 サイクル実施した さらに伸長反応を 72 で7 分間の条件で実施した 表 3 PCR の反応液組成 reagent volume dh20( 滅菌水 ) 5.0 μl 10 buffer(amplitaq Gold 付属 ) 1.0 μl MgCl2(AmpliTaq Gold 付属 ) 1.0 μl dntp mix(amplitaq Gold 付属 ) 1.0 μl Forward Primer (10 pmol) 0.5 μl Reverse Primer (10 pmol) 0.5 μl AmpliTaqGold(5 unit/μl) 0.1 μl DNA (10 ng/μl) 1.0 μl 計 10.0 μl 4 制限酵素処理 PCR 産物は 表 2に記載した それぞれのマーカーに応じた制限酵素による処理を行っ た 制限酵素反応液は表 4に掲げたとおり調整し 調整後 37 で 180 分保温し処理を行った 5 電気泳動条件 表 4 制限酵素処理液の組成 reagent dh20( 滅菌水 ) 10 Buffer( 酵素添付 ) 制限酵素 PCR 増幅産物 volume 9.3μl 1.5μl 0.2μl 4.0μl 計 15.0μl 制限酵素処理後 電気泳動処理により多型の確認を行った 電気泳動は TAE 緩衝液 (40 mm Tris 40mM 氷酢酸 1mM EDTA ph8.0) および2% アガーロスゲルを用い 100V で 25 分行った その後 泳動後エチジウムブロマイドで染色してトランスイルミネーターで観察した 6 マーカーの選抜と遺伝子型データの解析方法 CAPS における多型の解析は 二宮ら (2014) に準じて行った すなわち 識別領域に制限酵素部位が存在しないアレルを a とし 存在するアレルを b として 各品種 系統の遺伝子型をホモの およびヘテロの を決定した また 泳動像の特徴から妥当性検証に利用可能なマーカーを選択した さらに 選択したマーカーについて Marker Tool Kit (Fujii ら 2008) により鵜飼の品種判別理論値 ( 鵜飼 2004) と各品種間を識別するマーカーセット数を求めるとともに 選択した遺伝子型データにおいて 最小マーカーセット検出ソフトウェア Minimal Marker(Fujii ら 2013) によりすべての品種を識別することができるマーカーセットの算出を行った Ⅲ 結果型の一覧は第 5 表のとおりである 各マーカーのうち 19 種類のマーカーでは識別に関与調査したマーカーと愛媛県育成品種 系統する多型のみ観察された ( 図 1) Al0326/Nde の組み合わせにおいて観察された PCR 増幅断 Ⅱ Bf0029/StyⅠ Bf0145/MspⅠ Gn0043/Hinc 片長 観察された多型の断片長および遺伝子 Ⅱ Tf0062/RsaⅠ Tf0013/RsaⅠ Tf0293/Hind - 4-4
5 岡本 奥貞 山本 二宮 : 愛媛県育成カンキツ品種識別法の妥当性検証に利用可能な CAPS マーカーの選抜 Ⅲ Tf0419/PvuⅡの8マーカーでは 識別に関与する多型を示すバンドと識別に関与しない多型が観察された ( 図 2) また Bf0029/Sty Ⅰと Cp0089/HindⅢの2マーカーでは 調査した品種 系統内で多型がみられなかった M M 600bp 300bp 図 1 識別に関与する多型のみ観察される例 (Bf0158/PvuⅡ) M M 500bp 300bp 200bp 100bp レーン番号は M 200bp ladder 1 愛媛果試第 28 号 2 甘平 3 媛小春 4 愛媛 43 号 5 愛媛 44 号 6 愛媛 45 号 7 愛媛 46 号 8 愛媛 47 号 9 愛媛 48 号 10 愛媛 49 号 11 愛媛 50 号を表す 図 2 識別に関与する多型としない多型が観察される例 (Al0326/NdeⅡ) M M 1800bp 1200bp 1000bp 図 3 不明瞭な多型 (1800bp) が観察される例 (Bf0145/MspⅠ) - 5-5
6 愛媛県農林水産研究所果樹研究センター研究報告第 6 号 Bf0145/MspⅠ Gn0043/HincⅡ Tf0062/Rsa Ⅰの3マーカーには 制限酵素処理の未消化断片と考えられる不明瞭なバンド等が観察された ( 図 3) これらの結果から 調査品種 系統内で多型が見られなかった2マーカーと不明瞭なバンド等が観察された3マーカーを除いた 22 マーカーを選抜した 表 5 遺伝子マーカーにおける各品種 系統間の遺伝子型 5 マーカー名称品種 系統名 Al0326/NdeⅡ Al0413/MspⅠ Al0636/EcoRⅠ Bf0029/StyⅠ Bf0036/MspⅠ Bf0145/MspⅠ 紅まどんな 甘平 媛小春 愛媛 43 号 愛媛 44 号 愛媛 45 号 愛媛 46 号 愛媛 47 号 愛媛 48 号 愛媛 49 号 愛媛 50 号 PCR 増幅断片長 A アレル断片長 B アレル断片長 共通断片長 z 利用判定 最少マーカー y Bf0158/PvuⅡ Cp1624/MspⅠ Gn0043/HincⅡ If0208/HinfⅠ Mf0097/DraⅠ Tf0062/RsaⅠ Tf0150/HinfⅠ Tf0168/RsaⅠ マーカー名称品種 系統名品種 系統名 Tf0235/HaeⅢ Tf0271/RsaⅠ Tf0326/HhaⅠ Tf0300/BamHⅠ Cp0089/HindⅢ Cp0635/DraⅠ 紅まどんな 甘平 媛小春 号 号 号 号 号 号 号 号 PCR PCR 増幅断片長増幅断片長 Aアレル断片長 アレル断片長 Bアレル断片長 アレル断片長 共通断片長 共通断片長 z 利用判定 z 利用判定 最少マーカー y 最少マーカー y 注 )z 妥当性検証実施可能 )z 妥当性検証実施可能 y スクリーニングに利用可能な最少マーカーセットの一例 y スクリーニングに利用可能な最少マーカーセットの一例 Tf0001/MspⅠ Tf0013/RsaⅠ Tf0293/HindⅢ Tf0318/HincⅡ Tf0386/MspⅠ Tf0419/PvuⅡ Tf0420/HaeⅢ - 6-6
7 岡本 奥貞 山本 二宮 : 愛媛県育成カンキツ品種識別法の妥当性検証に利用可能な CAPS マーカーの選抜 選択した 22 マーカーにおける品種識別能力の判定のため MarkerToolKit により鵜飼の品種判別理論値を求めた結果 22 マーカーすべてが一致した時に 一致した品種 系統が愛媛県育成品種 系統と偶然一致する確率は 最大でも愛媛 49 号の P1= であった ( 表 6) また それぞれの品種 系統間を識別するマーカー数を求めたところ 甘平 ' と愛媛 50 号 媛小春 ' と愛媛 50 号間を識別するマーカーが 16 マーカーと多く 愛媛果試第 28 号 ' と愛媛 46 号 愛媛 47 号と愛媛 49 号 愛媛 48 号と愛媛 49 号を識別できるマーカーはそれぞれ 5 マーカーと少なかった ( 表 7) 表 6 供試した各品種 系統における鵜 飼の品種判別理論値 品種 系統名 p1 愛媛果試第 28 号 甘平 媛小春 愛媛 43 号 愛媛 44 号 愛媛 45 号 愛媛 46 号 愛媛 47 号 愛媛 48 号 愛媛 49 号 愛媛 50 号 P1=1-(1-f0^k)^n 表 7 供試した各品種 系統間における識別可能なマーカー数 愛媛果試甘平媛小春第 28 号 43 号 44 号 45 号 46 号 47 号 48 号 49 号 50 号 愛媛果試第 28 号 甘平 媛小春 愛媛 43 号 愛媛 44 号 愛媛 45 号 愛媛 46 号 愛媛 47 号 愛媛 48 号 5 10 愛媛 49 号 12 愛媛 50 号 マーカー数が十分であることから Minimal Marker を用いてすべての品種を2マーカー以上で識別することができるマーカーセット を算出したところ 最低必要なマーカー数は 27 マーカー中 6マーカーで 組合せ数は 36 種類であった Ⅳ 考察ーカーの条件は シンプルな多型を示すこと PCR 反応が安定していること 不明瞭な多型品種識別の妥当性を検討する際に必要なマが観察されないことなどが優先されると考え - 7-7
8 愛媛県農林水産研究所果樹研究センター研究報告第 6 号 られる また 可能な限り制限酵素処理による未消化断片やプライマーダイマーの発生が起こり難いことが望ましい この観点から愛媛県育成品種や有望な育成系統を識別するために調査した 27 マーカーの中では 22 マーカーが該当すると考えられた 次に 選択した 22 マーカーの識別能力について 鵜飼の品種判別理論値を求めると 最大でも愛媛 49 号の P1= と 十分な能力であることが明らかになった ただし 今回調査した品種 系統間における 2 品種間を識別するマーカー数は 最大 15 マーカーから最小 5マーカーであり 識別できるマーカーの少ない2 品種間の共通点は 種子親に 愛媛果試第 28 号 ' を用いた系統 ( 表 1) である このため今後類似した組み合わせの品種が増加すると今回選抜したマーカーのみでは識別できない可能性が予想される また 22 マーカーをすべて用いて識別を行うと時間とコストが掛かることから スクリ ーニングに利用可能な最少のマーカーセットを 各品種 系統を2マーカー以上で識別することを条件に算出したところ 最少マーカーセットは6マーカーを1セットとして 組合せ数は 36 種類であった このうち PCR の温度条件や制限酵素の種類が共通な方が 処理に関する手間を省くことが可能でよりスクリーニングに適したマーカーセットとなる このようなマーカーセットの一例として Bf0036/MspⅠ Cp1624/MspⅠ If0208/Hinf Ⅰ Tf0168/RsaⅠ Tf0235/HaeⅢ Tf0326/Hha Ⅰを選抜できる ( 表 5) また 対象品種数が多くなった場合にも 品種特性などにより今回選抜した 22 マーカーだけでは識別ができなくなる可能性もある これらに対応するためにも 現在 国の研究機関等で実施されているマーカーの選抜プログラムと連携が重要であり 今後の研究の進展により カンキツの品種識別が早期に完成されることが望まれる Ⅴ 摘要愛媛県育成カンキツ品種 系統における品種識別法の妥当性検証に利用可能な CAPS マーカーの選抜を行った 1) 二宮ら (2015) と Nonaka ら (2017) の論文に掲載されている 29 マーカーのうち電気泳動後の泳動像と多型から 22 マーカーを選抜した さらに それらの 22 マーカーを愛媛県育成 3 品種と育成中の8 系統に適用した場合の遺伝子型を明らかにした 2) 今回選抜した 22 マーカーの識別能力について鵜飼 (2004) の品種判別理論値 (22 マーカーすべてが一致した時に 一致した品 種 系統が愛媛県育成品種 系統と偶然一致する確率 ) は 最大でも P1= であった また 選択した 22 マーカーによる品種 系統間を識別するマーカー数について 最大は 15 マーカー 最小は5マーカーであった 識別するマーカー数の少ない品種は それぞれ 愛媛果試第 28 号 ' を種子親に使用した品種でありその原因は 類似した交配組み合わせにあることが推測された 3) 識別の時間とコスト低減のため 22 マーカーの遺伝子型からさらにスクリーニング可能な最少のマーカーセットを算出したところ 6マーカーを1セットとして 36 組合せが得られた - 8-8
9 岡本 奥貞 山本 二宮 : 愛媛県育成カンキツ品種識別法の妥当性検証に利用可能な CAPS マーカーの選抜 Ⅵ 引用文献藤井浩 山下浩之 島田武彦 遠藤朋子 清水徳朗 山本俊哉 DNA マーカー型一覧表に関する各種計算を自動的に行うソフトウエア MarkerToolKit の開発 DNA 多型 Vol. 16: Fujii, H., T. Ogata, T. Shimada, T. Endo, H. Iketani, T. Shimizu,T. Yamamoto and M. Omura Minimal marker: An algorithm and computer program for the identification of minimal sets of discriminating DNA markers for efficient variety identification. J. Bioinform. Comput. Biol. 11: 二宮泰造 島田武彦 遠藤朋子 野中圭介 大村三男 藤井浩 CAPS マーカーによるカンキツの品種識別法の開発と親子鑑定. 園学研. 14: Nonaka, K., H. Fujii, M. Kita, T. Shimada, T. Endo, T. Yoshioka and M. Omura Identification and parentage analysis of citrus cultivars developed in Japan by CAPS markers. The Hort. J. 86: 重松幸典 喜多景治 薬師寺弘倫 石川啓 井上久雄 カンキツ新品種 愛媛果試第 28 号 について. 愛媛果樹試研報. 19: 1-6. 重松幸典 喜多景治 薬師寺弘倫 石川啓 井上久雄 中田治人 カンキツ新品種 甘平 について. 愛媛果樹試研報. 22: 1-4. Shimada, T., H. Fujii, T. Endo, T. Ueda, A. Sugiyama, M. Nakano, M. Kita, T. Yoshioka, T. Shimizu, H. Nesumi, Y. Ikoma, T. Moriguchi, M. Omura Construction of a citrus framework genetic map anchored by 708 gene-based markers. Tree Genetics & Genom. 10: 鵜飼保雄 植物品種における品種同定理論. 農業および園芸. 79: 吉岡照高 カンキツ口之津 39 号. 農研機構報告. 果樹茶部門. 1:
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PowerPoint プレゼンテーション
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2.PCR 法による DNA の増幅 現代の分子生物学において その進歩に最も貢献した実験法の1つが PCR(Polymerase chain reaction) 法である PCR 法は極めて微量の DNA サンプルから特定の DNA 断片を短時間に大量に増幅することができる方法であり 多大な時間と労力を要した遺伝子クローニングを過去のものとしてしまった また その操作の簡便さから 現在では基礎研究のみならず臨床遺伝子診断から食品衛生検査
手順 ) 1) プライマーの設計 発注変異導入部位がプライマーのほぼ中央になるようにする 可能であれば 制限酵素サイトができるようにすると確認が容易になる プライマーは 25-45mer で TM 値が 78 以上になるようにする Tm= (%GC)-675/N-%mismatch
Mutagenesis 目的 ) 既存の遺伝子に PCR を利用して変異を導入する 1 点変異導入方法 ) Quik Change Site-Directed Mutagenesis Kit(Stratagene) のプロトコールを流用 http://www.stratagene.com/products/showproduct.aspx?pid=131 Kit 中では DNA polymerase
Ⅱ 方法と対象 1. 所得段階別保険料に関する情報の収集 ~3 1, 分析手法
67 論文 要旨 : 1507 キーワード : Ⅰ 緒言 65 2014 89 5 2 3 5 6 2 5 6 3 4 3 4 2006 2015 9 9 68 2018. 3 2015 Ⅱ 方法と対象 1. 所得段階別保険料に関する情報の収集 6 2015 7 2016 2 ~3 1,507 2. 分析手法 69 3 3 3 A B C 3 A 4 1 1 2 2 2014 2014 2014 5
Pyrobest ® DNA Polymerase
Pyrobest DNA Polymerase 説明書 v201102da 対活Pyrobest DNA Polymerase は Pyrococcus sp. 由来の 3' 5' exonuclease 活性 (proof reading 活性 ) を有する耐熱性 α 型 DNA ポリメラーゼです α 型 DNA ポリメラーゼは Pol I 型ポリメラーゼ (Taq DNA ポリメラーゼなど )
BKL Kit (Blunting Kination Ligation Kit)
製品コード 6126/6127 BKL Kit (Blunting Kination Ligation Kit) 説明書 PCR 産物を平滑末端ベクターにクローニングする場合 使用するポリメラーゼ酵素の種類により 3' 末端に余分に付加された塩基を除去し さらに 5' 末端をリン酸化する必要があります 本製品は これらの一連の反応を簡便に短時間に行うためのキットです PCR 産物の末端平滑化とリン酸化を同時に行うことにより
Taro-04-1（雌雄判別）
高嶋康晴 Yasuharu TAKASHIMA 要 約 多くの PCR 法では 電気泳動により分離された特定塩基長の PCR 産物や制限酵素で断片化された DNA 断片の塩基長のパターンを目視で検出し生物種や品種等の判定を行う 電気泳動にかかる一連の操作を手作業で行うことによる分析者への負担の軽減及び分析処理の効率化を図るために マグロ属魚類及びサケ科魚類の魚種判別法について アガロースゲル電気泳動と全自動電気泳動装置による電気泳動の比較検討を行った
PrimeSTAR® HS DNA Polymerase
研究用 PrimeSTAR HS DNA Polymerase 説明書 v201309da PrimeSTAR HS DNA Polymerase は タカラバイオが独自に開発した高い正確性と高い増幅効率を併せ持つ DNA polymerase です 本酵素は非常に強力な 3-5 exonuclease 活性を有し DNA 合成において抜群の校正力を示す一方 Taq DNA Polymerase に優る高い増幅効率も示します
TaKaRa PCR FLT3/ITD Mutation Detection Set
研究用 TaKaRa PCR FLT3/ITD Mutation Detection Set 説明書 v201706da 本製品は FLT3 (FMS-like tyrosine kinase 3) 遺伝子の JM(Juxtamembrane) 領域周辺に起こる Internal Tandem Duplication(ITD) 変異の有無を検出するためのセットです FLT3 遺伝子の ITD 変異は
Bacterial 16S rDNA PCR Kit
研究用 Bacterial 16S rdna PCR Kit 説明書 v201307da 微生物の同定は 形態的特徴 生理 生化学的性状 化学分類学的性状などを利用して行われますが これらの方法では同定までに時間を要します また 同定が困難な場合や正しい結果が得られない場合もあります 近年 微生物同定にも分子生物学を利用した方法が採用されるようになり 微生物の持つ DNA を対象として解析を行う方法が活用されています
1. 腸管出血性大腸菌 (EHEC) の系統解析 上村健人 1. はじめに近年 腸管出血性大腸菌 (EHEC) による食中毒事件が度々発生しており EHEC による食中毒はその症状の重篤さから大きな社会問題となっている EHEC による食中毒の主要な汚染源の一つとして指摘されているのが牛の糞便である
1. 腸管出血性大腸菌 (EHEC) の系統解析 上村健人 1. はじめに近年 腸管出血性大腸菌 (EHEC) による食中毒事件が度々発生しており EHEC による食中毒はその症状の重篤さから大きな社会問題となっている EHEC による食中毒の主要な汚染源の一つとして指摘されているのが牛の糞便である これまでの報告によれば EHEC を糞便中に保有する牛は 0.6~11.9% といわれており 牛枝肉汚染の機会となり得ると畜場における解体処理が公衆衛生上重要視されている
PrimeSTAR® Mutagenesis Basal Kit
PrimeSTAR Mutagenesis Basal Kit 説明書 v201107da 目次 I. キットの内容...3 II. 保存...3 III. 本システムの原理...3 IV. プライマー設計について...5 V. 操作...8 VI. 実験例...10 VII. トラブルシューティング...13 VIII. 関連製品...13 IX. 注意...13 2 PrimeSTAR Mutagenesis
愛知農総試研報 40:35-40(2008) Res.Bull.Aichi Agric.Res.Ctr.40:35-40(2008) トマトのネコブセンチュウ抵抗性遺伝子 (Mi) に連鎖した DNA マーカーの開発 * ** * *** 黒柳悟 石田朗 福田至朗 大矢俊夫 摘要 : トマトのネコブ
愛知農総試研報 40:35-40(2008) Res.Bull.Aichi Agric.Res.Ctr.40:35-40(2008) トマトのネコブセンチュウ抵抗性遺伝子 (Mi) に連鎖した DNA マーカーの開発 * ** * *** 黒柳悟 石田朗 福田至朗 大矢俊夫 摘要 : トマトのネコブセンチュウ抵抗性遺伝子 (Mi) に連鎖したDNAマーカーの開発を試みた その結果 1 組のプライマーセット
はじめてのリアルタイムPCR
はじめてのリアルタイム PCR 1. はじめにリアルタイム PCR 法は PCR 増幅産物の増加をリアルタイムでモニタリングし 解析する技術です エンドポイントで PCR 増幅産物を確認する従来の PCR 法に比べて 1DNA や RNA の正確な定量ができること 2 電気泳動が不要なので迅速かつ簡便に解析できコンタミネーションの危険性も小さいことなど多くの利点があります 今や 遺伝子発現解析や SNP
PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase
研究用 PrimeSTAR GXL DNA Polymerase 説明書 v201308da PrimeSTAR GXL DNA Polymerase は PrimeSTAR HS DNA Polymerase を改良し さらに独自の伸長因子を組み合わせることにより PCR パフォーマンスを飛躍的に向上させた 画期的な High Fidelity PCR 酵素です 非常に高い正確性を維持しながら これまでの
17-05 THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix (Code No. QPS-201, QPS-201T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A4196K
17-05 THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix (Code No. QPS-201, QPS-201T) TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A4196K - 18 - [1] 1 [2] 2 [3] 3 [4] 5 [5] : RNA cdna 13 [6] 14 [7] 17 LightCycler TM Idaho
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase
PrimeSTAR Max DNA Polymerase 説明書 v201102da PrimeSTAR Max DNA Polymerase は 世界最速の伸長速度と PrimeSTAR HS DNA Polymerase が元来有する非常に高い正確性 高感度 高特異性 ならびに確実性を兼ね備えた世界最高水準の PCR 増幅システムです 酵素自体が有する高いプライミング効率と独自の伸長因子の添加により
Key words : influenza, nested-pcr, serotype
Key words : influenza, nested-pcr, serotype Table 1 Sequence of PCR primers used to detect HA gene of influenza virus 524 清水 Fig. 1 Detection of PCR product 英明 他 (lstpcr) Table 2 Results method Fig. 2
HotStarTaq Plus PCRプロトコールとトラブルシューティング( /2008)
February 2008 HotStarTaq Plus PCR HotStarTaq Plus DNA Polymerase HotStarTaq Plus Master Mix Kit PCR HotStarTaq Plus DNA Polymerase PCR 2 HotStarTaq Plus DNA Polymerase Q-Solution PCR 6 HotStarTaq Plus
遺伝子検査の基礎知識
リアルタイム PCR( インターカレーター法 ) 実験ガイドこの文書では インターカレーター法 (TB Green 検出 ) によるリアルタイム PCR について 蛍光検出の原理や実験操作の流れなどを解説します 実際の実験操作の詳細については 各製品の取扱説明書をご参照ください - 目次 - 1 蛍光検出の原理 2 実験に必要なもの 3 実験操作法 4 結果の解析 1 1 蛍光検出の原理 インターカレーターによる蛍光検出の原理
無細胞タンパク質合成試薬キット Transdirect insect cell
発現プラスミドの構築 1. インサート DNA の調製開始コドンは出来るだけ 5'UTR に近い位置に挿入して下さい 経験的に ptd1 の EcoRV/KpnI サイトへのライゲーション効率が最も高いことを確認しています 本プロトコルに従うと インサートサイズにも依りますが 90% 以上のコロニーがインサートの挿入されたクローンとして得られます 可能な限り EcoRV/KpnI サイトへ挿入されるお奨めします
遺伝学的手法を用いたロクアイタンポポ ( 仮称 ) の同定法について 神戸市立六甲アイランド高校 井上真緒沙原杏樹辻青空 1. 研究背景 2004 年六甲アイランド高校の校内と周辺で発見されたロクアイタンホポ ( 仮称 ) は 雑種タンポポの可能性が高いが いまだにはっきりした定義がされていない 特
遺伝学的手法を用いたロクアイタンポポ ( 仮称 ) の同定法について 神戸市立六甲アイランド高校 井上真緒沙原杏樹辻青空 1. 研究背景 2004 年六甲アイランド高校の校内と周辺で発見されたロクアイタンホポ ( 仮称 ) は 雑種タンポポの可能性が高いが いまだにはっきりした定義がされていない 特徴は直径約 6cm の黄色の頭花をもつ巨大タンポポで 総苞外片は幅が広く 先端部はわずかに角状突起があり
センシンレンのエタノール抽出液による白血病細胞株での抗腫瘍効果の検討
Evaluation of anti-tumor activity with the treatment of ethanol extract from Andrographis Paniculata in leukemic cell lines Hidehiko Akiyama 1), Kazuharu Suzuki 2), Toshiyuki Taniguchi 2) and Itsuro Katsuda
b-017.doc
9 F1 * * Breeding of new varieties and morphological characteristics of Rosaseae hybrids Mika TAKIYA* and Hirokazu KON* 9 1991 38 1965 1989 1995 1987 1978 1997 1997 1985 3 3 Hokkaido Forestry Research
Thai Native Frog (Hoplobatrachus spp.) and lntroduced Frog Molecular genetics tool for species identification of two cultured frog in Thailand and their hybrids were developed using microsatellite DNA
O-157（ベロ毒素1 型、2 型遺伝子）PCR Typing Set Plus
食品 環境分析用 O-157( ベロ毒素 1 型 2 型遺伝子 ) PCR Typing Set Plus 説明書 v201712da O157:H7 をはじめとする腸管出血性大腸菌 (EHEC) は 血便と激しい腹痛を伴う出血性大腸炎 さらには溶血性尿毒症症候群を引き起こす病原性大腸菌の一群です これらの重篤な症状の原因は EHEC が産生する細胞毒素であるベロ毒素です EHEC の検出において
Studies of Foot Form for Footwear Design (Part 9) : Characteristics of the Foot Form of Young and Elder Women Based on their Sizes of Ball Joint Girth
Studies of Foot Form for Footwear Design (Part 9) : Characteristics of the Foot Form of Young and Elder Women Based on their Sizes of Ball Joint Girth and Foot Breadth Akiko Yamamoto Fukuoka Women's University,
外来化学療法を受けるがん患者のケアプログラム試案の作成 患者の困難や苦悩とニーズに焦点を当てて 1 2 2 Abstract A purpose of this study is to develop the tentative care program of cancer out-patients undergoing chemotherapy. We did the literature reviews
LA PCR™i n vitro Cloning Kit
研究用 LA PCR in vitro Cloning Kit 説明書 v201201da 本キットは Cassette および Cassette Primer を使用することにより cdna やゲノム上の未知領域を特異的に増幅させる従来の PCR in vitro Cloning Kit に 長鎖 DNA を効率良く増幅する LA PCR Technology を応用したシステムです これにより
05_fuke.indd
1971 1982 1985 Abstract The first liberalisation of circuit use (1971) and the second liberalisation (1982) liberalised the use of telecommunications circuits for data communications to respond the development
) 2) , , ) 1 2 Q1 / Q2 Q Q4 /// Q5 Q6 3,4 Q7 5, Q8 HP Q9 Q10 13 Q11
2009 0612001. 1) 2) 2 2009 3 2009 8, 10 1 3, 12 50 4) 1 2 Q1 / Q2 Q3 910203040 5060708090 Q4 /// Q5 Q6 3,4 Q7 5,6711 123 4 Q8 HP Q9 Q10 13 Q11 , A 5 2 3 3 3 3 3 2 8 5 3 3 4 A C B 1 1 KJ 1 9 1 12 12 15
DNA シークエンス解析受託サービスを効率よく利用して頂くために シークエンス解析は お持ち頂くサンプルの DNA テンプレートの精製度 量 性質によ って得られる結果が大きく左右されます サンプルを提出しても望み通りの結果が返っ てこない場合は 以下の点についてご検討下さい ( 基本編 ) 1.
DNA シークエンス解析受託サービスを効率よく利用して頂くために 目次 ( 基本編 ) 1. テンプレート DNA プライマーの濃度を確認する 2. テンプレート DNA の精製度を確認する 3. サンプル調製に用いるテンプレート DNA の濃度を上げる 4. プライマーが劣化していないか確認する 5. 溶液を水にかえる 6. アガロース電気泳動を用いて PCR 産物を精製 確認する 7. シークエンス用プライマーを用意するその1
PG1571-PJT1363-COL01356-MP T indd
Marketplace Thermo Scientific ALL PCR DNA メ ー PCR 製品 dntp PCR ー ン キ Essentials Tour 2016 キャンペーン ー DNA ー 製キ 2016 年 7 月 1 日 2016 年 9 月 30 日 まで キャンペーンの はこちらをご覧ください www.thermofisher.com/jp-mktp PCR Thermo
IR0036_62-3.indb
62 3 2016 253 272 1921 25 : 27 8 19 : 28 6 3 1921 25 1921 25 1952 27 1954 291960 35 1921 25 Ⅰ 0 5 1 5 10 14 21 25 34 36 59 61 6 8 9 11 12 16 1921 25 4 8 1 5 254 62 3 2016 1 1938.8 1926 30 1938.6.23 1939.9
16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
研究用 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 説明書 v201705da 本製品は イルミナ社 MiSeq で 16S rrna 細菌叢解析を行うための PCR 増幅キットです 細菌 16S rrna 遺伝子の V3-V4 領域を対象とし PCR 酵素に 多様な配列を効率よく増幅可能な Tks Gflex DNA Polymerase
EQUIVALENT TRANSFORMATION TECHNIQUE FOR ISLANDING DETECTION METHODS OF SYNCHRONOUS GENERATOR -REACTIVE POWER PERTURBATION METHODS USING AVR OR SVC- Ju
EQUIVALENT TRANSFORMATION TECHNIQUE FOR ISLANDING DETECTION METHODS OF SYNCHRONOUS GENERATOR -REACTIVE POWER PERTURBATION METHODS USING AVR OR SVC- Jun Motohashi, Member, Takashi Ichinose, Member (Tokyo
2
1 2 / SCAR Sequence characterized amplified region DNA DNA 34 ( GSW100 SP2-002 SR2-015 SR3-004 11-22-1 11-22-2 11-24-3 11-24-4 11-191-1 12-217-1 12-249-1 14-218-21 04/05-29 04/05-66 04/05-73 12-202-2 (LP)
25 (2), Available online at 原著論文 サトウキビ育種のための系譜情報管理システムの開発 * 要旨 Web キーワード はじめに * Correspon
25 (2), 2016. 68 78 Available online at www.jstage.jst.go.jp/ 原著論文 サトウキビ育種のための系譜情報管理システムの開発 * 891-3102 1742-1 要旨 Web キーワード はじめに 2009 12 3 * Corresponding Author E-mail: yusuke@affrc.go.jp 2004 2014 1887
PrimeScript® II 1st strand cDNA Synthesis Kit
研究用 PrimeScript II 1st strand cdna Synthesis Kit 説明書 v201208da 目次 I. 概要... 3 II. キットの内容... 4 III. 保存... 4 IV. 1st-strand cdna 合成反応... 5 V. RT-PCR を行う場合... 6 VI. RNA サンプルの調製について... 6 VII. 関連製品... 7 VIII.
DNA/RNA調製法 実験ガイド
DNA/RNA 調製法実験ガイド PCR の鋳型となる DNA を調製するにはいくつかの方法があり 検体の種類や実験目的に応じて適切な方法を選択します この文書では これらの方法について実際の操作方法を具体的に解説します また RNA 調製の際の注意事項や RNA 調製用のキット等をご紹介します - 目次 - 1 実験に必要なもの 2 コロニーからの DNA 調製 3 増菌培養液からの DNA 調製
189 2015 1 80
189 2015 1 A Design and Implementation of the Digital Annotation Basis on an Image Resource for a Touch Operation TSUDA Mitsuhiro 79 189 2015 1 80 81 189 2015 1 82 83 189 2015 1 84 85 189 2015 1 86 87
MLPA 法 Q&A 集
MLPA 法 Q&A 集 目次 1. MLPA 法の導入 Q1. 導入にあたり 何が必要になりますか? Q2. 実験にはどのようなサンプルが必要でしょうか? Q3. サンプルDNAはどれくらい用意すれば良いですか? Q4. キャピラリーシーケンサが自施設に無い場合でも実験はできますか? Q5. FFPE 検体でも実験はできますか? 2. 実験のセットアップ Q1. 実験において重要なポイントはありますか?
DNA Fragmentation Kit
研究用 DNA Fragmentation Kit 説明書 v201712da 本製品は 超音波破砕装置などの特殊な装置を使用せず 酵素処理によってゲノム DNA 等の長鎖 DNA をランダムに断片化し さらに平滑化するためのキットです 平滑化した断片はそのまま平滑末端ベクターに組み込むことができます また 平滑化を必要としない場合は 断片化までで反応を止めることもできます メチル化 DNA 濃縮や高速シーケンス解析のための前処理にも
PrimerArray® Analysis Tool Ver.2.2
研究用 PrimerArray Analysis Tool Ver.2.2 説明書 v201801 PrimerArray Analysis Tool Ver.2.2 は PrimerArray( 製品コード PH001 ~ PH007 PH009 ~ PH015 PN001 ~ PN015) で得られたデータを解析するためのツールで コントロールサンプルと 1 種類の未知サンプル間の比較が可能です
取扱説明書
Realtime PCR Master Mix Realtime PCR Master Mix トラブルシューティング SYBR Green Realtime PCR Master Mix トラブルシューティングは p3 へ 1. 増幅がみられない 乱れる原因対策検出機器の設定などが蛍光色標識に用いられている蛍光色素の種類によって 検素に適合していない出機器の設定を変更する必要があります 設定を適正化して再解析してください
A pp CALL College Life CD-ROM Development of CD-ROM English Teaching Materials, College Life Series, for Improving English Communica
A CALL College Life CD-ROM Development of CD-ROM English Teaching Materials, College Life Series, for Improving English Communicative Skills of Japanese College Students The purpose of the present study
るため RNA ウイルス遺伝子や mrna などの RNA を検出する場合には予め逆転写酵素 (RNA 依存性 DNA ポリメラーゼ ) により DNA に置換する逆転写反応を行う必要がある これを Reverse Transcription-PCR(RT-PCR) という PCR 法によれば 検査
病性鑑定において PCR を利用する際の注意事項 家畜衛生分野においても疾病診断 検査に PCR 技術が応用可能となり 本病性鑑定指針の改訂においても各診断指針の各論において PCR 検査の利用について参考資料が組み込まれている PCRは便利な技術だが 疾病の診断に応用する場合 その取扱いについては慎重にせねばならない点が多い そこで本項では PCR 検査の原理に次いでその利点 欠点と限界 留意点を理解するための解説をまとめ
nagasaki_GMT2015_key09
Workflow Variant Calling 03 長崎は遺伝研 大量遺伝情報研究室の所属です 国立遺伝学研究所 生命情報研究センター 3F 2F 欧州EBIと米国NCBIと密接に協力しながら DDBJ/EMBL/GenBank国際塩基配列データ ベースを構築しています 私たちは 塩基配列登録を支援するシステムづくり 登録データを活用するシステムづくり 高速シーケンス配列の情報解析 を行なっています
DNA Blunting Kit
研究用 DNA Blunting Kit 説明書 v201508da DNA Blunting Kit は T4 DNA Polymerase の 5' 3' polymerase 活性と 3' 5' exonuclease 活性を利用して DNA の末端を平滑化することにより 突出末端の DNA でも簡単に平滑末端のベクターにライゲーションできるシステムです DNA が 5' 突出末端の場合は 5'
Tks Gflex™ DNA Polymerase
研究用 Tks Gflex DNA Polymerase 説明書 v201510da Tks Gflex DNA Polymerase は Thermococcus 属古細菌由来の DNA polymerase をベースに 反応阻害の要因となる酵素の鋳型 DNA に対する非特異的結合を抑制した改良型 PCR 酵素であり α 型特有の高い正確性に加えて優れた伸長性を有しています さらに タカラバイオ独自の強力な伸長因子と新規開発したプライミング特異性の向上物質
大学における原価計算教育の現状と課題
1 1.1 1.2 1.3 2 2.1 2.2 3 3.1 3.2 3.3 2014a 50 ABC Activity Based Costing LCC Lifecycle Costing MFCA Material Flow Cost Accounting 2 2 2016 9 1 2 3 2014b 2005 2014b 2000 1 2 1962 5 1 3 2 3 4 5 50 2012
鳥インフルエンザA(H7N9)ウイルス検出マニュアル(第2版)公開用
鳥インフルエンザ A(H7N9) ウイルス 検出マニュアル ( 第 2 版 ) 1 目次 1 臨床検体またはウイルス培養液からの RNA の抽出 ( 参考 ) ---------- 3 2 リアルタイム RT-PCR(TaqMan Probe 法 ) による鳥インフルエンザ A(H7N9) ウイルスの検出方法 ---------- 4 3 Conventional RT-PCR 法よる鳥インフルエンザ
食品関係等調査研究報告 Vol. 37(2013) 2. 実験方法 2.1 試料 トウモロコシ加工品は小売店で購入したものを試料として用いた 品目名の表記方法については 遺伝子組換え食品に関する品質表示基準 1) に準じたもの としている トウモロコシ加工品は コーンスナック菓子 (4: 試料数 4
トウモロコシ加工品の新規 DNA 抽出法の検討 則武寛通, 笠原正輝 Hiromichi Noritake, Masaki Kasahara 要 約 市販の加工食品を対象として DNA 抽出キット GM quicker 3 による DNA 抽出法のトウモロコシ加工品への適用について検討した 現行の JAS 分析試験ハンドブックに記載されている DNeasy Plant Maxi Kit による DNA
() ( 2 1)90 (2010) ( 1) QIAGEN DNeasy Blood & Tissue Handbook FAVORGEN Tissue Genomic DNA Extract
2012 (Sekiya et al 2012) ( ) ( 1) 1 1. 2010 2012 2013 2014 6 () 2014 8 29 481 ( 2 1)90 (2010) 461 20 5 5 35 ( 1) QIAGEN DNeasy Blood & Tissue Handbook FAVORGEN Tissue Genomic DNA Extraction Mini Kit DNA
) ,
Vol. 2, 1 17, 2013 1986 A study about the development of the basic policy in the field of reform of China s sports system 1986 HaoWen Wu Abstract: This study focuses on the development of the basic policy
Tks Gflex® DNA Polymerase
研究用 Tks Gflex DNA Polymerase 説明書 v201303da Tks Gflex DNA Polymerase は Thermococcus 属古細菌由来の DNA polymerase をベースに 反応阻害の要因となる酵素の鋳型 DNA に対する非特異的結合を抑制した改良型 PCR 酵素であり α 型特有の高い正確性に加えて優れた伸長性を有しています さらに タカラバイオ独自の強力な伸長因子と新規開発したプライミング特異性の向上物質
取扱説明書
19-02 One-step RT-PCR Kit RT-PCR Quick Master Mix (Code No. PCR-311F) 取扱説明書 TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN A3647K - 目次 - [1] はじめに 1 [2] 製品内容 2 [3] 使用方法 3 [4] 実施例 5 [5] 関連プロトコル 6 [6]
_
毛髪 爪からの DNA 抽出キット I S O H A I R マニュアル ( 第 11 版 ) Code No. 315-03403 10 回用 Code No. 319-03401 100 回用 NIPPON GENE CO., LTD. 目次 I 製品説明 Ⅱ 内容 Ⅲ 保存 Ⅳ プロトコール Ⅴ トラブルシューティング Ⅵ データ集 1. ヒト毛髪 爪 口腔粘膜を用いた実験例 2. ヒトの毛髪を用いた実験例
1 Fig. 1 Extraction of motion,.,,, 4,,, 3., 1, 2. 2.,. CHLAC,. 2.1,. (256 ).,., CHLAC. CHLAC, HLAC. 2.3 (HLAC ) r,.,. HLAC. N. 2 HLAC Fig. 2
CHLAC 1 2 3 3,. (CHLAC), 1).,.,, CHLAC,.,. Suspicious Behavior Detection based on CHLAC Method Hideaki Imanishi, 1 Toyohiro Hayashi, 2 Shuichi Enokida 3 and Toshiaki Ejima 3 We have proposed a method for
Probe qPCR Mix
研究用 Probe qpcr Mix 説明書 v201710da Probe qpcr Mix は プローブ検出 (5 - ヌクレアーゼ法 ) によるリアルタイム PCR(qPCR) 専用の試薬です 抗体を利用したホットスタート PCR 酵素とリアルタイム PCR 用バッファーをそれぞれ改良することにより PCR 阻害物質に対する高い抵抗性 特異性の高い増幅 高い増幅効率 高い検出感度を実現しました
Time Variation of Earthquake Volume and Energy-Density with Special Reference to Tohnankai and Mikawa Earthquake Akira IKAMi and Kumizi IIDA Departmen
Time Variation of Earthquake Volume and Energy-Density with Special Reference to Tohnankai and Mikawa Earthquake Akira IKAMi and Kumizi IIDA Department of Earth Sciences, Nagoya University (Received January
cDNA cloning by PCR
cdna cloning/subcloning by PCR 1. 概要 2014. 4 ver.1 by A. Goto & K. Takeda 一般的に 細胞または組織由来の RNA から作製した cdna(cdna pool) から 特定の cdna をベクターに組み込む操作を cdna cloning と呼ぶ その際 制限酵素認識配列を付与したオリゴ DNA primer を用いた PCR
Takens / / 1989/1/1 2009/9/ /1/1 2009/9/ /1/1 2009/9/30,,, i
21 Market forecast using chaos theory 1100334 2010 3 1 Takens / / 1989/1/1 2009/9/30 1997/1/1 2009/9/30 1999/1/1 2009/9/30,,, i Abstract Market forecast using chaos theory Hiroki Hara The longitudinal
) ) 20 15) 16) ) 18) 19) (2) ha 8% 20) ) 22)
1 1 326-8558 268-1 E-mail: yanase.norihiko@v90.ashitech.ac.jp 1899 1975 1995 Key Words: land readjustment act, reconstruction project from disaster, compulsory implementation, replotting disposition 1.
ñ{ï 01-65
191252005.2 19 *1 *2 *3 19562000 45 10 10 Abstract A review of annual change in leading rice varieties for the 45 years between 1956 and 2000 in Japan yielded 10 leading varieties of non-glutinous lowland
Mighty TA-cloning Kit/Mighty TA-cloning Kit for PrimeSTAR
製品コード 6028 製品コード 6029 Mighty TA-cloning Kit ( 製品コード 6028) Mighty TA-cloning Kit for PrimeSTAR ( 製品コード 6029) 説明書 Taq DNA ポリメラーゼなどをベースとする PCR 酵素を用いて得られた増幅産物のほとんどは その 3 末端にデオキシリボアデノシン (da) が一塩基付加されています これらの
*1 *2 *1 JIS A X TEM 950 TEM JIS Development and Research of the Equipment for Conversion to Harmless Substances and Recycle of Asbe
*1 *2 *1 JIS A 14812008X TEM 950 TEM 1 2 3 4 JIS Development and Research of the Equipment for Conversion to Harmless Substances and Recycle of Asbestos with Superheated Steam Part 3 An evaluation with
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平成 30 年度外部精度管理事業 課題 1 麻疹 風疹 実施手順書 ( ウイルスの核酸検出検査 ) 1) 検体を受け取りましたら 外部精度管理事業ホームページ (https://www.niid.go.jp/niid/ja/reference/eqa.html) にてお手続きください 2) 検体到着後 各チューブのスピンダウンを行ってから 500 マイクロリットルの Nuclease-free water
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