主な内容腸管出血性大腸菌とは 2 肉用牛農場における全国的な保有状況調査 3 継続的な保有状況調査 4 乳用牛農場における STEC O7 及び O26 保有状況調査 5 消化管内容物肝臓胆汁調査 2

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えみみおか
5 years ago
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1 平成 25 年 6 28 日農林水産省食品安全セミナー ( 微生物編 ) 資料 2-3 農林水産省が取り組む食品安全微生物編 ~ 科学データに基づいた有害微生物の汚染低減対策 ~ 牛肉の腸管出血性大腸菌汚染低減に向けた取組

2 主な内容腸管出血性大腸菌とは 2 肉用牛農場における全国的な保有状況調査 3 継続的な保有状況調査 4 乳用牛農場における STEC O7 及び O26 保有状況調査 5 消化管内容物肝臓胆汁調査 2

3 腸管出血性大腸菌とは赤痢菌と同じシガ毒素を産生激しい腹痛と新鮮血を伴う下痢が 2~9 日間続き発症者の 6~7 % が溶血性尿毒症症候群や脳症を併発乾燥に強く低温でも生存可ヒトは僅かな菌量でも発症菌体の表面構造 (O 抗原 : 約 8 種類 ) と運動器官である鞭毛 (H 抗原 : 約 7 種類 ) の組合せで細分化 ( 血清型 ) 人から検出される O 血清型上位は O7,O26,O3 3

Stxa, Stxc, Stxd Stx2 は Stx2a, Stx2b, Stx2c, Stx2d,

4 腸管出血性大腸菌が産生するシガ毒素について大きく Stx と Stx2 に分類国内の症例から検出される O7 は Stx/Stx2 両方産生する株が最も多く次は Stx2 のみ産生する株更に Stx は Stxa, Stxc, Stxd Stx2 は Stx2a, Stx2b, Stx2c, Stx2d, Stx2e, Stx2f, Stx2g のサブタイプがある ( 細菌の電子顕微鏡写真 : 東京都健康安全研究センター 4)

5 2 肉用牛農場における全国的な保有状況調査採材時期 :27 年 ~ 28 年 3 対象農場 :45 都道府県のご協力下肉用牛 5 頭以上を飼養する全 46 農場 ( 平均飼養頭数約 43 頭 ) 材料 : 農場あたり 6 頭の直腸便を採取検査数陽性頭数 (%) STEC O7 STEC O26 農場数 46 (27.) 7(2) (2.) 頭数 2, (8.9) (.4) STEC: シガ毒素産生大腸菌 5

6 農場あたりの STEC O7 陽性頭数陽性農場数 ( 全陽性農場に占める割合 (%)) 農場数頭 2 頭 3 頭 4 頭 5 頭 6 頭 52 (47.3) 28 (25.5) 8 (6.4) 8 (7.3) () 4 (3.6) 陽性農場の半数以上において複数の牛から検出農場で頭でも陽性個体が確認された場合農場内で汚染が拡がっている可能性 6

7 合計 stxa 肉用牛から検出された STEC O7 のベロ毒素の遺伝子型について stxa/ stx2a Stx2a stx2c stx2a + stx2c stx2a stxa/ stx2c stx2c stxa/ stx2a/ stx2c stx2a/ stx2c stx2- NV26 菌株数 (%) (2.5) 53 (2.8) 2 (8.2) 3 (5.3) 78 (32.) 3 (.2) 66 (27.2) 4 (.6) 有症患者から分離されるシガ毒素は stx2a (stx2a, stxa/stx2a, stx2a/stx2c, stxa/stx2a/stx2c) を保有する株が多い無症状のヒトから分離されるシガ毒素は stx2c (stxa/stx2c, stx2c) を保有する株が多い肉用牛から検出される STEC O7 の約 /3 は人に重篤な症状をもたらさない可能性 7

8 肉用牛農場の衛生管理の実施状況農場入口での車両器具等を消毒している 7 % 作業着を毎日交換している 72 % 牛導入前牛体を洗浄している 7 % 牛導入前牛舎を洗浄している 43 % 牛舎毎に踏込み消毒槽を設置している 33 % 農場内において犬猫を飼育している 38 % アンケート全回答数に対する割合 (%) を示す ( 平成 9 年度調査時点 ) 8

9 農場内での犬猫の飼育と STEC O7 陽性農場犬猫を飼育する農場は飼育していない農場と比べて統計学的に陽性率が有意 (p =.2) に高い農場数陽性農場数 (%) STEC O7 STEC O26 犬猫を飼育 4 52 (33.8) 4 (2.6) 飼育していない (23.) 4 (.6) 9

10 農場内での犬猫の飼育と STEC O7 陽性農場牛舎内に犬猫がいると牛がストレスを感じて排菌する? 犬猫が腸管出血性大腸菌の牛舎間の運び屋になっている? 人や車両野生動物や昆虫だけでなく犬や猫の愛玩動物についても衛生管理区域に入れないようにすることが大事

11 3 継続的な保有状況調査採材時期 :28 年 8 ~2 ( 計 7 回 ) 29 年 9 ~2 年 2 ( 計 8 回 ) 2 農場 (A, B) において計約 45 頭 / 農場の直腸便を継続的に採材

12 A B 農場 8 子牛育成成牛子牛育成成牛 6 陽性頭数 STEC O7 陽性頭数 ( ) 検査頭数年 29 年 2 年

13 農場同一個体頭 ( 農場 A: 5 頭農場 B: 6 頭 ) の結果牛個体年 29 年 2 年 2 9 ーー + ーーーーーーーーーーーー 2 ーーーーーーーーーーー A 3 ーーーーーーーーーーー 4 ーーーーーーーーーーーーーーー 5 ーーーー + + ーーーーーーーーーー + ーーーーーーーーーーーーー 2 ーーー + + ーーーーーーーー + ー B 3 ーーー + + ーーーーーーーー + ー 4 ーーーーーーー + ーーーーーーー + + ーー + ーーーーーーー 6 ーー + + ーーーーーー 3

14 一旦牛群内で排菌が始まると複数の牛が排菌を始める傾向にあり糞便中への排菌は一時的 ( 数か継続 ) である 4

15 4 乳用牛農場における STEC O7 及び O26 保有状況調査採材時期 :2 年 7 ~9 乳用牛農場各 25 農場において農場につき頭の直腸便を採取 ( 肉用牛農場についても検査 ) 検査数 STEC O7 陽性頭数 (%) STEC O26 乳農場数 25 () (4.) 用牛検査頭数 25 () (.4) 肉農場数 25 7 (28) (4.) 用牛検査頭数 25 4 (6.) (4) (.4)

16 乳用牛農場は肉用牛農場に比べ STEC O7 の保有率が低い STEC O26 の保有率は肉用牛農場及び乳用牛農場ともに低い牛肉国内生産量の約 7 割が和牛及び交雑種約 3 割が乳用種牛肉の STEC O7 汚染を低減させるためには肉用牛農場の STEC O7 保有率を下げる対策が先決 6

17 農場における調査 (2~4) 結果のまとめ国内の約 27% の肉用牛農場が STEC O7を保有陽性農場では複数の牛が STEC O7 を保有糞便中への排菌は一時的 ( 数か継続 ) 一旦牛群内で排菌が始まると複数の牛が排菌肉用牛農場に比べて乳用牛農場の STEC O7 保有率は低い 7

18 牛は無症状のため見た目では分からない感染牛であっても継続的に排菌するわけではない感染しているかどうか判定が難しい農場への侵入経路は複数ある ( 野生動物など ) 菌は環境中で長く生きることができるため農場内で繰返し感染する可能性農場単位でオールインオールアウトができない完全に農場から菌を排除することが難しい持続的に排菌しないのであれば出荷前に糞便中の排菌量を減らすことは可能? 粗飼料プロバイオティクスなどの効果は? 8

19 5 消化管内容物肝臓胆汁の調査と畜場では食道肛門結紮による消化管内容物の漏出防止策等の衛生管理を実施依然として加熱不十分な牛肉内臓肉による腸管出血性大腸菌の食中毒の報告ありと畜場にて腸管出血性大腸菌の動態を把握するための調査を実施 ( 厚生労働省 ) 2 年 9 生食用食肉 ( 牛肉 ) の規格基準を設定 22 年 7 牛肝臓の生食用提供を禁止 9

20 調査 2 年 9~2 と畜場で肉用牛 96 頭より採材消化管内容物 ( 第一胃第四胃十二指腸直腸 ) を検査 96 頭中 29 頭については肝臓 ( 表面 36 cm 2 深さ cm) 及び胆汁も検査採材後 24 時間以内に検査を開始 2

21 ( 参考 ) 牛の腹腔臓器模式図直腸十二指腸肝臓胆のう第四胃 ( 引用 : カラーアトラス獣医解剖学増補改訂版上巻チクサン出版社 ) 2

22 ( 参考 ) 肝臓と胆のう模式図後大静脈ウシ肝門脈ヒト胆のう ( 引用 : カラーアトラス獣医解剖学増補改訂版上巻チクサン出版社 ) ( 引用 : 日本消化器外科学会ウェブサイト 22)

23 調査の結果 STEC O7 陽性率消化管内容物 2% (2/96) 肝臓 % (/29) 胆汁 3.5% (/29) 陽性牛 2 頭の内訳直腸第一胃第四胃十二指腸頭直腸第一胃十二指腸胆汁陽性頭直腸十二指腸直腸のみ頭頭第一胃のみ 2 頭十二指腸のみ 4 頭 4 頭 6 頭 23

24 96 頭中 2 頭 (2 %) から検出陽性 2 頭中 4 頭 (7 %) は直腸内容物から検出 6 頭 (3 %) は直腸内容物から不検出直腸内容物の検査だけでは陽性牛を見逃す可能性肝臓胆汁を検査した 29 頭について肝臓からは検出されなかったが胆汁検体 (3.5 %) から検出胆汁から検出された個体は十二指腸及び直腸内容物からも検出された 24

25 STEC O7のシガ毒素遺伝子型と菌量 (log CFU/g 中 ) 腸管内容物通し胆汁第一胃第四胃十二指腸直腸番号 stx type log CFU stx type log CFU stx type log CFU stx type log CFU stx2c <.5 stx2c <.5 stx+stx2 <.5 stx2c 2. 2 stx2c 2.6 stx2c ND stx2c <.5 3 stx+stx2.9 stx+stx2 >4. stx+stx stx2c <.5 5 stx+stx2 <.5 6 stx+stx stx2c ND 8 stx+stx2 ND 9 stx+stx2 ND stx2c <.5 stx+stx2.5 2 stx+stx2 <.5 3 stx+stx stx+stx2 3. stx+stx2 <.5 6 stx2c stx2c <.5 2 stx2c 8.6 ND: サンプル量が少なかったため定量試験が実施できなかったもの 25

26 消化管内容物は g 中定量検出限界以下 ~ 8 ( 億個 ) と様々胆汁は g 中 74 個同一個体の第一胃第四胃直腸内容物からシガ毒素のタイプ stx2c の株を分離十二指腸内容物から stx/stx2 をもつ株を分離直腸以外の消化管にも広く分布複数の株を保有する個体もいる胆汁から検出された個体は十二指腸内容物及び直腸内容物からも胆汁から分離されたものと同じ毒素遺伝子型を分離十二指腸から胆管を経由して汚染する可能性 26

27 調査 2 22 年 5~7 と畜場で肉用牛 2 頭より採材肝臓及び胆汁を採取し STEC O7, 腸内細菌科菌群, 大腸菌を検査肝臓については表面 (36 cm 2 深さ cm) と内部 ( 表面をアルコール消毒後に火炎殺菌した上で切ル消毒後に火炎殺菌した上で切り取り下層部を採取 ) に分けて検査を実施採材後 24 時間以内に検査を開始 27

28 調査 2 の結果 STEC O7は 2 頭中 2 頭 (. %) から検出 STEC O7 検出部位とシガ毒素遺伝子型と菌量 (log CFU/g 中 ) 胆汁肝臓表面肝臓内部遺伝子型菌量遺伝子型菌量遺伝子型菌量牛 stx2 <.5 ーーーー牛 2 stx/stx2 <.5 stx/stx2 4. ーー 28

29 腸内細菌科菌群の結果う腸陽性頭数の検出部位肝(%) を管67 (3.9) 臓胆汁陽性汚染肝臓表面 (+ 内部 ) 43 (2.5) 由?面肝臓表面に肝臓内部のみ (.5) 指胆汁陰性 57 (27.) らを胆汁陰性肝臓表面 (+ 内部 ) 5 (24.3) うは汚全て陰性 86 (4.) 染全て陰性せ合計 2 (.) し胆肝臓陰性 23 (.) を臓肝臓汚染?十二指から胆ず29 肝臓表面に露出した血管や胆管切断から肝内部汚染?肝臓内部のみ 6 (2.9) を経十二腸か胆のう

30 調査 5 の結果のまとめ肝臓表面の STEC O7 汚染率は低い (. %) STEC O7 は肝臓内部から検出されなかったが衛生指標菌が肝臓内部から検出されたことから STEC O7 による肝臓内部汚染の可能性が示された今回のと畜場では肝臓を腹腔から取り出した後懸垂したまま処理するため汚染の発生頻度は低いと考えていたが約 5 割の肝臓から腸内細菌科菌群が検出された 3

31 肉用牛農場における腸管出血性大腸菌及びカンピロバクター低減技術の開発 (22~24 年度 ) レギュラトリーサイエンス新技術開発事業現在実施されている一般衛生管理と腸管出血性大腸菌の汚染低減効果を調査生菌剤食品添加物等の腸管出血性大腸菌の抑制効果の検証肉用牛における腸管出血性大腸菌の保有と牛肉での保有率保有量との関連性を調査 3

32 サンプリングにご協力していただいた生産者及び関係業者の皆様調査委託先である検査機関の皆様に感謝いたします今後ともどうぞ宜しくお願いします 32

1. 腸管出血性大腸菌 (EHEC) の系統解析上村健人 1. はじめに近年腸管出血性大腸菌 (EHEC) による食中毒事件が度々発生しており EHEC による食中毒はその症状の重篤さから大きな社会問題となっている EHEC による食中毒の主要な汚染源の一つとして指摘されているのが牛の糞便である

1. 腸管出血性大腸菌 (EHEC) の系統解析上村健人 1. はじめに近年腸管出血性大腸菌 (EHEC) による食中毒事件が度々発生しており EHEC による食中毒はその症状の重篤さから大きな社会問題となっている EHEC による食中毒の主要な汚染源の一つとして指摘されているのが牛の糞便である 1. 腸管出血性大腸菌 (EHEC) の系統解析上村健人 1. はじめに近年腸管出血性大腸菌 (EHEC) による食中毒事件が度々発生しており EHEC による食中毒はその症状の重篤さから大きな社会問題となっている EHEC による食中毒の主要な汚染源の一つとして指摘されているのが牛の糞便であるこれまでの報告によれば EHEC を糞便中に保有する牛は 0.6~11.9% といわれており牛枝肉汚染の機会となり得ると畜場における解体処理が公衆衛生上重要視されている

主な内容 腸管出血性大腸菌とは 2 肉用牛農場における全国的な保有状況調査 3 継続的な保有状況調査 4 乳用牛農場における STEC O7 及び O26 保有状況調査 5 消化管内容物 肝臓 胆汁調査 2

主な内容腸管出血性大腸菌とは 2 肉用牛農場における全国的な保有状況調査 3 継続的な保有状況調査 4 乳用牛農場における STEC O7 及び O26 保有状況調査 5 消化管内容物肝臓胆汁調査 2