「検査と技術《技術講座
|
|
|
- ゆきさ こうじょう
- 5 years ago
- Views:
Transcription
1 第 36 回組織細胞化学会講習会 組織細胞化学 2011 日本組織細胞化学会編 pp , 2011 免疫染色のトラブルシューティング 藤田保健衛生大学医学部第一病理学 堤寛 Yutaka Tsutsumi, M.D. Key words: 免疫組織化学 (immunohistochemistry) トラブルシューティング (trouble shooting) 固定 (fixation) 高感度技法(highly sensitive techniques) 抗原性失活(antigenic loss) 抗原性賦活化(antigen retrieval) 加熱処理(heating treatment) 背景染色 (background staining) 免疫染色の特異性(specificity of immunostaining) 抗体の特異性 (specificity of antibodies) 内因性活性物質(endogenous activity) 偽陽性(false positivity) 擬陽性(equivocal positivity) 病理診断(histopathologic diagnosis) はじめに免疫染色では 染めました 染まりました の時代は終わり 適切な結果判定のためのトラブルシューティングが要求される 検体処理および染色技法における 落とし穴 の記述が 免疫染色の適切な臨床応用につながれば幸いである 1-4) Ⅰ. 検体処理 1. 固定最近では ホルマリン固定標本に適した抗体が数多く市販されているが それでも 固定によって失活 消失する抗原物質は少なくない 新鮮凍結切片が利用可能な場合でも エタノールやアセトンによる固定が最適とは限らない 1) 新鮮凍結切片 ( アルコール アセトン固定 ) 新鮮凍結切片は通常 エタノールで湿固定される この固定条件は 通常の細胞標本の固定条件と同じであり 細胞表面マーカーや細胞骨格蛋白といった不溶性抗原の局在観察にもっとも適している リンパ球表面マーカーの検索には 薄切標本を風乾したのちにアセトン固定してもよい 一方 細胞質 核内の可溶性蛋白 ペプチドホルモンや血小板第 4 因子 リゾチームといった顆粒内に含まれる分泌蛋白は こうした有機溶剤による脱水 脱脂固定の過程で溶出し 偽陰性化する 可溶性蛋白の局在観察にはアルデヒド系固定液がすぐれている 膜蛋白についても 有機溶剤固定による膜溶解によりにじんだような局在性がしばしば観察される 2) 有機溶剤で固定された標本のパラフィン切片 脱水性固定液 ( アルコールないしアセトン ) で固定された組織をパラフィン包埋すると 架橋 1
2 性固定液であるアルデヒド系固定液に比べて 抗原性の保持が良好な傾向がある とくに 冷アセトンを用いる AMeX 法では 新鮮凍結切片と同等の抗原性や核酸構造 (DNA, RNA) の保持が期待できる 5) しかし 脱水固定による組織の収縮は避けられず HE 染色の形態像保持は十分とはいえない 組織が硬くなるため 切片の薄切が難しいことも少なくない また 可溶性抗原の流出や局在変化が生じる場合もある 目的によっては 凍結乾燥法や凍結置換法によるパラフィン包埋作製が行われることもある 3) ホルマリン固定パラフィン切片病理組織標本の大部分がこの条件で検討される ギ酸が混入するために酸性を示す 10%~20% ホルマリンの代わりに中性緩衝ホルマリンを用いる場合があるが HE 染色の染色性は通常の非緩衝ホルマリンがより優れている この条件では多くの抗原性が失活する リンパ球表面マーカーやサイトケラチン抗体でホルマリン固定パラフィン包埋切片に応用可能なのは一部のみだった しかし 最近ではこの条件でも安定した染色結果の得られる抗体が数多く市販されるようになり パラフィン切片用の抗体を選ぶ時代となっている 以下に述べるような抗原性賦活化操作や高感度法は ホルマリン固定パラフィン切片に適した免疫染色を可能とする 限界さえよく認識すれば パラフィン包埋されたことが免疫染色をあきらめる理由はない 4) ホルマリン固定による人工産物 1 血漿蛋白の特定細胞の細胞質内へのしみ込み (diffusion artifact): 組織間液に多量に存在する血漿蛋白は ホルマリン固定の間に一部の細胞の細胞質に非特異的にしみこみ 免疫染色陽性を示す ( 核は陰性 ) 代表的で有名な現象が Hodgkin 細胞あるいは Reed-Sternberg 巨細胞における細胞質内免疫グロブリンの局在である ( ポリクローナルに陽性 ) ホルマリン固定の条件がよくない場合には さまざまな細胞 ( 肝細胞 非ホジキンリンパ腫など ) の細胞質が免疫グロブリン陽性を呈す この場合は IgG のみならず IgA IgM κ 鎖 λ 鎖やアルブミンも陽性となり しかも 図 1. パラフィン切片における血清蛋白の非特異的染み込み :Hodgkin 細胞ならびに Reed-Sternberg 巨細胞における免疫グロブリン反応性 ( 左 :kappa 鎖 右 :lambda 鎖 間接法メチル緑核染色 ). ポリクローナルな L 鎖反応性が巨細胞の細胞質に一致して観察される 人工産物であり IgG IgM やアルブミンも陽性を呈する ている 細胞質がびまん性に染色される 核は陰性で 一部の細胞の細胞質のみがみごとに ( いかにも意味ありげに ) 染色されるのが特徴である ( 図 1) 細胞が固定される以前に周囲の血漿蛋白が細胞内にしみ込んだあとに固定されたとみなされる 免疫反応そのものは特異的だが 陽性所見に意味は乏しい IgG やα1 アンチトリプシン免疫染色の対照にはアルブミンが適し 2
3 2 固定ムラによる偽陰性化 : 固定ムラの影響が免疫染色の結果に大きく影響することはしばしば経験される 固定不良の部位での偽陰性化のみならず逆に過固定部位における偽陰性化も認められる 同一抗原 たとえば leukocyte common antigen (LCA CD45) でもリンパ節の周辺部のみが陽性となる場合の他 逆に陰性化する場合があり 一定の規則性に乏しい 図 2に悪性リンパ腫における LCA と vimentin の paradoxical な固定の影響を提示する 一本鎖 DNA 抗体は 切断部に生じる一定の長さの一本鎖 DNA を認識し アポトーシスのマーカーとなるが ホルマリン固定の影響で DNA の断片化が生じると正常細胞の核にも偽陽性反応を生じてしまう ( 図 3) 6) 図 2. ホルマリン浸漬固定による人工産物 ( 左 :LCA 右:vimentin 間接法). 悪性リンパ腫剖検例で vimentin 免疫反応性 ( 加熱処理後 ) は固定のよい組織の外側に陽性で 固定不良の内部には陰性である これに対して LCA は paradoxical な局在性を呈している 固定液に長く接触した外側は過固定による偽陰性を呈する 図 3. 一本鎖 DNA 免疫反応性の核内偽陽性反応 ( 左 : 肺小細胞癌 右 : 周囲非腫瘍性肺組織 ). 一本鎖 DNA 抗体は アポトーシスに伴う DNA 切断部に生成される一本鎖 DNA stretch に反応して アポトーシスのよいマーカーとなる しかし ホルマリン固定の過程で人工的な DNA 切断が生じると ( 左では外側の過固定部 ) 特異性は消失する 右の肺組織では 肺胞上皮や血管内皮の核の多くが非特異的に陽性を呈している 2. 脱灰 壊死組織ギ酸やクロロ酢酸による脱灰操作は HE 染色の染色性を低下させる 同様の現象は 長期間ホルマリンに浸漬された標本にも観察される これら標本では抗原性低下が予測されるため 免疫染色が敬遠される傾向にある 実際には たとえヘマトキシリンの染色性が極端に悪い場合でも 抗原性はかなりよく保たれていることがある 第 8 因子関連抗原では脱灰標本の方が染色性のよい場合すらある また 凝固壊死に陥った腫瘍組織だからといってマーカー陰性になるとは限らない リンパ球表面マーカーや中間径フィラメントは 壊死部でもきれいに染色されることはまれでない これらは in vivo ないし ex vivo で抗原性賦活化 ( 蛋白分解酵素処理や酸処理 ) が行われているためとみなすことができる ホルモン類 secretory component などの各種分泌蛋白 3
4 も抗原性が脱灰条件によく耐える 年余にわたってホルマリン液に浸漬されていた組織でも 美しい免疫染色が得られることは決して少なくない 図 4に 30 年以上ホルマリン固定されたパラフィン包埋組織切片 ( らい性神経炎 ) における抗酸菌 (BCG) 抗原の局在を示す amyloid A 蛋白や血液型物質も証明可能だった まず 染色に挑戦してみることが大 図 4.30 年間ホルマリン固定されたらい性末梢神経炎組織における BCG 免疫反応性 ( 左 : HE 染色 右 :BCG). BCG 抗原は抗酸菌に共通に発現しており 結核菌やらい菌のマーカーとしてすぐれている BCG 抗原は長期ホルマリン固定に耐性であり 多数のらい菌を貪食する泡沫状マクロファージの細胞質が陽性を呈する 切である Ⅱ. 染色技法 1. 内因性物質 1) 内因性ペルオキシダーゼ活性パラフィン切片でも残る内因性 ( 偽 ) ペルオキシダーゼ活性は好酸球 好中球と赤血球が代表的である しつこいペルオキシダーゼ活性を除去するには メタノール 過酸化水素の代わりに 0.5% 過ヨウ素酸処理を行い DAB 液に 10 mm アジ化ナトリウムを添加するとよい ただし 糖鎖が抗原決定基になっている場合 過ヨウ素酸処理は禁忌である 唾液腺 乳腺 腎尿細管などの上皮細胞やマクロファージ 血小板のペルオキシダーゼ活性はパラフィン切片で 図 5. 新鮮凍結切片における骨髄巨核球マーカー GPⅡbⅢa 免疫反応性の内因性ペルオキシダーゼ活性阻止による減弱 ( 左 : 内因性ペルオキシダーゼ活性阻止なし 右 : あり メチル緑核染色 ). 本態性血小板血症の骨髄新鮮凍結切片における GPⅡbⅢa(β3 インテグリン ) はメタノール 過酸化水素液への浸漬 ( 常温 20 分 ) によって抗原性が著しく減弱する は問題にならない リンパ球表面マーカー ( 糖鎖が抗原決定基になっていることが多い ) をアルコール固定新鮮凍結切片で観察する場合は 過酸化水素を利用する内因性ペルオキシダーゼ活性の阻止操作によっても抗原性が失活することがあるため ブロッキングは行わないか 一次抗体の反応後に行うとよい ( 図 5) 4
5 2) 内因性ビオチン活性新鮮凍結切片では内因性ビオチン活性が残存する 脱炭酸反応の補酵素であるビオチン ( ビタミン H) はおもにミトコンドリアに分布し 腎尿細管 肝細胞 筋肉細胞などに多く含有される 新鮮凍結切片や細胞標本に対して LSAB 法や ABC 法を応用する場合は 残存する内因性ビオチン活性に留意したい アビジン試薬を用いた内因性ビオチンのブロッキング操作が必要となる ( アビジンとビオチンの結合はきわめて強固で いったん結合すればまず解離しない ) 通常 内因性ビオチン活性はホルマリン固定で失活する しかし 子宮内膜細胞 子宮内膜癌や胎児型肺腺癌の一部に観察される opaque nuclei ( 核内が白く抜けてみえる ) では ホルマリン固定パラフィン切片においても内因性ビオチン活性が核内に残存するので注意を要する さらに パラフィン切片に加熱処理による抗原性賦活化 ( 下記参照 ) を行う場合 内因 図 6. 加熱処理による腎近位尿細管における内因性ビオチン活性の賦活化 ( 左 :10 mm クエン酸緩衝液 (CB) ph 6 中:CB ph 7 右 : 一次抗体なし (CB ph 6) villin に対する LSAB 法 ). ミトコンドリアに豊富なビオチン活性の賦活化効果は CB(pH 6) より CB(pH 7) に高い Villin 免疫反応性は刷子縁に観察される (CB ph 7 に強い ) 性ビオチン活性が復活することがある とくに 10 mm クエン酸緩衝液 (ph 7) ないし 1 mm EDTA 溶液 (ph 8) で加熱する場合はしばしばこの現象が観察される ( 図 6) 7) したがって 染色にビオチンが関与しない高感度法であるポリマー法 (Envision Flex Simple Stain Max Novolink など ) が最近の免疫染色の主流になっている 一方 卵白由来のアビジン分子が塩基性に富むことを利用した組織肥満細胞 ( ヘパリンを含有し 酸性度が高い ) の証明法が工夫されている レンサ球菌由来で中性のストレプトアビジンにはこのような性質はないため 現在 卵白アビジンが染色に用いられることはほとんどない 3) 内因性 protein A 活性特殊な例だが 黄色ブドウ球菌やレンサ球菌に対する免疫染色を行う際に パラフィン切片に加熱処理 ( 下記 ) を加えると もともとこれら細菌類が保有し IgG Fc 部分との結合性を示す protein A や protein G の生理活性が復活してしまう 逆に このことを利用した菌種の同定が可能である一方 この厄介な反応を避けるためには 加熱処理の代わりに蛋白分解酵素処理が適している どうしても加熱処理が必要な場合は 正常血清になどによるブロッキングが求められる 8) 4) 内因性色素内因性色素が diaminobenzidine (DAB) 反応の色調に類似し 陽性反応と紛らわしいことがある メラニン色素は異染性を示すため 核染色にギムザ染色あるいはメチル緑染色を選ぶと DAB 発色の褐色と明瞭に識別される 血鉄素 ( ヘモジデリン ) を有する細胞の免疫染色にはベルリンブ 5
6 ルー染色との重染色が有用である ホルマリン色素がめだつ場合は あらかじめ脱パラフィン切片にアルカリ処理を行ってホルマリン色素を溶解させておくとよい ビリルビン色素が紛らわしい所見を呈する場合もある ( 図 7) 図 7. 内因性色素 ( 胆汁色素 ) に対する注意点 : アメーバ性肝膿瘍疑い患者から採取された穿刺吸引液の cell block 標本 ( 左 :HE 染色 右 : 抗赤痢アメーバモノクローナル抗体 EHK153 による Simple Stain 法 ). 凝集したビリルビン色素がアメーバ虫体による陽性所見ときわめて紛らわしい ( 偽陽性反応であり HE 染色と見比べる必要がある ) 2. 染色技術 1) 染色中の切片の乾燥とあわ 緩衝液のふき取り不十分のために抗体が過度に希釈される DAB 発色液に過酸化水素を入れ忘れるなど 単純な染色技術的問題については成書を参照されたい 1) 染色中に切片を乾燥させると 乾燥部位に抗体蛋白が乾燥固定されるため 組織構築を無視した陽性所見がおもに切片の周辺部に観察される 一方 大きな気 図 8. 乾燥による抗体の非特異的偽陽性反応と気泡による偽陰性反応 ( 左 : 皮膚における surfactant apoprotein 染色 右 : 平滑筋肉腫におけるα-SMA 染色 ). 染色中に抗体液が乾燥すると 抗体分子が非特異的に切片上に沈着する ( 左 ) 反応液中の気泡が抗原抗体反応を局所的に妨げることもある ( 右 ) 泡により抗体液がはじかれた部位には 円形の反応陰性部位がもたらされる ( 図 8) 脱パラフィン不良部位にも不定形の非染色領域が観察される 2) 切りおき陽性対照切片における抗原性減弱免疫染色の陽性対照として パラフィン切片を切りおいておくことは病理診断の実務上重要である 大多数の抗原に問題ないが 一部の抗原 とくに核内抗原は薄切後時間が経つにつれて抗原性が失活してゆき 加熱処理で賦活化を受けにくくなる その代表例が MIB-1 (Ki-67) p53 6
7 蛋白およびステロイドホルモン受容体である これら抗原 ( とくに ER PgR) に対しては 陽性 対照切片もそのつどパラフィンブロックから薄切するようにしたい それが難しい場合は 薄切 切片を -20 以下に冷凍保存するとよい 9) 3) パラフィン切片の伸展温度の影響過酸化物還元酵素のアイソザイムである glutathione-s-transferase (GST)-πおよび抗癌剤 5-FU のリン酸化 ( 活性化 ) 酵素である orotate phosphoribosyltransferase (OPRT) といった細胞質内酵素を局在観察する際には パラフィン切片薄切後に hot plate 上で伸展 乾燥する温度が問題となる すなわち 伸展温度を 70 以上にすると抗原性が極端に低下する ( 図 9) この場合 伸展温度は 50 までが望ましい 10) こうした落とし穴は例外的だが 正しい免疫染色には重要なポイントとなる 図 9.Hot plate 上でのパラフィン切片伸展温度が抗原性に及ぼす影響 : 正常の肝内胆管上 4) 高感度技法皮における glutathione-s-tranferase π (GSTπ) の局在観察 ( 左 : 伸展温度 50 多数のペルオキシダーゼ分子を結合した高 10 秒 右 : 伸展温度 70 3 秒 ). 正常胆管分子ポリマーを二次抗体とする免疫染色上皮における GSTπ 免疫反応性は 伸展温度 (Envision Simple Stain や Novolink) は を 70 度まで上げると完全に消失する 確かに従来の間接法 ABC 法や LSAB 法をしのぐ染色感度をもたらした さらに 超高感度抗原検出法である CSA (catalyzed signal amplification) 法と次項に述べる抗原性賦活化法を組み合わせることで 従来ホルマリン固定パラフィン切片では失活して証明不能と思われていた抗原 ( 細胞接着分子 リンパ球表面マーカーなど ) が染色可能となる 11) 確かに この場合の CSA 法の有用性は高いが 逆に通常法で染色可能である抗体が入手可能であるなら そちらを用いた方が結果はずっと安定している 事実 パラフィン切片用抗体のバラエティーは年々増加している 高感度法は背景染色も増感することを忘れてはならない 一方 CSAⅡ 法 ( ビオチン化タイラマイドの代わりに ビオチン化 FITC を利用 ) において 抗体濃度が高い場合に偽陰性化が生じる場合があることも知っておきたい 12) 最近 大腸癌における epidermal growth factor receptor (EGFR) の発現を免疫組織化学的に判定し セツキシマブによる治療効果を予見するための染色キット pharmdx TM が DAKO 社から市販されている しかし 腺癌細胞がごく一部でも陽性になればセツキシマブ治療の適応となるという判定基準に対して 数多くの疑問や不信感が投げかけられている このキットで二次抗体として用いられている EnVision の代わりに 同じ DAKO 社製の CSAⅡを用いると 陽性率 陽性細胞数ともに激増することが判明した ( 図 10) この結果は 他のモノクローナル抗体を用いる EGFR 免疫染色とほぼ一致した 13) 保険収載された染色キットの大きな問題点と言えよう 7
8 図 10. 高感度法による免疫反応性の著しい増強 : 大腸腺癌における EGFR 免疫反応性 ( 左 : PharmDx キットによる染色 右 : 二次抗体を CSAⅡに置換した場合 ).EGFR が発現する大腸癌はセツキシマブによる分子標的治療の対象となる この市販キットの染色感度は明らかに低く 偽陰性反応がまれでない ( 陽性細胞数 陽性率がともに低い ) 図 11. 蛋白分解酵素処理による抗原性賦活化 : ホルマリン固定パラフィン包埋された膜性腎症における IgM( 左 ) および IgA 腎症における IgA の局在 ( 右 ). プロテアーゼ前処理 (30 分 ) により 新鮮凍結切片と同等の免疫グロブリン沈着 ( それぞれ糸球体係蹄壁における IgM とメサンギウム領域に一致した IgA) が生検組織 ( パラフィン切片 ) に可視化される 5) 抗原性賦活化抗原性賦活化とはホルマリンによる蛋白架橋反応の過程でマスクされた ( 抗体分子が反応できなくなった ) 抗原決定基を何らかの方法で表面に露出させる前処理操作をさす 方法論的には次の3 種に分類される 前処理による切片の剥離を防止する目的で シラン処理スライドへの切片添付が必須事項である 1 蛋白分解酵素 ( トリプシン プロナーゼ ペプシンなど ) による前処理は 腎糸球体に沈着した免疫グロブリンや補体を再現性よく検出するのに必須の方法である ( 図 11) その他 type 4 collagen ラミニンやケラチン蛋白の一部の証明にも用いられる 蛋白分解酵素処理によって抗原性が減弱 失活する場合もある ( ペプチドホルモン B リンパ球における細胞表面 IgD など ) 加熱処理では 脱パラフィン切片を 10 mm クエン酸緩衝液 (ph 6) 1 mm EDTA (ph 8) あるいは 0.1 M ホウ酸 (ph 7) に浸漬して 60 ないし 121 で加熱する 加熱方法は 孵卵器 (60 一晩 ) 水槽(90 ) マイクロウェーブ(100 ) オートクレーブ(121 ) 圧力鍋(120 前後 ) 蒸し器などさまざまである 核内抗原(MIB-1, p53 蛋白 エストロゲン受容体 ) のほか 膜蛋白 ( 細胞表面マーカー EMA bcl-2) 細胞骨格蛋白( ケラチン ) 分泌蛋白(PTH) の抗原性が賦活化される この操作により ホルマリン固定パラフィン包埋標本で新鮮凍結切片と同等の免疫染色結果が得られることが少なくない 14) なお 細胞標本でもエストロゲン受容体 (ER) などの核内蛋白に対しては加熱処理が抗原性賦活化に働く点は注目に値する この場合 核染色にはヘマトキシリンが向いている 二本鎖 DNA 親和性の高いメチル緑は加熱切片 (DNA が一本鎖化している ) の核を染色しづらい 加熱処理によって 抗原性が減弱 失活する場合もある MIB-1 (Ki-67) は 加熱後の切片の取扱い方によってその局在性が大きく変化してしまうので注意を要する ( 図 12) 加熱後の切片を急速に冷やすと ゆっくりと常温に戻した場合に比べて染 8
9 色性が悪いことがある 標識二次抗体に高分子ポリマー (Envision) を用いると 核分裂細胞の細胞質のみが染色される奇異な偽陰性化が経験される場合がある 15 ) そのため 最近では分子量が小さめのポリマー試薬 (DAKO 社では Envision Plus EnVision Flex など ) が主流となってきている 3その他の賦活化法として 脳内に沈着するβ-amyloid 蛋白に対する 100% ギ酸処理 DNA に人工的に取り込ませた BrdU に対する 2~4 N 塩酸処理 細胞質内アクチン封入体に対するアルカリ (1% KOH) 処理などが知られている 6) 抗体の失活 抗体は生きている 抗体いのち が免疫染色の鉄則である 生きた形での抗体の保存 管理は免疫染色の第一歩であるし もっとも重要視すべきポイントである 蛋白質は低濃度溶液では失活しやすいので 1% ウシアルブミン加 PBS で抗体を希釈するとよい 原則として 抗体はある一定濃度以上で保存すべきである 一般に冷蔵よりは冷凍保存が望ましいが 凍結保存 とくに繰り返す凍結融解に弱いモノクローナル抗体 ( とくに IgM 型 ) があることには注意すべきである うまく管理すれば 抗体は半永久的に使用できるものである 図 12.MIB-1 染色の落とし穴 ( 左 : 加熱処理後に切片を急冷 中 : 加熱処理後に常温放置 右 :EnVision 法を用いた場合の核分裂像染色 左 中は悪性リンパ腫 右は正常扁桃 ). 加熱処理後に切片を急冷すると MIB-1 が偽陰性を呈することがある また EnVision を二次抗体に使用すると 核分裂像のみが染色される場合がある 図 13. 適切な抗体濃度決定の重要性 ( 肝細胞癌に対する AFP 染色 左 : 家兎血清 400 倍希釈 右 : 家兎血清 3,200 倍希釈 Simple Stain 法 ). 抗体濃度が高い ( 希釈率が低い ) と 血管壁 ( 中央 ) や胆管上皮 ( 上部 ) が非特異的に染色されてしまう 適正希釈では 肝癌細胞の細胞質のみが顆粒状の陽性所見を呈する 7) 背景染色 signal/noise ratio signal/noise ratio とは 特異染色と背景染色の比であり この差が際だった染色が望ましい 特異染色の染色強度 ( 感度 ) を上げ 背景染色をなくす技術が理想的である 抗原性賦活化法とモノクローナル抗体の開発が免疫染色のアートとしての側面に大いに貢献している 背景染色が高い (signal/noise ratio が低い ) 染色になる場合は 以下の3つの可能性が考えられる 抗体 ( 一次抗体あるいは二次抗体以降 ) が濃い 抗体力価が低い ( とくに抗血清の場合 ) PBS による洗浄が足りない 抗体の適正希釈をあらかじめ決めておくことは免疫染色の前提条件である ( 図 13) 9
10 抗血清の代わりにモノクローナル抗体を使うと美しい染色所見が得られる場合が多いが 必ずしもモノクローナル抗体が最良とは限らない 至適希釈濃度からさらに数倍程度希釈して一晩反応させる PBS による洗浄を一晩行う PBS に高濃度 (1 N) の食塩を添加する Tween 20 などの界面活性剤を添加する 抗体溶液に skim milk やアルブミンを添加するといった技術的工夫を試してみたい 3. 染色結果の判定 1) 偽陽性と擬陽性染色結果が弱陽性にみえる場合 これを偽陽性とみなすか擬陽性とみなすか が判断の分かれ道となる 胎盤型アルカリホスファターゼを弱陽性と判断したために胚細胞性腫瘍と誤認された肺小細胞癌例は痛恨の症例として印象に残る 場合によっては 上述した抗原性賦活化法や免疫染色の増感法の併用が必要となる ホルマリン固定 パラフィン包埋の過程で抗原性が不活化されて偽陰性の結果となる可能性は常に念頭に入れておくべきである ホルマリン固定に比較的弱い抗原としては ケラチン ニューロフィラメント 第 8 因子関連抗原が代表的である ニューロフィラメントに対する市販モノクローナル抗体を用いて神経芽細胞腫や褐色細胞腫のパラフィン切片に陽性所見を得ることはなかなか難しい パラフィン切片用のリンパ球表面マーカーが陰性ないしムラ染まりとなるリンパ節や扁桃の標本は決してまれではない ルーチンの固定条件下で どの程度の再現性をもった免疫染色が可能であるのか 用いる抗体それぞれの特徴をあらかじめよく知っておくべきである MIB-1 の免疫染色に際して留意すべきは 上に述べた加熱処理方法 ( とくに切片の冷やし方 ) に基づく偽陰性化である 2) 染色の特異性判定 1 正しい細胞内抗原局在 : 免疫染色の特異性検定に関しては 細胞内局在性の詳細な観察が有用である AFP HCG などの分泌蛋白は小胞状に ペプチドホルモンは細顆粒状に S-100 蛋白や NSE などの細胞質内可溶性蛋白はびまん性に細胞質内陽性を呈する (S-100 蛋白はしばしば核も陽性を呈する ) 膜蛋白は細胞膜に沿った陽性所見となる こうした細胞内局在性は 組織形態保持のよいパラフィン切片では 凍結切片に比して明瞭であり 偽陽性を見抜きやすい プロゲステロン受容体 (PgR) や MIB-1 といった核内抗原が細胞膜に沿った陽性像を示す場合は 容易に非特異反応と判断される ( 図 14) 15) 逆に 細胞膜に対する MIB-1 の非特異的陽性反応を甲状腺硝子化索状腺腫 ( 甲状腺乳頭癌と紛らわしい核内封入体を示す ) の病理診断マーカーに利用することも報告されている 16) 2 抗体の特異性 : ルーチンの免疫染色に使用する抗体の特異性は あらかじめ十分検討しておくべきである メーカーから提供される情報は有用だが 決して盲信してはならない 家兎抗血清には しばしば中間径フィラメントに対する自然抗体が存在し たとえば抗ミオグロビン抗体で表皮細胞や血管内皮細胞が染色される事態が生じる モノクローナル抗体でも マウス腹水中の血清成分による思わぬ交差反応を認めることがある 10
11 図 14. 核内抗原の細胞膜への非特異的陽性反応 ( 左 : 浸潤性乳癌における PgR 免疫反応性 右 : 肺胞上皮における MIB-1 免疫反応性 ). 左図の乳癌細胞の核は PgR 陰性だが 細胞膜がびまん性陽性を呈している 正常肺胞上皮の細胞膜は MIB-1 陽性となる 右図下半分にみられる甲状腺濾胞癌転移巣には陽性所見はほとんどみられない 図 15.vimentin 陽性を呈した末梢肺の多発性小細胞性腫瘍 ( 左 :HE 染色 右上 : cytokeratin 右下:vimentin). 若年男性 非喫煙者にみられた悪性小細胞性腫瘍であり cytokeratin EMA CD56 synaptophysin 陽性から肺小細胞癌が疑われたが vimentin 陽性像がヒントとなり 後腹膜原発の desmoplastic small round cell tumor と最終診断された 3 抗体分子の特定細胞による非特異的吸着 : 組織肥胖細胞 内分泌細胞 (G 細胞 ) プルキニエ細胞 胃底腺の壁細胞やB 型肝炎ウイルス感染肝細胞といった特定の細胞や間質の膠原線維が抗体分子を非特異的に吸着しやすい点にも留意したい 3) 予想外の結果が得られたとき HE 染色での予測と異なった免疫染色の結果が得られたときは 免疫染色の意義が最大限に発揮される瞬間である しかし 喜び勇んで免疫組織化学的な解釈を与える前に 上述した染色やマーカーの特異性を再吟味する過程が求められる つまり ケラチン陽性の悪性リンパ腫や悪性黒色腫の可能性が否定できるかと考えるかどうか 形質細胞や骨髄腫細胞に EMA が発現することを知っているか否かが誤った診断を避けるキーポイントとなる 図 15 には 若年者の小細胞性肺腫瘍で 神経内分泌マーカーに加えて vimentin が陽性を呈した症例を示す 通常 肺小細胞癌は vimentin 陰性である この所見から 後腹膜由来の desmoplastic small round cell tumor ( 神経内分泌分化を含む多様な分化を示す軟部腫瘍で 悪性小円形細胞腫瘍の一種 ) の転移が判明した こうした各論的知識に基づいた経験を踏まえて初めて 免疫染色の真の醍醐味を味わうことができる 4) 臨床診断と病理診断が大きく乖離したときもまた要注意である この場合 他の標本からのコンタミネーションあるいは標本相互の取り違えの可能性をまず否定したい 提出容器やパラフィンブロックのチェックが第一段階であることはいうまでもない 必要に応じて 血液型物質に対する免疫染色を加えるとよい ABO 型や Lewis 型の糖鎖は血管内皮細胞や上皮細胞に発現されているので パラフィン切片上での血液型鑑定が可能である この方法で検体の取り違いが証明され 無用な手術を避け得た貴重な体験がある 2 例の前立腺生検組織が外来手術室で混在して 11
12 しまい 浸潤癌が一部の切片にのみ観察された 事例において 血液型判定が患者の特定に有効 だった経験もある ( 図 16) 図 16. 血液型物質による前立腺癌組織の個人識別 :A 型血液型物質に対する免疫染色 ( 左 : 担癌例 血液型 A 型 右 : 非癌例 O 型 ). 提出時に誤って2 例の前立腺針生検組織が混在してしまった 担癌症例の血管内皮細胞にA 型物質が発現しているが 非癌症例ではA 型物質陰性だった 癌は血液型 A 型の個体に存在することが決定された おわりに免疫染色は美しく特異性の高い染色が当然である時代である 技師諸氏は技術のプロとしてマーカー選択の妥当性や結果の判定にまで踏み込んだ検討をしてほしいし 病理医をはじめとする医師は 染色技術は技術のプロにお任せ 状態からの脱却をめざしてほしい 病理診断における免疫染色の応用に関しては 染色対象とするマーカーをいかに選ぶか いかに染めるか そして結果をいかに判断するかの3 者がそろって初めて有効な免疫染色となることを肝に銘じてほしい つまり 技師と医師の連係プレイが必須条件である 文献 1) 堤寛. パラフィン切片による光顕的酵素抗体法染色 ; 市販抗体および抗原に関する一般的注意点 ; 病理診断への応用. 改訂三版酵素抗体法 ( 渡辺慶一 中根一穂編 ) 学際企画 東京 pp , , , ) 堤寛 鴨志田伸吾. 病理医に必要なワンポイント病理技術 (10): 免疫染色のコツ. 病理と臨床 23: 83-88, ) 堤寛 鴨志田伸吾. 病理医に必要なワンポイント病理技術 (11): 抗原性賦活化法. 病理と臨床 23: , ) 堤寛. 病理医に必要なワンポイント病理技術 (12): 免疫染色結果の判定. 病理と臨床 23: 12
13 , ) Sato Y, Mukai K, Watanabe S, et al. The AMeX method. A simplified technique of tissue processing and paraffin embedding with improved preservation of antigens for immunostaining. Am. J. Pathol. 125: , ) 堤寛 塩竃和也 鴨志田伸吾. 病理医に必要なワンポイント病理技術 (13): アポトーシスの組織化学. 病理と臨床 23: , ) Kamoshida S, Matsuoka H, Matsuyama A, et al. Reproducible and reliable immunohistochemical demonstration of thymidylate synthase in formalin-fixed, paraffin-embedded sections: Application of antigen retrieval in EDTA solution. Acta Histochem. Cytochem. 36: , ) Shimomura R, Tsutsumi Y. Histochemical identification of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus: Contribution to preventing nosocomial infection. Seminars Diagn. Pathol. 24: , ) Wester K, Wahlung E, Sundstroem C, et al. Paraffin section storage and immunohistochemistry. Effect of time, temperature, fixation, and retrieval protochol with emphasis on p53 protein and MIB1 antigen. Appl. Immunohistochem. Mol. Morphol. 8: 61-70, ) Kamoshida S, Sakamoto N, Matsuoka H, et al. Heat-assisted stretching of paraffin section on hot plate weakens immunoreactivity of orotate phosphoribosyltransferase. Acta Histochem. 38: 69-74, ) 谷洋一.DNA ターゲット増幅法 (PCR 法 ) とシグナル増幅法 (CSA 法 ) の in situ hybridization (ISH) 法への応用. 組織細胞化学 1997( 日本組織細胞化学会編 ) 学際企画 東京 pp , ) 塩竃和也 宮瀬薫 鴨志田伸吾 他.CSAⅡ 法を用いた免疫染色において 抗体濃度が高い場合に生じる偽陰性化の検討. 病理と臨床 28: , ) 塩竃和也 水谷泰嘉 稲田健一 他. 大腸癌における高感度 EGFR 免疫染色の確立 :EGFR pharmdx kit と比較した免疫組織化学的研究. 日本病理学会会誌 100: 480, 2011( 抄録 ). 14)Shi S-R, Gu J, Kalra KL, et al. Antigen retrieval technique. A novel approach to immunohistochemistry on routinely processed tissue sections. Cell Vision 2: 2-17, ) 川井健司 堤寛.MIB-1 染色の落とし穴. 病理技術 59: 20-21, ) Hirokawa M, Carney JA. Cell membrane and cytoplasmic staining for MIB-1 in hyalinizing trabecular adenoma of the thyroid gland. Am. J. Surg. Pathol. 24: ,
Microsoft Word - Dr. Abe.doc
3 ステップ アビジン - ビオチンシステム (SAB 法 ) とポリマー法 慶應義塾大学医学部病理学教室阿部仁 はじめに 免疫組織化学は Coons らが蛍光色素を抗体に標識した蛍光抗体法の技術を確立してから Singers のフェリチン抗体法を経て 1967 年に Nakane と Pierce により標識物質に西洋ワサビペルオキシダーゼ (horseradish peroxidase:hrp)
免疫組織化学の基礎と応用 蓮井和久鹿児島大学大学院医歯学総合研究科 講師 この講義は 2007 年から大学院専門基礎過程の選択科目として開講しているものである 教科書には 改訂四版渡辺 中根の酵素抗体法 ( 名倉宏 長村義之 堤寛編集 ) 学際企画を用いています それに 最近のポリマー法の開発等と私の研究への応用等を基礎にしています I. 序論 1) 医学 生物学における免疫組織化学の確立と意義免疫組織化学は
Microsoft PowerPoint - 免疫染色における.ppt
免疫染色におけるトラブルシューティング 名古屋第二赤十字病院医療技術部検査 病理課 水嶋祥栄 免疫組織化学染色フローチャート検鏡脱水 透徹 封入免疫染色(用手法 機械法)抗原賦活(酵素処理 加熱処理)脱パラフィン薄切パラフィン包埋(脱脂 脱灰)ホルマリン固定臓器の切り出し 固定に関するトラブル 固定が強い タンパク間に形成された架橋により抗原決定基がマスクされる 抗原決定基の立体構造が変化して抗原性が失われる
Microsoft Word - Dr. Abe.doc
酵素抗体法による免疫組織化学染色と特殊染色の二重染色 慶應義塾大学医学部病理学教室阿部仁 はじめに免疫組織化学は組織および細胞に存在する抗原の局在を証明する方法で 標識物質により大別すると 1 蛍光抗体法 2 酵素抗体法 3 重金属抗体法がある 特に 酵素抗体法による免疫組織化学染色 ( 以下 免疫染色 ) は 病理診断など形態学的観察においてさまざまな物質の局在証明に重要な役割を演じている 病理診断時にヘマトキシリン
dr
成人および小児膜性腎症における M-type ホスホリパーゼ A2 受容体の免疫組織学的検出 東京女子医科大学腎臓病総合医療センター病理検査室 堀田茂 はじめに膜性腎症は 糸球体基底膜上皮下に形成される免疫複合体により糸球体上皮障害が惹起される糸球体腎炎である 本邦においては 成人ネフローゼ症候群の原因では膜性腎症が一番多く約 35% を占め 小児では少なく 1%~7% と報告されている 発症年齢は
イルスが存在しており このウイルスの存在を確認することが診断につながります ウ イルス性発疹症 についての詳細は他稿を参照していただき 今回は 局所感染疾患 と 腫瘍性疾患 のウイルス感染検査と読み方について解説します 皮膚病変におけるウイルス感染検査 ( 図 2, 表 ) 表 皮膚病変におけるウイ
2012 年 12 月 13 日放送 第 111 回日本皮膚科学会総会 6 教育講演 26-3 皮膚病変におけるウイルス感染検査と読み方 川崎医科大学皮膚科 講師山本剛伸 はじめにウイルス性皮膚疾患は 臨床症状から視診のみで診断がつく例もありますが ウイルス感染検査が必要となる症例も日常多く遭遇します ウイルス感染検査法は多種類存在し それぞれに利点 欠点があります 今回は それぞれのウイルス感染検査について
プロトコール集 ( 研究用試薬 ) < 目次 > 免疫組織染色手順 ( 前処理なし ) p2 免疫組織染色手順 ( マイクロウェーブ前処理 ) p3 免疫組織染色手順 ( オートクレーブ前処理 ) p4 免疫組織染色手順 ( トリプシン前処理 ) p5 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理 ) p6 免疫
< 目次 > 免疫組織染色手順 ( 前処理なし ) p2 免疫組織染色手順 ( マイクロウェーブ前処理 ) p3 免疫組織染色手順 ( オートクレーブ前処理 ) p4 免疫組織染色手順 ( トリプシン前処理 ) p5 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理 ) p6 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理後 マイクロウェーブまたはオートクレーブ処理 )p7 抗原ペプチドによる抗体吸収試験 p8 ウエスタン ブロッティング
免疫組織化学染色
免疫組織化学染色 - 227 229 233 - 平成 28 年度免疫組織化学サーベイ報告 免疫組織化学染色 (Ki-67) はじめに Ki-67は ヒトKi-67と特異的に反応し 休止期 (G0 期 ) を除く細胞周期の全周期 (G1 期 S 期 G2 期 M 期 ) で発現している核蛋白である 正常組織 腫瘍組織いずれも細胞増殖周期に入っている細胞に反応が見られる また 乳癌 大腸癌 乏突起膠腫
ÿþ
免疫組織染色用試薬 免疫染色用抗体 免疫組織染色は 抗体を用いて組織細胞内の抗原を可視化する手法で 現在幅広く用いられています 当社では免疫組織染色に使用できる抗体を数多く取扱っています Fas 抗マウス Fas, ウサギ マウス肝臓 ( パラフィン切片 ) 概要 免疫組織染色において マウス肝臓の肝細胞細胞質及び卵巣の顆粒層細胞 卵細胞に発現している Fas と反応 交差性 マウス ラット 使用濃度
ヒト慢性根尖性歯周炎のbasic fibroblast growth factor とそのreceptor
α μ μ μ μ 慢性化膿性根尖性歯周炎の病態像 Ⅰ型 A D Ⅱ型 E H Ⅰ型では 線維芽細胞と新生毛細血管が豊富で線維成分 に乏しく マクロファージ リンパ球や形質細胞を主とす る炎症性細胞の多数浸潤を認める Ⅱ型では Ⅰ型よりも線維成分が多く 肉芽組織中の炎 症性細胞浸潤や新生毛細管血管の減少や Ⅰ型よりも太い 膠原線維束の形成を認める A C E G B D F H A B E F HE
一次サンプル採取マニュアル PM 共通 0001 Department of Clinical Laboratory, Kyoto University Hospital その他の検体検査 >> 8C. 遺伝子関連検査受託終了項目 23th May EGFR 遺伝子変異検
Department of Clinical Laboratory, Kyoto University Hospital 6459 8. その他の検体検査 >> 8C. 遺伝子関連検査受託終了項目 23th May. 2017 EGFR 遺伝子変異検査 ( 院内測定 ) c-erbb/egfr [tissues] 基本情報 8C051 c-erbb/egfr JLAC10 診療報酬 分析物 識別材料測定法
モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の特性と
Epidermal growth factor receptor(egfr) p53 免疫染色を用いた尿細胞診の良悪性鑑別 総合病院土浦協同病院病理部 池田聡 背景膀胱や腎盂に出来る尿路上皮癌の頻度は近年増加している この尿路上皮癌の診断や経過観察において尿細胞診は最も重要な手段の 1 つである この検査は 患者への負担が小さく繰り返しの検査が容易であることから尿細胞診の診断価値は非常に高く 検査の頻度は年々増加している
( 様式甲 5) 学位論文内容の要旨 論文提出者氏名 論文審査担当者 主査 教授 大道正英 髙橋優子 副査副査 教授教授 岡 田 仁 克 辻 求 副査 教授 瀧内比呂也 主論文題名 Versican G1 and G3 domains are upregulated and latent trans
( 様式甲 5) 学位論文内容の要旨 論文提出者氏名 論文審査担当者 主査 大道正英 髙橋優子 副査副査 岡 田 仁 克 辻 求 副査 瀧内比呂也 主論文題名 Versican G1 and G3 domains are upregulated and latent transforming growth factor- binding protein-4 is downregulated in breast
免疫組織化学染色
免疫組織化学染色 - 233 - 平成 29 年度免疫組織化学サーベイ報告 免疫組織化学染色 (TTF-1) はじめに Thyroid transcription factor-1 (TTF-1) はホメオドメインタンパクファミリーに属し 甲状腺 肺の上皮細胞で特異的に発現している転写因子である このタンパクは甲状腺特異遺伝子の転写調節因子であり また肺特異分化誘導遺伝子の活性化にも関与していることが示されている
モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の特性と
パラフィン切片を用いた免疫組織染色の結果の解釈 東京医科大学病理診断学 向井清 免疫組織化学 特に酵素抗体法は病理診断や形態学的研究に広く用いられている 免疫組織化学は生体内の物質 ( 抗原 ) の存在と分布を生物試薬 ( 抗体 酵素 ) を用いて高感度に かつ特異性高く検出する方法である ( 表 1) その特徴として 1) 手技的に易しい 2) 応用範囲が広い ( 生化学的情報 形態情報 ) 3)
Taro-kv12250.jtd
ニューカッスル病 マレック病 ( ニューカッスル病ウイルス由来 F 蛋白遺伝子導入マレック病ウイルス 1 型 ) 凍結生ワクチン 平成 22 年 8 月 12 日 ( 告示第 2288 号 ) 新規追加 ニューカッスル病ウイルスのF 蛋白をコードする遺伝子を弱毒マレック病ウイルス (1 型 ) に挿入して得られた組換え体ウイルスを培養細胞で増殖させて得た感染細胞浮遊液を凍結したワクチンである 1 小分製品の試験
<4D F736F F F696E74202D F88A497D58B5A D94C797E189EF5F5F96C F A8A8889BB82C982C282A282C45F8DC58F492E707074>
免疫染色 賦活化について 2009 年 6 月 20 日愛臨技病理研究班例会 西尾市民病院中村広基 染色性に影響を与える素因 固定 組織 染色手技 種類 状態 内因性酵素活性 試薬 実施 ホルマリン アルコール 過固定固定不良 細胞外への抗原の遊出ペルオキシダーゼアルカリフォスタファーゼビオチン 一次抗体の保存 濃度検出系抗体の種類 賦活化の方法 時間 緩衝液内因性酵素活性の除去抗体反応の温度 時間実施中の乾燥洗浄不良
免疫組織化学の基礎と応用 蓮井和久鹿児島大学大学院医歯学総合研究科 講師 この講義は 2007 年から大学院専門基礎過程の選択科目として開講しているものである 教科書には 改訂四版渡辺 中根の酵素法 ( 名倉宏 長村義之 堤寛編集 ) 学際企画を用いています それに 最近のポリマー法の開発等と私の研究への応用等を基礎にしています III. 各酵素法 a) 酵素直接法基本となる酵素法である 一次が酵素で標識されており
Dr, Fujita
免疫組織化学染色における抗原賦活の原理について考える 東京医科大学病理学講座 藤田浩司 はじめにパラフィン切片により証明される抗原の種類は, この十数年のうちに飛躍的に増加した. 元来, 免疫組織化学法は凍結切片やアセトンを用いた固定により抗原温存を図っていたが, 現在ではホルマリン固定材料のパラフィン切片によっても多くの抗原の同定が可能となった. その理由には, 1) ホルマリン固定に抵抗性の抗原を認識するモノクローナル抗体の開発
免疫組織化学の基礎と応用 蓮井和久鹿児島大学大学院医歯学総合研究科 講師 この講義は 2007 年から大学院専門基礎過程の選択科目として開講しているものである 教科書には 改訂四版渡辺 中根の酵素抗体法 ( 名倉宏 長村義之 堤寛編集 ) 学際企画を用いています それに 最近のポリマー法の開発等と私の研究への応用等を基礎にしています IV. 抗体の性状と取り扱い 1. 抗体の性状と標識抗体 1) 抗体
パナテスト ラットβ2マイクログロブリン
研究用試薬 2014 年 4 月作成 EIA 法ラット β 2 マイクログロブリン測定キット PRH111 パナテスト A シリーズラット β 2- マイクロク ロフ リン 1. はじめに β 2 - マイクログロブリンは, 血液, 尿, および体液中に存在し, ヒトでは腎糸球体障害, 自己免疫疾患, 悪性腫瘍, 肝疾患などによって血中濃度が変化するといわれています. また,β 2 - マイクログロブリンの尿中濃度は,
Dr. Kawamura.doc
GIST の診断に有用な免疫染色 社会医療法人財団大和会東大和病院病理細胞診断科河村淳平, 傳田珠美, 原田邦彦, 桑尾定仁 はじめに 消化管に発生する間葉系腫瘍は, 消化管間質腫瘍 (gastrointestinal stromal tumor; GIST), 平滑筋腫瘍, あるいは神経鞘腫などが知られている. この中で発生頻度のもっとも高い腫瘍が GIST である. GIST は消化管壁の筋間神経叢に局在する
Microsoft Word - ライカIHCRefineNovoLinkキットS-100 第3版記載整備.d
体外診断用医薬品 **2014 年 1 月改訂 ( 第 3 版 ) *2013 年 6 月改訂 ( 第 2 版 ) 認証番号 222AAAMX00081000 号 この添付文書をよく読んでから使用してください クラス Ⅱ 免疫組織学検査用シリーズ組織検査用蛋白キットライカ IHC Refine/NovoLink キット S-100 Refine キット S-100 全般的な注意 1. は体外診断用であり
33 NCCN Guidelines Version NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN Guidelines ) (NCCN 腫瘍学臨床診療ガイドライン ) 非ホジキンリンパ腫 2015 年第 2 版 NCCN.or
33 NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN Guidelines ) (NCCN 腫瘍学臨床診療ガイドライン ) 2015 年第 2 版 NCCN.org NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN Guidelines ) (NCCN 腫瘍学臨床診療ガイドライン ) の Lugano
能性を示した < 方法 > M-CSF RANKL VEGF-C Ds-Red それぞれの全長 cdnaを レトロウイルスを用いてHeLa 細胞に遺伝子導入した これによりM-CSFとDs-Redを発現するHeLa 細胞 (HeLa-M) RANKLと Ds-Redを発現するHeLa 細胞 (HeL
学位論文の内容の要旨 論文提出者氏名 秦野雄 論文審査担当者 主査竹田秀副査北川昌伸 山口朗 論文題目 Tumor associated osteoclast-like giant cells promote tumor growth and lymphangiogenesis by secreting vascular endothelial growth factor-c ( 論文内容の要旨 )
モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の特性と
実験動物における免疫組織化学染色 ~ マウス組織を中心に ~ 1) 1,2) 1) 川井健司, 中村雅登, 玉置憲一 1. 財団法人実験動物中央研究所, 2. 東海大学医学部基盤診療学系病理診断学 はじめに動物を使った実験というのは, 医学の研究者および新薬の開発を目指す研究者にとって欠かせないものであり, その実験の素材となるのが 実験動物 である. 実験動物として使用される動物は多種類の動物が使用されており,
Microsoft Word ab205921_自動染色プロトコール_YU_IS.docx
抗 PD-L1 抗体 [clone 28-8] 動免疫組織染 装置別プロトコール PD-L1 RabMAb [clone 28-8] (ab205921) BioGenex 社 i6000( オフライン抗原賦活化 ) Leica 社 BOND RX( オンライン抗原賦活化 ) Ventana 社 Ultra( オフライン抗原賦活化 ) Dako 社 Omnis BioGenex 社 i6000 プロトコール
Title
不規則抗体検査の解説 福島県立総合衛生学院 教務部臨床検査学科 安田広康 SLIDE 1 不規則抗体同定のプロセス (1) 不規則抗体スクリーニング (Sc) 可能性の高い抗体の推定 * 否定できない抗体の推定反応態度 *1 消去法 * - 日臨技 輸血 移植検査技術教本 - *1 陽性の Sc 赤血球 1) 反応パターン ) 反応温度 ) 凝集の強さ * 陰性の Sc 赤血球 1) 量的効果 *
第５８回日本臨床細胞学会 Self Assessment Slide
7/6/5 回答者 (n=3) 第 58 回日本臨床細胞学会 自己採点方式 6% % 5% DR スライドカンファレンス CT 解答と集計結果 77% Other ( 空白 ) 勤務施設 (n=3) 日頃領域 6% 5% 3% % % 5% 7% 病院検査センター検診センター働いていない他 ( 空白 ) 37% 5% 46% ほぼ全科 (4 科以上 ) 複数科 (-3) 単科空白 経験年数 (n=3)
<4D F736F F D B82C982C282A282C482512E646F63>
サンプル条件および固定化分子の選択 Biacoreの実験ではセンサーチップに固定化する分子をリガンド それに対して結合を測定する分子をアナライトと呼びます いずれの分子をリガンドとし アナライトとするかは 実験系を構築する上で重要です 以下にサンプルに適したリガンド アナライトの設計方法やサンプルの必要条件などをご紹介します アナライト リガンド センサーチップ (1) タンパク質リガンドとしてもアナライトとしても用いることができます
豚繁殖 呼吸障害症候群生ワクチン ( シード ) 平成 24 年 3 月 13 日 ( 告示第 675 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した弱毒豚繁殖 呼吸障害症候群ウイルスを同規格に適合した株化細胞で増殖させて得たウイルス液を凍結乾燥したワクチンである 2 製法 2.1 製造用株
豚繁殖 呼吸障害症候群生ワクチン ( シード ) 平成 24 年 3 月 13 日 ( 告示第 675 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した弱毒豚繁殖 呼吸障害症候群ウイルスを同規格に適合した株化細胞で増殖させて得たウイルス液を凍結乾燥したワクチンである 2 製法 2.1 製造用株 2.1.1 名称豚繁殖 呼吸障害症候群ウイルス JJ1882 株又はこれと同等と認められた株 2.1.2
学位論文の内容の要旨 論文提出者氏名 佐藤雄哉 論文審査担当者 主査田中真二 副査三宅智 明石巧 論文題目 Relationship between expression of IGFBP7 and clinicopathological variables in gastric cancer (
学位論文の内容の要旨 論文提出者氏名 佐藤雄哉 論文審査担当者 主査田中真二 副査三宅智 明石巧 論文題目 Relationship between expression of IGFBP7 and clinicopathological variables in gastric cancer ( 論文内容の要旨 ) < 要旨 > Insulin-like growth factor ( 以下 IGF)
1. Caov-3 細胞株 A2780 細胞株においてシスプラチン単剤 シスプラチンとトポテカン併用添加での殺細胞効果を MTS assay を用い検討した 2. Caov-3 細胞株においてシスプラチンによって誘導される Akt の活性化に対し トポテカンが影響するか否かを調べるために シスプラチ
( 様式甲 5) 学位論文内容の要旨 論文提出者氏名 論文審査担当者 主査 朝日通雄 恒遠啓示 副査副査 瀧内比呂也谷川允彦 副査 勝岡洋治 主論文題名 Topotecan as a molecular targeting agent which blocks the Akt and VEGF cascade in platinum-resistant ovarian cancers ( 白金製剤耐性卵巣癌における
Western BLoT Rapid Detect
研究用 Western BLoT Rapid Detect 説明書 v201212 Western BLoT Rapid Detect は 標識二次抗体の代わりに独自の IgG Detector(HRP labeled) を利用して一次抗体を検出するウェスタンブロッティング専用の検出試薬キットです 本製品を利用することで 標識二次抗体を用いて検出する従来法ではできなかった迅速検出 高感度検出 シグナルの増強
TaKaRa POD Conjugate For Mouse Tissue/For Tissue
研究用 TaKaRa POD Conjugate For Mouse Tissue/For Tissue 説明書 v201401_2 TaKaRa POD Conjugate は パラフィン包埋切片用の免疫組織化学染色試薬です 本製品の主な構成成分は Fab にフラグメント化した二次抗体とペルオキシダーゼ ( 酵素 ) をアミノ酸ポリマーに結合した標識ポリマーで 安定化タンパク質と抗菌剤を含む MOPS(3-(N-Morpholino)propanesulfonic
図 B 細胞受容体を介した NF-κB 活性化モデル
60 秒でわかるプレスリリース 2007 年 12 月 17 日 独立行政法人理化学研究所 免疫の要 NF-κB の活性化シグナルを増幅する機構を発見 - リン酸化酵素 IKK が正のフィーッドバックを担当 - 身体に病原菌などの異物 ( 抗原 ) が侵入すると 誰にでも備わっている免疫システムが働いて 異物を認識し 排除するために さまざまな反応を起こします その一つに 免疫細胞である B 細胞が
情報提供の例
145 ヒアルロン酸 2( 肝硬変 ) 平成 22 年 6 月 21 日新規 平成 26 年 9 月 22 日更新 平成 30 年 2 月 26 日更新 取扱い原則として 肝硬変に対するヒアルロン酸は認められない 取扱いを定めた理由 肝硬変 では 既に肝の線維化が認められるものであり ヒアルロン酸の測定は 疾患の経過観察の参考とならない 39 リウマトイド因子 (RF)
650 Fluorophore 690 Fluorophore DMSO ( 1 x 500 μl) 1 x 1.5 ml) Opal polymer HRP Ms+Rb ( 2 x 50mL) Blocking/Ab Diluent (1 x 100 ml) 4 x 250ml) * 数量は Op
Manual Multiplex IHC For laboratory use only. A research method for research purposes only. Opal TM 4-7-color Manual IHC Kit 製品情報保存条件 : 遮光冷蔵保存 (4 ) 製品受領後 Opal 色素のみ DMSO 溶解前は -20 保存安定性 : 上記保存条件で 3 ヶ月間は安定適用用途
Western BLoT Immuno Booster
研究用 Western BLoT Immuno Booster 説明書 v201211 Western BLoT Immuno Booster は 抗体の反応性を増強させる成分を含む溶液で 抗体の希釈液に用いるだけで 抗原抗体反応を促進します 本製品は ウェスタンブロット ELISA 等の各種イムノアッセイに対応しており 各アッセイにおいて数倍から数十倍の検出感度向上が期待できます 西洋ワサビペルオキシダーゼ
大学院博士課程共通科目ベーシックプログラム
平成 30 年度医科学専攻共通科目 共通基礎科目実習 ( 旧コア実習 ) 概要 1 ). 大学院生が所属する教育研究分野における実習により単位認定可能な実習項目 ( コア実習項目 ) 1. 組換え DNA 技術実習 2. 生体物質の調製と解析実習 3. 薬理学実習 4. ウイルス学実習 5. 免疫学実習 6. 顕微鏡試料作成法実習 7. ゲノム医学実習 8. 共焦点レーザー顕微鏡実習 2 ). 実習を担当する教育研究分野においてのみ単位認定可能な実習項目
「適正なHER2検査のために」
乳癌における HER2 病理組織標本作製および 病理診断のガイドライン ( 案 ) 1. はじめに p. 2 2. 標本の準備 p. 2 3. Immunohistochemistry (IHC) 法 p. 2 4. In situ hybridization (ISH) 法 (FISH 法 DISH 法 ) p. 4 5. 病理診断と HER2 分子標的治療適応のフローチャート p. 6 6. 参考文献
学位論文の内容の要旨 論文提出者氏名 小川憲人 論文審査担当者 主査田中真二 副査北川昌伸 渡邉守 論文題目 Clinical significance of platelet derived growth factor -C and -D in gastric cancer ( 論文内容の要旨 )
学位論文の内容の要旨 論文提出者氏名 小川憲人 論文審査担当者 主査田中真二 副査北川昌伸 渡邉守 論文題目 Clinical significance of platelet derived growth factor -C and -D in gastric cancer ( 論文内容の要旨 ) < 要旨 > platelet derived growth factor (PDGF 血小板由来成長因子)-C,
がん登録実務について
平成 28 年度東京都がん登録説明会資料 2-1 がん登録届出実務について (1) 1. 届出対象 2. 届出候補見つけ出し 3. 診断日 4. 届出票の作成例示 東京都地域がん登録室 1 1. 届出対象 1 原発部位で届出 2 入院 外来を問わず 当該腫瘍に対して 自施設を初診し 診断あるいは治療の対象 ( 経過観察を含む ) となった腫瘍を届出 3 届出対象となった腫瘍を 1 腫瘍 1 届出の形で届出
鶏大腸菌症 ( 組換え型 F11 線毛抗原 ベロ細胞毒性抗原 )( 油性アジュバント加 ) 不活化ワクチン平成 20 年 6 月 6 日 ( 告示第 913 号 ) 新規追加 平成 25 年 9 月 26 日 ( 告示第 2480 号 ) 一部改正 1 定義組換え型 F11 線毛抗原産生大腸菌及びベ
鶏大腸菌症 ( 組換え型 F11 線毛抗原 ベロ細胞毒性抗原 )( 油性アジュバント加 ) 不活化ワクチン平成 20 年 6 月 6 日 ( 告示第 913 号 ) 新規追加 平成 25 年 9 月 26 日 ( 告示第 2480 号 ) 一部改正 1 定義組換え型 F11 線毛抗原産生大腸菌及びベロ細胞毒性抗原産生大腸菌の培養菌液を不活化し その遠心上清を濃縮後 油性アジュバントを添加したワクチンである
Taro-SV02500b.jtd
牛大腸菌性下痢症 (K99 保有全菌体 FY 保有全菌体 31A 保有全菌体 O78 全菌体 )( アジュバント加 ) 不活化ワクチン 平成 21 年 11 月 12 日 ( 告示第 1569 号 ) 一部改正 1 定義線毛抗原 K99 FY 及び 31A を保有する大腸菌並びに O78 の大腸菌の培養菌液を不活化したものを混合し アルミニウムゲルアジュバントを添加したワクチンである 2 製法 2.1
■リアルタイムPCR実践編
リアルタイム PCR 実践編 - SYBR Green I によるリアルタイム RT-PCR - 1. プライマー設計 (1)Perfect Real Time サポートシステムを利用し 設計済みのものを購入する ヒト マウス ラットの RefSeq 配列の大部分については Perfect Real Time サポートシステムが利用できます 目的の遺伝子を検索して購入してください (2) カスタム設計サービスを利用する
PanaceaGel ゲル内細胞の観察 解析方法 1. ゲル内細胞の免疫染色 蛍光観察の方法 以下の 1-1, 1-2 に関して ゲルをスパーテルなどで取り出す際は 4% パラホルムアルデヒドで固定してから行うとゲルを比較的簡単に ( 壊さずに ) 取り出すことが可能です セルカルチャーインサートを
1. ゲル内細胞の免疫染色 蛍光観察の方法 以下の 1-1, 1-2 に関して ゲルをスパーテルなどで取り出す際は 4% パラホルムアルデヒドで固定してから行うとゲルを比較的簡単に ( 壊さずに ) 取り出すことが可能です セルカルチャーインサートを用いた培養ではインサート底面をメス等で切り取ることで またウェルプレートを用いた培養ではピペットの水流でゲル ( 固定後 ) を底面から浮かすことで 回収しやすくなります
生理学 １章 生理学の基礎 1-1. 細胞の主要な構成成分はどれか １ タンパク質 ２ ビタミン ３ 無機塩類 ４ ＡＴＰ 第５回 按マ指 (1279) 1-2. 細胞膜の構成成分はどれか １ 無機りん酸 ２ リボ核酸 ３ りん脂質 ４ 乳酸 第６回 鍼灸 (1734) E L 1-3. 細胞膜につ
の基礎 1-1. 細胞の主要な構成成分はどれか １ タンパク質 ２ ビタミン ３ 無機塩類 ４ ＡＴＰ 第５回 (1279) 1-2. 細胞膜の構成成分はどれか １ 無機りん酸 ２ リボ核酸 ３ りん脂質 ４ 乳酸 第６回 (1734) 1-3. 細胞膜について正しい記述はどれか １ 糖脂質分子が規則正しく配列している ２ イオンに対して選択的な透過性をもつ ３ タンパク質分子の二重層膜からなる ４
研究成果報告書
様式 C-19 科学研究費補助金研究成果報告書 研究種目 : 基盤研究 (C) 研究期間 :2007~2008 課題番号 :19590460 研究課題名 ( 和文 ) 日本紅斑熱の免疫染色法による早期診断法の開発と人畜共通感染症としての病態学的解析研究課題名 ( 英文 ) Rapid diagnosis of Japanese spotted fever by immunohistochemistry
検査項目情報 トータルHCG-β ( インタクトHCG+ フリー HCG-βサブユニット ) ( 緊急検査室 ) chorionic gonadotropin 連絡先 : 基本情報 ( 標準コード (JLAC10) ) 基本情報 ( 診療報酬 ) 標準コード (JLAC10)
chorionic gonadotropin 連絡先 : 3479 2-2908 基本情報 ( 標準コード (JLAC10) ) 基本情報 ( 診療報酬 ) 標準コード (JLAC10) 診療報酬 分析物 9186 4. 内分泌学的検査 >> 4F. 性腺 胎盤ホルモンおよび結合蛋白 >> 4F090. Ver.2 4F090 HCGβ サブユニット (β-hcg) 特掲診療料 >> 検査 >> 検体検査料
平成14年度研究報告
平成 14 年度研究報告 研究テーマ 多嚢胞性卵巣発症に関する遺伝性素因の解析 - PCO の解析 - 北海道大学大学院医学研究科 助手菅原照夫 現所属 : 北海道大学大学院医学研究科 医学部連携研究センター サマリー 多嚢胞性卵巣 (PCO) は生殖可能年齢の婦人の 5 10% に発症する内分泌疾患である 臨床症状は 月経不順 多毛 肥満 排卵障害が主な特徴であり 難治性の不妊症の主な原因である
検査項目情報 1171 一次サンプル採取マニュアル 4. 内分泌学的検査 >> 4F. 性腺 胎盤ホルモンおよび結合蛋白 >> 4F090. トータル HCG-β ( インタクト HCG+ フリー HCG-β サブユニット ) トータル HCG-β ( インタクト HCG+ フリー HCG-β サブ
chorionic gonadotropin 連絡先 : 3483 基本情報 4F090 HCGβサブユニット (β-hcg) 分析物 JLAC10 診療報酬 識別 材料 023 血清 測定法 結果識別 第 2 章 特掲診療料 D008 第 3 部 検査 第 1 節 検体検査料 第 1 款 検体検査実施料 ( 生化学的検査 (Ⅱ) ) 18 ヒト絨毛性ゴナドトロピン -β サブユニット (HCG-β)
するものであり 分子標的治療薬の 標的 とする分子です 表 : 日本で承認されている分子標的治療薬 薬剤名 ( 商品の名称 ) 一般名 ( 国際的に用いられる名称 ) 分類 主な標的分子 対象となるがん イレッサ ゲフィニチブ 低分子 EGFR 非小細胞肺がん タルセバ エルロチニブ 低分子 EGF
分子標的治療 うじ部長氏 名古屋掖済会病院 病理診断科 ひら平 のぶ伸 こ子 近年 がんの薬物治療に 分子標的治療薬 を用いることが増えています この治療薬は 1990 年頃から使用されるようになりました 乳がんに使用されるハーセプチンや肺がんに使用されるイレッサなど 新聞や雑誌で報道されたので ご存知の方も多いと思います こういった 分子標的治療薬 の使用にあたっては 病理学的検査 ( 肺がんや乳がん
PowerPoint プレゼンテーション
酵素 : タンパク質の触媒 タンパク質 Protein 酵素 Enzyme 触媒 Catalyst 触媒 Cataylst: 特定の化学反応の反応速度を速める物質 自身は反応の前後で変化しない 酵素 Enzyme: タンパク質の触媒 触媒作用を持つタンパク質 第 3 回 : タンパク質はアミノ酸からなるポリペプチドである 第 4 回 : タンパク質は様々な立体構造を持つ 第 5 回 : タンパク質の立体構造と酵素活性の関係
解禁日時 :2019 年 2 月 4 日 ( 月 ) 午後 7 時 ( 日本時間 ) プレス通知資料 ( 研究成果 ) 報道関係各位 2019 年 2 月 1 日 国立大学法人東京医科歯科大学 国立研究開発法人日本医療研究開発機構 IL13Rα2 が血管新生を介して悪性黒色腫 ( メラノーマ ) を
解禁日時 :2019 年 2 月 4 日 ( 月 ) 午後 7 時 ( 日本時間 ) プレス通知資料 ( 研究成果 ) 報道関係各位 2019 年 2 月 1 日 国立大学法人東京医科歯科大学 国立研究開発法人日本医療研究開発機構 IL13Rα2 が血管新生を介して悪性黒色腫 ( メラノーマ ) を進展させるしくみを解明 難治がんである悪性黒色腫の新規分子標的治療法の開発に期待 ポイント 難治がんの一つである悪性黒色腫
Microsoft Word - FHA_13FD0159_Y.doc
1 要約 Pin1 inhibitor PiB prevents tumor progression by inactivating NF-κB in a HCC xenograft mouse model (HCC 皮下移植マウスモデルにおいて Pin1 インヒビターである PiB は NF-κB 活性を低下させることにより腫瘍進展を抑制する ) 千葉大学大学院医学薬学府先端医学薬学専攻 ( 主任
詳細 下記項目におきまして 所要日数を変更させていただきます 一部の項目では ご依頼曜日により所要日数が延長となりますが ご了承ください その他の検査内容に変更はありません β- トロンボグロブリン (β-tg) 2~6( 日 ) 2~4( 日 ) 血小板第 4 因子 (PF
216-27 変更 216 年 1 月 検査内容変更のお知らせ 謹啓時下ますますご清栄のこととお喜び申し上げます 平素は格別のご高配を賜り厚くお礼申し上げます このたび下記におきまして 検査内容を変更させていただきたくご案内いたします 何卒ご了承賜りますようよろしくお願い申し上げます 敬白 変更実施日 217 年 1 月 6 日 ( 金 ) ご依頼分より 変更項目 β- トロンボグロブリン (β-tg)
臨床No208-cs4作成_.indd
55 56 57 58 59 臨床核医学 問題14 甲状腺癌の131I 治療において誤ってい るのはどれか １つ選べ a １回の投与量は3,700 7,400 MBq が一般的 である b 前処置として甲状腺ホルモン薬 FT3 の投 与は４週間以上前より中止し FT4は２週 間前までに中止する c 放射性ヨード投与時には 血清 TSH 値が30 μiu/ml 以上であることが望ましい d 131 I
病理 細胞検査精度管理報告 一般社団法人福島県臨床検査技師会精度管理委員病理検査 細胞検査二瓶憲俊 山崎一樹水野誠 濱屋美樹子 はじめに 今年度も 例年通り 病理検査 細胞検査ともにフォトサーベイを出題し ました また アンケートは今後の業務の参考になれば幸いです 実施項目 病理検査サーベイフォトサ
平成 30 年度 福臨技臨床検査精度管理調査報告書 8.1 病理検査 2018.10 一般社団法人福島県臨床検査技師会 病理 細胞検査精度管理報告 一般社団法人福島県臨床検査技師会精度管理委員病理検査 細胞検査二瓶憲俊 山崎一樹水野誠 濱屋美樹子 はじめに 今年度も 例年通り 病理検査 細胞検査ともにフォトサーベイを出題し ました また アンケートは今後の業務の参考になれば幸いです 実施項目 病理検査サーベイフォトサーベイアンケート
2017 年 8 月 9 日放送 結核診療における QFT-3G と T-SPOT 日本赤十字社長崎原爆諫早病院副院長福島喜代康はじめに 2015 年の本邦の新登録結核患者は 18,820 人で 前年より 1,335 人減少しました 新登録結核患者数も人口 10 万対 14.4 と減少傾向にあります
2017 年 8 月 9 日放送 結核診療における QFT-3G と T-SPOT 日本赤十字社長崎原爆諫早病院副院長福島喜代康はじめに 2015 年の本邦の新登録結核患者は 18,820 人で 前年より 1,335 人減少しました 新登録結核患者数も人口 10 万対 14.4 と減少傾向にありますが 本邦の結核では高齢者結核が多いのが特徴です 結核診療における主な検査法を示します ( 図 1) 従来の細菌学的な抗酸菌の塗抹
-119-
-119- - 日中医学協会助成事業 - 前立腺がんの造骨性骨転移のメカニズム解明 研究者氏名中国所属機関日本研究機関指導責任者共同研究者 王麗楊中国医科大学大阪大学歯学研究科教授米田俊之相野誠 要旨 近年日本の男性において急増している前立腺がんは死亡率の第 2 位にランクされている 80% 以上の前立腺癌は造骨性の骨転移を示し 患者の QOL および生存期間を著しく低下させる 前立腺がん発生のメカニズムには未だ不明な点が多く
Microsoft PowerPoint - No7_Pap染色の基本原理.ppt
パパニコロウ染色の理論 精度管理時の質問 疑問事項を中心に 各種アルコール類の違い / 固定 脱 色素の溶解 アルカリ色出しの OG 染色への影響 リンタングステン酸の役割や効果 染色液使用開始後の注意点と染色液の継ぎ足し 他 千葉県臨床衛生検査技師会 第 3 回病理 細胞診検査研究班合同研修会 平成 22 年 1 月 30 日 渡辺明朗 蛋白質の三次構造 H3N + イオン結合 エタノール固定 /
報道発表資料 2006 年 4 月 13 日 独立行政法人理化学研究所 抗ウイルス免疫発動機構の解明 - 免疫 アレルギー制御のための新たな標的分子を発見 - ポイント 異物センサー TLR のシグナル伝達機構を解析 インターフェロン産生に必須な分子 IKK アルファ を発見 免疫 アレルギーの有効
60 秒でわかるプレスリリース 2006 年 4 月 13 日 独立行政法人理化学研究所 抗ウイルス免疫発動機構の解明 - 免疫 アレルギー制御のための新たな標的分子を発見 - がんやウイルスなど身体を蝕む病原体から身を守る物質として インターフェロン が注目されています このインターフェロンのことは ご存知の方も多いと思いますが 私たちが生まれながらに持っている免疫をつかさどる物質です 免疫細胞の情報の交換やウイルス感染に強い防御を示す役割を担っています
VENTANA PD-L1 SP142 Rabbit Monoclonal Antibody OptiView PD-L1 SP142
VENTANA PD-L1 SP142 Rabbit Monoclonal Antibody OptiView PD-L1 SP142 2 OptiView PD-L1 SP142 OptiView PD-L1 SP142 OptiView PD-L1 SP142 PD-L1 OptiView PD-L1 SP142 PD-L1 OptiView PD-L1 SP142 PD-L1 OptiView
本日の内容 HbA1c 測定方法別原理と特徴 HPLC 法 免疫法 酵素法 原理差による測定値の乖離要因
HbA1c 測定系について ~ 原理と特徴 ~ 一般社団法人日本臨床検査薬協会 技術運営委員会副委員長 安部正義 本日の内容 HbA1c 測定方法別原理と特徴 HPLC 法 免疫法 酵素法 原理差による測定値の乖離要因 HPLC 法 HPLC 法原理 高速液体クロマトグラフィー 混合物の分析法の一つ 固体または液体の固定相 ( 吸着剤 ) 中で 液体または気体の移動相 ( 展開剤 ) に試料を加えて移動させ
検体採取 患者の検査前準備 検体採取のタイミング 記号 添加物 ( キャップ色等 ) 採取材料 採取量 測定材料 P EDTA-2Na( 薄紫 ) 血液 7 ml RNA 検体ラベル ( 単項目オーダー時 ) ホンハ ンテスト 注 外 N60 氷 MINテイリョウ. 採取容器について 0
0868010 8. その他の検体検査 >> 8C. 遺伝子関連検査 >> minor bcr-abl, mrna quantitative 連絡先 : 3664 基本情報 8C127 minor bcr-abl 分析物 JLAC10 診療報酬 識別 9962 mrna 定量 材料 019 全血 ( 添加物入り ) 測定法 875 リアルタイムRT-PCR 法 結果識別 第 2 章 特掲診療料 D006-2
60 秒でわかるプレスリリース 2008 年 2 月 19 日 独立行政法人理化学研究所 抗ウイルス反応を増強する重要分子 PDC-TREM を発見 - 形質細胞様樹状細胞が Ⅰ 型インターフェロンの産生を増幅する仕組みが明らかに - インフルエンザの猛威が続いています このインフルエンザの元凶であるインフルエンザウイルスは 獲得した免疫力やウイルスに対するワクチンを見透かすよう変異し続けるため 人類はいまだ発病の恐怖から免れることができません
48 表1 主な術前末梢 ll検査値 GPT 311U AFP ALP l8 l IU CA19 9 15n9 nil 2n9 ml 2U m1 LDII 3361U CA125 Ou lni GOT 211U CEA RBC ALB 3 7g dl Ilb l2 09dl A G 1 42 Ht
48 表1 主な術前末梢 ll検査値 GPT 311U AFP ALP l8 l IU CA19 9 15n9 nil 2n9 ml 2U m1 LDII 3361U CA125 Ou lni GOT 211U CEA RBC ALB 3 7g dl Ilb l2 09dl A G 1 42 Ht 36 306 BUN 5mg dl MCV 932fl CRE O 4 m9 dl MCII 30 9P9
87 図1 A helnatoxylin 皮膚筋炎例 Case eosin HE 染色 I 18 例における免疫染色 B 抗72 kd HE染色 A で好塩基性の萎縮線維は抗72 kd HSP C 抗65 kd HSP B 抗65 kd HSP D 抗ユビキチソ 400 HSP C 抗ユビキチソ D すべてに陽性である 筋細胞膜下に染色性が強いが細胞質も染色されている 29 神経原性筋萎縮群5 18例
Microsoft Word - Dr.Horita.doc
移植腎病理に有用な免疫染色 東京女子医科大学腎臓病総合医療センター病理検査室堀田茂 移植腎病理診断には 固有腎や自己腎には出現しない移植腎特有な拒絶反応がある 実際には ドナーからの持ち込み病変 腎炎の再発 de novo 腎炎 薬剤性腎障害 ウイルス感染など 通常の腎生検診断と移植腎に特異的病変が混在した病態を解析することになる そのため 移植腎病理の診断や病態の解析には 免疫組織学的検討が必要不可欠である
検体採取 患者の検査前準備 検体採取のタイミング 記号 添加物 ( キャップ色等 ) 採取材料 採取量 測定材料 F 凝固促進剤 + 血清分離剤 ( 青 細 ) 血液 3 ml 血清 H 凝固促進剤 + 血清分離剤 ( ピンク ) 血液 6 ml 血清 I 凝固促進剤 + 血清分離剤 ( 茶色 )
6649 5. 免疫学的検査 >> 5G. 自己免疫関連検査 >> 5G176. 抗ミトコンドリアM2 抗体 anti mitochondria M2 antibody 連絡先 : 3764 基本情報 5G176 抗ミトコンドリアM2 抗体分析物 JLAC10 診療報酬 識別材料 023 血清 測定法 052 化学 生物発光イムノアッセイ (CLEIA) 結果識別 第 2 章 特掲診療料 D014
脳組織傷害時におけるミクログリア形態変化および機能 Title変化に関する培養脳組織切片を用いた研究 ( Abstract_ 要旨 ) Author(s) 岡村, 敏行 Citation Kyoto University ( 京都大学 ) Issue Date URL http
脳組織傷害時におけるミクログリア形態変化および機能 Title変化に関する培養脳組織切片を用いた研究 ( Abstract_ 要旨 ) Author(s) 岡村, 敏行 Citation Kyoto University ( 京都大学 ) Issue Date 2009-03-23 URL http://hdl.handle.net/2433/124054 Right Type Thesis or
く 細胞傷害活性の無い CD4 + ヘルパー T 細胞が必須と判明した 吉田らは 1988 年 C57BL/6 マウスが腹腔内に移植した BALB/c マウス由来の Meth A 腫瘍細胞 (CTL 耐性細胞株 ) を拒絶すること 1991 年 同種異系移植によって誘導されるマクロファージ (AIM
( 様式甲 5) 氏 名 山名秀典 ( ふりがな ) ( やまなひでのり ) 学 位 の 種 類 博士 ( 医学 ) 学位授与番号 甲 第 号 学位審査年月日 平成 26 年 7 月 30 日 学位授与の要件 学位規則第 4 条第 1 項該当 Down-regulated expression of 学位論文題名 monocyte/macrophage major histocompatibility
大腸ESD/EMRガイドライン 第56巻04号1598頁
ESD/EMR 1602 日本消化器内視鏡学会雑誌 Vol. 56 4, Apr. 2014 a b c d Figure 1 LST の病型亜分類 インジゴカルミン散布像で判定する a 顆粒均一型 homogeneous type LST-G Homo b 結節混在型 nodular mixed type LST-G Mix) c 平隆起型 flat-elevated type LST-NG
負荷試験 検体採取 患者の検査前準備 検体採取のタイミング 記号 添加物 ( キャップ色等 ) 採取材料 採取量 測定材料 F 凝固促進剤 + 血清分離剤 ( 青 細 ) 血液 3 ml 血清 H 凝固促進剤 + 血清分離剤 ( ピンク ) 血液 6 ml 血清 検体ラベル ( 単項目オーダー時 )
1081000 8. その他の検体検査 >> 8A. 負荷試験 機能検査 >> 負荷試験 parathyroid hormone intact 連絡先 : 3495 基本情報 4C025 PTH-I(PTH-INTACT) 分析物 JLAC10 診療報酬 識別材料 023 血清 測定法 052 化学 生物発光イムノアッセイ (CLEIA) 結果識別 第 2 章 特掲診療料 D287 内分泌負荷試験
コラーゲンを用いる細胞培養マニュアル
コラーゲンを用いる細胞培養マニュアル コラーゲン ゲル マトリックス培養法 (Collagen Gel Matrix Culture) の 実際とその応用例について 目次 Ⅰ. 細胞培養について 1 Ⅰ-1. はじめに Ⅰ-2. 細胞培養の基礎 Ⅰ-3. コラーゲンを用いる細胞培養 Ⅰ-4. 細胞の基質としてのコラーゲンの役割 Ⅱ. コラーゲンについて 5 Ⅱ-1. コラーゲンの分子構造と諸性質
日本内科学会雑誌第97巻第7号
図 1. 細胞膜の構造と, 表面抗原 非表面抗原の区分. 表 1. 診断上重要となる主な悪性リンパ腫関連マーカー ( 非細胞表面マーカーには * を付す ) 全般 CD45 CD34 TdT * CD30 ALK1 EMA bcl2 * cyclind1 * MIB1(Ki-67) * T 細胞関連 CD1a CD2 CD3 CD5 CD7 Tcelreceptor CD4 CD8 granzymeb
平成20年度沖縄県医師会臨床検査精度管理調査
第 4 回九州臨床検査技師会 病理検査精度管理調査結果報告書 はじめに今回で4 回目となる九州臨床検査技師会主催の病理 細胞検査精度管理調査ですが この精度管理の目的は 個人や団体の評価ではなく 九州地区の病理 細胞検査に従事する臨床検査技師の自己研鑽につながればという思いで事業を展開した 対象 ( 参加施設 ) および方法 1. 対象 ( 参加施設 ) 今回の参加施設は 九州全体で 140 施設の協力が得られた
1-4. 免疫抗体染色 抗体とは何かリンパ球 (B 細胞 ) が作る物質 特定の ( タンパク質 ) 分子に結合する 体の中に侵入してきた病原菌や毒素に結合して 破壊したり 無毒化したりする作用を持っている 例 : 抗血清馬などに蛇毒を注射し 蛇毒に対する抗体を作らせたもの マムシなどの毒蛇にかまれ
1. 血液細胞の免疫蛍光染色とフローサイトメトリー解析 1-1. フローサイトメトリー ( Flow Cytometory ) とは細胞浮遊液をフローセル内を高速で流し 個々の細胞の形質等についてレーザー光を用いて解析する研究手法 フローサイトメーター( Flow Cytometer ) フローサイトメトリーにおいて使用する細胞解析用の装置今回は BD Accuri C6 を使用する 1-2. フローサイトメーターで何ができるか?
PowerPoint プレゼンテーション
コンパニオン診断の現状 ~ 肺がんを例に ~ 2017 年 7 月 29 日 個別化医療に必要なコンパニオン診断薬 コンパニオン診断薬 ~ 肺癌治療を例に ~ NGS によるコンパニオン診断システム 個別化医療の概念 効果と安全性の両面で優れた治療法として世界的に関心が高まっており 特にがん治療などにおいて 今後の中心的役割を担うものと考えられています 薬剤投与前にバイオマーカーと呼ばれる特定の分子や遺伝子を診断し
血漿エクソソーム由来microRNAを用いたグリオブラストーマ診断バイオマーカーの探索 [全文の要約]
![血漿エクソソーム由来microRNAを用いたグリオブラストーマ診断バイオマーカーの探索 [全文の要約]](/thumbs/90/104293558.jpg "血漿エクソソーム由来microRNAを用いたグリオブラストーマ診断バイオマーカーの探索 [全文の要約]")
Title 血漿エクソソーム由来 microrna を用いたグリオブラストーマ診断バイオマーカーの探索 [ 全文の要約 ] Author(s) 山口, 響子 Issue Date 2017-03-23 Doc URL http://hdl.handle.net/2115/66158 Type theses (doctoral - abstract of entire text) Note この博士論文全文の閲覧方法については
プロトコル 細胞 増殖 / 毒性酸化ストレス分子生物学細胞内蛍光プローブ細胞染色ミトコンドリア関連試薬細菌研究用試薬膜タンパク質可溶化剤ラベル化剤二価性試薬イオン電極 その他 機能性有機材料 酵素 (POD,ALP) を標識したい 利用製品 < 少量抗体 (10μg) 標識用 > Ab-10 Rap
増殖 / 毒性酸化ストレス分子生物学内蛍光プローブ染色ミトコンドリア関連試薬細菌研究用試薬膜タンパク質可溶化剤ラベル化剤二価性試薬イオン電極 機能性有機材料 酵素 (PD,ALP) を標識したい 利用製品 < 少量抗体 (0μg) 標識用 > Ab-0 Rapid Peroxidase Labeling Kit < 抗体 タンパク質 (0-00μg) 標識用 > Peroxidase Labeling
抗体定量用アフィニティークロマトグラフィー
59 抗体定量用アフィニティークロマトグラフィーカラム TSKgel Protein A 5PW の開発 バイオサイエンス事業部開発部セパレーション G 藤井智荒木康祐 1. はじめに近年 バイオ医薬品市場の成長は著しく 特に免疫グロブリン G(IgG) を中心とした抗体医薬品については 212 年に 46 億ドルであった市場規模が 218 年には 772 億ドルまで拡大すると予測されている 1)
臨床検査の保険適用について ( 平成 23 年 10 月収載予定 ) 測定項目 参考点数 1 E2 ( 新方法 ) 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) D 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) 290 点 2 E2 ( 新方法 ) 結
臨床検査の保険適用について ( 平成 23 年 10 月収載予定 ) 測定項目 参考点数 1 E2 ( 新方法 ) 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) D014 18 抗好中球細胞質ミエロペルオキシダーゼ抗体 (MPO-ANCA) 290 点 2 E2 ( 新方法 ) 結核菌群核酸同定検査 D023 7 結核菌群核酸同定検査 410 点 3 E3 ( 新項目 ) レジオネラ核酸同定検査
MLPA 法 Q&A 集
MLPA 法 Q&A 集 目次 1. MLPA 法の導入 Q1. 導入にあたり 何が必要になりますか? Q2. 実験にはどのようなサンプルが必要でしょうか? Q3. サンプルDNAはどれくらい用意すれば良いですか? Q4. キャピラリーシーケンサが自施設に無い場合でも実験はできますか? Q5. FFPE 検体でも実験はできますか? 2. 実験のセットアップ Q1. 実験において重要なポイントはありますか?
Alcian blue染色 Elastica Van Gieson染色
Alcian blue 染色 平成 19 年度基礎講座 目的 Alcian blue 染色 生体に存在する酸性ムコ物質を検出する方法として広く用いられている 酸性ムコ物質はカルボキシル基を有するヒアルロン酸 硫酸基を有するコンドロイチン硫酸 ムコイチン硫酸 ケラト硫酸 ヘパリンなどの 2 つのグループに分類される Alcian blue 染色液の ph 値を調節することにより その 2 種類の酸性ムコ物質を染め分けることができる
( 様式甲 5) 学位論文内容の要旨 論文提出者氏名 論文審査担当者 主査 教授 森脇真一 井上善博 副査副査 教授教授 東 治 人 上 田 晃 一 副査 教授 朝日通雄 主論文題名 Transgene number-dependent, gene expression rate-independe
( 様式甲 5) 学位論文内容の要旨 論文提出者氏名 論文審査担当者 主査 森脇真一 井上善博 副査副査 東 治 人 上 田 晃 一 副査 朝日通雄 主論文題名 Transgene number-dependent, gene expression rate-independent rejection of D d -, K d -, or D d K d -transgened mouse skin
Mouse IgG EIA Kit
製品コード MK137 研究用 Mouse IgG EIA Kit 説明書 生体防御のひとつ 液性免疫の主役となる抗体 : 免疫グロブリン (Ig) は動物体内では 5 種類のクラス (IgG, IgA, IgM, IgE, IgD) が存在し 血液中で 80% を占めるのが IgG クラスです 血液中の IgG は 免疫応答によりその含有量は大きく変動しますが 一般的に 3 ~ 10 mg/ml
診療のガイドライン産科編２０１４（Ａ４）／ｆｕｊｇｓ２０１４‐１１４（大扉）
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! α!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
Taro-kv20025.jtd
猫ウイルス性鼻気管炎 猫カリシウイルス感染症 2 価 猫汎白血球減少症 猫白血病 ( 猫白血病ウイルス由来防御抗原たん白遺伝子導入カナリア痘ウイルス ) 猫クラミジア感染症混合ワクチン 平成 24 年 7 月 4 日 ( 告示第 1623 号 ) 新規追加 弱毒猫ウイルス性鼻気管炎ウイルス 弱毒猫汎白血球減少症ウイルス及び弱毒猫クラミドフィラ フェリスをそれぞれ培養細胞で増殖させて得たウイルス液と2
検査項目情報 クリオグロブリン Department of Clinical Laboratory, Kyoto University Hospital 一次サンプル採取マニュアル 免疫学的検査 >> 5A. 免疫グロブリン >> 5A160. クリオグロブリン Ver.4 cryo
6626 5. 免疫学的検査 >> 5A. 免疫グロブリン >> 5A160. Ver.4 cryoglobulin 連絡先 : 3764 基本情報 ( 標準コード (JLAC10) ) 基本情報 ( 診療報酬 ) 標準コード (JLAC10) 診療報酬 5A160 特掲診療料 >> 検査 >> 検体検査料 >> 検体検査実施料 >> ( 免疫学的検査 ) 分析物 D015 5 定性 42 点 識別材料測定法
モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の特性と
体腔液細胞診材料を用いたセルブロック法による免疫染色の有用性 公立昭和病院検査科濱川真治, 柏崎好美, 森一磨 病理診断科清水誠一郎 はじめに 画像診断や組織生検に先立って採取される体腔液細胞診の目的は, 悪性細胞の検出のみならず, 組織型推定や原発巣推定を担うようになってきた. その背景には, 化学療法に感受性の高い卵巣漿液性腺癌や神経内分泌癌など, あるいは癌抗体療法の研究が盛んに行われている乳癌や肺癌,
馬ロタウイルス感染症 ( アジュバント加 ) 不活化ワクチン ( シード ) 平成 24 年 7 月 4 日 ( 告示第 1622 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した馬ロタウイルス (A 群 G3 型 ) を同規格に適合した株化細胞で増殖させて得たウイルス液を不活化し アジュバント
馬ロタウイルス感染症 ( アジュバント加 ) 不活化ワクチン ( シード ) 平成 24 年 7 月 4 日 ( 告示第 1622 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した馬ロタウイルス (A 群 G3 型 ) を同規格に適合した株化細胞で増殖させて得たウイルス液を不活化し アジュバントを添加したワクチンである 2 製法 2.1 製造用株 2.1.1 名称馬ロタウイルス Ho-5MA 株又はこれと同等と認められた株
PowerPoint プレゼンテーション
症例 1: Intraductal papilloma 乳頭状集塊の出現や 背景の泡沫状マクロファージの出現から 嚢胞内乳頭状病変が示唆される 細胞集塊は全体的に結合性が強く 乳頭状集塊の中心には比較的太い線維性結合織が認められ 集塊内とくに腺上皮と線維性結合織の間には筋上皮の介在が窺われる LBC 検体を用いた免疫染色では シート状集塊において高分子量サイトケラチン (CK5/6) のモザイク状陽性所見が認められ
2.2 グルタルアルデヒドグルタルアルデヒドは種々のアミノ酸と反応し, 速やかにタンパク質を架橋するが ( 図 1;lane 4), その架橋反応のメカニズムに関しては十分には解明されていない. グルタルアルデヒドの水溶液はカルボニル基に基づく紫外吸収の極大を 280 nm に示すが, 共役した二重
免疫組織化学を考える : 抗原の賦活化 樹脂包埋試料の免疫電顕 Immunoelectron Microscopy with the Post-Embedding Method Based on Heat-Induced Antigen Retrieval: Techniques and Mechanisms 山下修二 Shuji Yamashita 慶應義塾大学医学部病理学教室 要旨近年ではホルムアルデヒド固定によって形成された架橋を加熱によって切断し,
スライド 1
1. 血液の中に存在する脂質 脂質異常症で重要となる物質トリグリセリド ( 中性脂肪 :TG) 動脈硬化に深く関与する 脂質の種類 トリグリセリド :TG ( 中性脂肪 ) リン脂質 遊離脂肪酸 特徴 細胞の構成成分 ホルモンやビタミン 胆汁酸の原料 動脈硬化の原因となる 体や心臓を動かすエネルギーとして利用 皮下脂肪として貯蔵 動脈硬化の原因となる 細胞膜の構成成分 トリグリセリド ( 中性脂肪
抑制することが知られている 今回はヒト子宮内膜におけるコレステロール硫酸のプロテ アーゼ活性に対する効果を検討することとした コレステロール硫酸の着床期特異的な発現の機序を解明するために 合成酵素であるコ レステロール硫酸基転移酵素 (SULT2B1b) に着目した ヒト子宮内膜は排卵後 脱落膜 化
論文の内容の要旨 論文題目 着床期ヒト子宮内膜におけるコレステロール硫酸の発現調節機序及び機能の解析 指導教員武谷雄二教授 東京大学大学院医学系研究科 平成 15 年 4 月入学 医学博士課程 生殖 発達 加齢医学専攻 清末美奈子 緒言 着床とは 受精卵が分割し形成された胚盤胞が子宮内膜上皮へ接着 貫通し 子 宮内膜間質を浸潤して絨毛構造を形成するまでの一連の現象をいう 胚盤胞から分化した トロフォブラストが浸潤していく過程で
遺伝子検査の基礎知識
リアルタイム PCR( インターカレーター法 ) 実験ガイドこの文書では インターカレーター法 (TB Green 検出 ) によるリアルタイム PCR について 蛍光検出の原理や実験操作の流れなどを解説します 実際の実験操作の詳細については 各製品の取扱説明書をご参照ください - 目次 - 1 蛍光検出の原理 2 実験に必要なもの 3 実験操作法 4 結果の解析 1 1 蛍光検出の原理 インターカレーターによる蛍光検出の原理
4. 加熱食肉製品 ( 乾燥食肉製品 非加熱食肉製品及び特定加熱食肉製品以外の食肉製品をいう 以下同じ ) のうち 容器包装に入れた後加熱殺菌したものは 次の規格に適合するものでなければならない a 大腸菌群陰性でなければならない b クロストリジウム属菌が 検体 1gにつき 1,000 以下でなけ
食肉製品 1 食肉製品の成分規格 (1) 一般規格 食肉製品は その 1kg につき 0.070g を超える量の亜硝酸根を含有するものであって はならない (2) 個別規格 1. 乾燥食肉製品 ( 乾燥させた食肉製品であって 乾燥食肉製品として販売するものを いう 以下同じ ) は 次の規格に適合するものでなければならない a E.coli( 大腸菌群のうち 44.5 で 24 時間培養したときに
前立腺癌は男性特有の癌で 米国においては癌死亡者数の第 2 位 ( 約 20%) を占めてい ます 日本でも前立腺癌の罹患率 死亡者数は急激に上昇しており 現在は重篤な男性悪性腫瘍疾患の1つとなって図 1 います 図 1 初期段階の前立腺癌は男性ホルモン ( アンドロゲン ) に反応し増殖します そ
再発した前立腺癌の増殖を制御する新たな分子メカニズムの発見乳癌治療薬が効果的 発表者筑波大学先端領域学際研究センター教授柳澤純 (junny@agbi.tsukuba.ac.jp TEL: 029-853-7320) ポイント 女性ホルモンが制御する新たな前立腺癌の増殖 細胞死メカニズムを発見 女性ホルモン及び女性ホルモン抑制剤は ERβ 及び KLF5 を通じ FOXO1 の発現量を変化することで前立腺癌の増殖