QuantiGene ViewRNA.indd

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1 in situ mrna 検出試薬 ViewRNA TM 最大 4 色高感度多重染色 in situ Hybridization 法のスタンダード 製品概要 Affymetrix/Panomics 社の ViewRNA TM は 従来の方法とは全く異なる 新しいin situ Hybridization(ISH) 法です 独自のプローブ設計技術と branched DNA(bDNA) によるシグナル増幅法により 1 個の細胞内において複数の発現遺伝子 (1 4 種類 ) を 1 コピーから同時に検出できます また 非常に短いプローブを用いてハイブリ効率や膜透過性を高めることで 従来の技術では難しかった mrna も短時間で検出できます ViewRNA TM の技術は バイオマーカーのスクリーニング RNAi の活性評価 病理研究など幅広い研究分野に応用されています 弊社では 定期的に ViewRNA TM ISH Tissue Assay のハンズオンワークショップを開催しています 研究室に導入されたいなどご興味のある方は 弊社へお問い合わせください 特長 MultiColor ViewRNA (Alexa 488, 546, 647, 750) CTC 用プラットフォーム 1 コピーの mrna を 1 ドットで表示 複数の mrna を同時検出 ノイズが低く 高感度 簡便かつ自動化に適した実験方法 スライドガラス プレートに対応 顕微鏡 イメージアナライザーによる検出組織切片でも 2 遺伝子同時検出 3 時間でターゲットプローブのハイブリが終了 カスタムプローブも短時間で設計 ( 最短 2 週間でお届け ) mirna も検出 実験の流れ Step1 : サンプル前処理 Step2 : プローブのハイブリ Step3 : シグナルの増幅 Step4 : 検出 サンプルをカバーグラスや plate 上に固定し 膜透過処理などの前処理を行う 目的の mrna に特異的なプローブをハイブリダイゼーションさせる 1 種類の mrna に対して 10 種類以上のプローブを使用する Pre-Amplifier(PreAMP) Amplifier(AMP) Label Probe の順に ハイブリダイゼーションを行い シグナルを増幅させ 蛍光 ( 細胞 ) または FastRed 色素 ( 組織 ) で検出する 顕微鏡や自動蛍光イメージアナライザーなどによりシグナルを検出する

2 ViewRNA により 1 コピーのターゲットを検出 Her-2 と IL-8 のゲノム DNA に特異的にハイブリする ViewRNA のターゲットプローブを設計し Genomic Her-2 と IL-8 の検出を行ったところ HeLa 細胞では 各 2つの蛍光ドットが検出されました ( 右図 ) 一方 乳ガンの SKBR3 細胞ではゲノム上の Her-2 が異常に増えていることがわかります つまり ViewRNA では 1 コピーのターゲットを1つのドットとして検出が可能です 特異性の高いプローブ設計法と Branched DNA によるシグナル増感 ViewRNA では 特徴的なプローブ ( 右図 Z の部分 ) によりその特異性が高められています 2 種類の Z プローブがセットで隣り合ってターゲットの mrna にハイブリし さらにその上に 検出のための branched DNA(bDNA 木のような部分 ) が組み上がり 標識されます 1 つの Z プローブが 異なる mrna に非特異的にハイブリしても この bdna が組み上がらないので シグナルは検出されません Target Probe と bdna の構造 ターゲットプローブの高い特異性と bdna の正確な定量性 Branched DNA を構成している 枝の部分のプローブ AMP の本数により どの程度の蛍光強度に違いが見られるかの評価を行いました ( 右図 a, b) 16 本と 1 本では 蛍光強度の減少が見られ bdna の数と蛍光強度の間に相関関係が存在します しかし 一組のターゲットで "Z" プローブの右側または 左側のみをハイブリさせた場合 ( 右図 c,d) 両者ともシグナルが検出されません よって 一組のターゲットプローブが同時にハイブリした時のみシグナルが検出されます 細胞内の mrna を蛍光ドットにて定量検出 HeLa 細胞 SKBR3 細胞 HeLa 細胞とSKBR3 細胞中のHer-2 遺伝子の発現を ViewRNA により検出しました Her-2 の発現が低い HeLa 細胞では緑の蛍光ドットが少なく 発現の高い SKBR3 細胞ではより多くの蛍光ドットが検出されます また Her-2 のイントロン配列にハイブリするプローブでは シグナルが検出されず ターゲットプローブが特異的に Genomic の Her-2 DNA ではなく mrna の Her-2 を検出していることが分かります 下図は この蛍光ドットの数により 発現量をグラフ化したものです Her-2c / 18S / DAPI Her-2 / 18S / DAPI HeLa 細胞 ( 左上 ) と SKBR3 細胞 ( 右上 ) について Her-2 mrna( 緑 ) 18S rrna( 赤 ) の発現を QuantiGene ViewRNA により検出し 蛍光顕微鏡により観察を行った Her-2 のイントロン配列に対するアンチセンスプローブ (Her-2C) を negative control として用いた ( 下図 ) 2

3 ViewRNA による遺伝子定量解析 0 hr 1 hr 2 hr 4 hr ViewRNA HC Screening Assay Kit を 使 用 し て 染 色 後 Imaging system を使用し 定量解析を行いました ViewRNA による薬剤濃度感受性評価 薬剤による遺伝子発現誘導の濃度感受性を ViewRNA により評価をしたところ PMA の 濃度依存的に IL-8( 緑 ) の発現が誘導されま した その蛍光強度から濃度との相関関係の 評価を行った結果 濃度依存性が見られまし た ViewRNA により様々な薬剤による遺伝 子発現評価を行うことが可能であることを示 しています ViewRNA による sirna 評価実験 sirna のサイレンシング効果の評価を ViewRNA に より行ったところ 処理した sirna の濃度依存的に ターゲット遺伝子 ( 緑 ) の発現減少が見られました ViewRNA により評価を行うことで 細胞個々への影 響を評価でき より正確な sirna の評価を行うことが 可能です ViewRNA によるハイスループット遺伝子定量解析 ViewRNA は その自動化に十分対応可能な簡便操作と 384well にも対応可能なことから遺伝子発現に基づいたハ イスループットなスクリーニングへ応用が可能です これ までは 数字だけの情報しか得られなかったのに対して ViewRNA では画像情報もあり より多くの情報を得るこ とが可能です また 最大 4 遺伝子まで同時に検出でき ることから 複数遺伝子を対象にしたスクリーニングまで 行うことが可能です 3

4 細胞内の mirna も蛍光でドットにて定量検出 ViewRNA mirna ISH Cell Assay は 培養細胞中に発現する mirna を1コピーから検出することが可能になりました HeLa 細胞に存在する発現量が異なる mirna 量を比較したところ ネガティブコントロールである DapB は Fast Red による赤色シグナルは検出されず 発現が高い Let-7a は非常に高く検出されます 表は赤色の蛍光強度をグラフ化したもので mirna の発現量と相関していることが分かります ViewRNA ISH Tissue Assay による組織染色 ViewRNA ISH Tissue Assay では FFPE や凍結切片上の 2 遺伝子の発現を同時検出することが可能になりました 従来の Fast Red に加えて Fast Blue による多重染色のため 蛍光 明視野いずれでも検鏡観察ができます また 複数組織の FFPE が同一スライド上にスポッティングされた Tissue Microarray も ViewRNA ISH Tissue Assay を使えば非常に微量な mrna コピーも検出するため 1 枚のスライドで多くの情報が得られます ヒト皮膚 FFPE 上での KrtPan および Actb 遺伝子発現を 同一標本を用いて蛍光および明視野で観察 ( 左 : 蛍光 右 : 明視野 ) Red: KrtPan Green/Dark Blue: Actb Blue: 核染色 Red: KrtPan Dark Blue: ハウスキーピング遺伝子 Blue: 核染色 ViewRNA ISH Tissue Assay による Tissue Micro Array 拡大写真は非小細胞肺癌の FFPE 4

5 ViewRNA ISH Tissue Assay による組織染色例 FFPE や凍結切片上の 2 遺伝子の発現を同時検出することが可能です Fast Red Fast Blue による多重染色のため 蛍光 明視野いずれでも検鏡観察ができます 下記は マウス腎臓 FFPE 上の Aquaporin 2 及び Aquaporin 1 遺伝子発現を 蛍光及び明視野で観察 明視野画像 Aquaporin 2( 赤 ), Aquaporin 1( 濃い青 ) 蛍光画像 Aquaporin 2( 緑 ), Aquaporin 1( 赤 ) サンプル提供 株式会社徳島分子病理研究所 株式会社アワジェニック 画像撮影 オリンパス株式会社製 顕微鏡用デジタルカメラ DP80 ViewRNA ワークショップのご案内 - 簡単にできる組織切片での in situ Hybridization 法 弊社では 定期的に ViewRNA ISH Tissue Assay のハンズオンワークショップを開催し 毎回多くのお客様に好評頂いて おります ご自分の研究室で in situ Hybridization の実験系を立ち上げたい方 in situ Hybridization の実験が上手くいっ ていない方 あるいは免疫組織染色を行っているが良い抗体が無くてお困りの方は 是非ともこの機会に新たなコンセプト を用いた ViewRNA の 簡便な操作方法 高い特異性 高い感度 を体験下さい ViewRNA ワークショップに興味をお持ちの方は 弊社ウェブサイト をご覧になるか 弊社技術営業部 [email protected] にお問い合わせ下さい 5

6 ViewRNA TM HC Screening ハイスループット遺伝子発現解析ツール ViewRNA HC Screening は 96 ウェルプレートや 384 ウェルプレートに固定した細胞中の mrna を蛍光検出するための試薬で 遺伝子の発現スクリーニングを行うのに最適なツールです qpcr などとの相関性はもちろん sirna の評価やレポーターアッセイの代替法として活用することができます 画像情報に基づいたデータ解析になるので 細胞個々の遺伝子発現が得られ よりリアルな遺伝子発現を反映することができます < ViewRNA HC Screening の蛍光色素とその感度 > Fluorophere Peak Ex/Em (nm) Compatible Filter Set プローブの種類 感度 /523 Alexa 488 Type 4 1 copy/cell /576 Alexa 546 Type 1 1 copy/cell /669 Alexa 647 Type 6 1 copy/cell /764 Alexa 750 Type 10 1 copy/cell DAPI 358/461 DAPI 核染色 ViewRNA HC Screening Assay Kit ViewRNA HC Screening の実験で必須な試薬です Wash Buffer やサンプル前処理に必要な試薬が含まれております ターゲットの遺伝子やラベルの色に依存することなく Assay に共通してお使い頂くことができます 別途 蛍光用の Signal Amplification kit とターゲットプローブを購入下さい QVP0011 QG ViewRNA HC Screening Assay Kit 20 x 96-well plates 363,000 QVP0012 QG ViewRNA HC Screening Assay Kit 100 x 96-well plates 1,446,000 QVP0013 QG ViewRNA HC Screening Assay Kit 200 x 96-well plates 2,167,000 6

7 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit ViewRNA の実験で蛍光染色する場合に必須な試薬で シグナルを検出するための蛍光色素や bdna プローブが含まれております 染色する遺伝子の数によってご注文頂くキットが異なります 使用するプローブの Type と蛍光色素をご指定下さい Probe Type 使用可能な蛍光色素 Type 1 Alexa 546 Type 4 Alexa 488 Type 6 Alexa 647 Type 10 Alexa 750 QVP0201 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 1 set 20 x 96-well plates 504,000 QVP0202 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 1 set 100 x 96-well plates 1,998,000 QVP0203 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 1 set 200 x 96-well plates 2,994,000 QVP0209 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 2-plex 20 x 96-well plates 904,000 QVP0210 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 2-plex 100 x 96-well plates 3,592,000 QVP0211 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 2-plex 200 x 96-well plates 5,385,000 QVP0213 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 3-plex 20 x 96-well plates 1,232,000 QVP0214 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 3-plex 100 x 96-well plates 4,907,000 QVP0215 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 3-plex 200 x 96-well plates 7,357,000 QVP0217 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 4-plex 20 x 96-well plates 1,432,000 QVP0218 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 4-plex 100 x 96-well plates 5,708,000 QVP0219 ViewRNA HC Screening Signal Amplification Kit, 4-plex 200 x 96-well plates 8,559,000 ViewRNA Target Probe Set 目的の mrna に特異的にハイブリするプローブです Probe Type と目的遺伝子名をご指定下さい 新規デザインのプローブについても デザイン料は発生致しませんが 440uL 梱包からの購入になります 新規デザインが必要か否かについては 弊社までお問い合わせ下さい 新規デザイン ( カスタム ) プローブも最短 2 週間でお届けします VX ViewRNA TYPE 1 Probe Set By Request 440 μ L (6 96-well plates) 73,000 VX ViewRNA TYPE 1 Probe Set By Request 1.44 ml (20 96-well plates) 188,000 VX ViewRNA TYPE 1 Probe Set By Request 7.2 ml ( well plates) 734,000 VX ViewRNA TYPE 1 Probe Set By Request 14.4 ml ( well plates) 1,099,000 VX ViewRNA TYPE 4 Probe Set By Request 440 μ L (6 96-well plates) 73,000 VX ViewRNA TYPE 4 Probe Set By Request 1.44 ml (20 96-well plates) 188,000 VX ViewRNA TYPE 4 Probe Set By Request 7.2 ml ( well plates) 734,000 VX ViewRNA TYPE 4 Probe Set By Request 14.4 ml ( well plates) 1,099,000 VX ViewRNA TYPE 6 Probe Set By Request 440 μ L (6 96-well plates) 73,000 VX ViewRNA TYPE 6 Probe Set By Request 1.44 ml (20 96-well plates) 188,000 VX ViewRNA TYPE 6 Probe Set By Request 7.2 ml ( well plates) 734,000 VX ViewRNA TYPE 6 Probe Set By Request 14.4 ml ( well plates) 1,099,000 VX ViewRNA TYPE 8 Probe Set By Request 440 μ L (6 96-well plates) 73,000 VX ViewRNA TYPE 8 Probe Set By Request 1.44 ml (20 96-well plates) 188,000 VX ViewRNA TYPE 8 Probe Set By Request 7.2 ml ( well plates) 734,000 VX ViewRNA TYPE 8 Probe Set By Request 14.4 ml ( well plates) 1,099,000 VX ViewRNA TYPE 10 Probe Set By Request 440 μ L (6 96-well plates) 73,000 VX ViewRNA TYPE 10 Probe Set By Request 1.44 ml (20 96-well plates) 188,000 VX ViewRNA TYPE 10 Probe Set By Request 7.2 ml ( well plates) 734,000 VX ViewRNA TYPE 10 Probe Set By Request 14.4 ml ( well plates) 1,099,000 7

8 ViewRNA HC Screening 各種消耗品及びキットの個別製品 ViewRNA HC Screening の実験で使用する Buffer などの個別販売品です いずれも ViewRNA HC Screening Assay kit に含まれる試薬です QVP0501 ViewRNA Wash Buffer Components sufficient for 5.8 L 48,000 QVP0502 ViewRNA Wash Buffer Components sufficient for 28.4 L 183,000 QVP0503 ViewRNA Wash Buffer Components sufficient for 56.8 L 273,000 QVP0505 Detergent Solution 70 ml 47,000 QVP0506 Detergent Solution 348 ml 180,000 QVP0507 Detergent Solution 696 ml 268,000 QVP0509 Protease Stop Buffer 140 ml 47,000 QVP0510 Protease Stop Buffer 696 ml 180,000 QVP0511 Protease Stop Buffer 2 x 696 ml 268,000 QVP0513 Stoarge Buffer 70 ml 47,000 QVP0514 Stoarge Buffer 348 ml 180,000 QVP0515 Stoarge Buffer 696 ml 268,000 QVP0517 Pre-Hybridization Buffer (PreHyb Buffer) 208 ml 47,000 QVP0518 Pre-Hybridization Buffer (PreHyb Buffer) 1.04 L 180,000 QVP0519 Pre-Hybridization Buffer (PreHyb Buffer) 2 x 1.04 L 268,000 QVP0521 Protease 70 μ L 69,000 QVP0522 Protease 348 μ L 268,000 QVP0523 Protease 696 μ L 401,000 QVP0525 Hybridization Buffer A (Hyb A) 70 ml 47,000 QVP0526 Hybridization Buffer A (Hyb A) 348 ml 180,000 QVP0527 Hybridization Buffer A (Hyb A) 696 ml 268,000 QVP0529 Hybridization Buffer B (Hyb B) 140 ml 103,000 QVP0530 Hybridization Buffer B (Hyb B) 696 ml 402,000 QVP0531 Hybridization Buffer B (Hyb B) 2 x 696 ml 602,000 QVP0533 Hybridization Buffer C (Hyb C) 70 ml 47,000 QVP0534 Hybridization Buffer C (Hyb C) 348 ml 180,000 QVP0535 Hybridization Buffer C (Hyb C) 696 ml 268,000 8

9 ViewRNA TM ISH Cell Assay 培養細胞用検出試薬 ViewRNA ISH Cell Assay は 組織学や病理学分野などへ広く利用可能な RNA FISH キットです ViewRNA HC Screening Assay キットと同様 4 種類の蛍光色素により最大 4 遺伝子を 1 コピーから同時検出します 24 ウェルプレートで培養した細胞や チャンバースライドに接着した細胞の染色に使用しやすいパッケージで バイオマーカーの探索研究や病理研究にも手頃な価格でご利用できます 製品特長 1 コピーの mrna を 1 ドットで表示 最大 4 種類の mrna を同時染色 チャンバースライド 24 ウェルプレートなどに対応 プローブ 蛍光ラベルの種類 Type 1 : Alexa 546 Type 4 : Alexa 488 Type 6 : Alexa 647 Type 10 : Alexa 750 ViewRNA ISH Cell Assay Kit 24 ウェルやチャンバースライドの接着させた細胞を染色するための試薬です Type1, 4, 6 のターゲットプローブと一緒に使用することで 3 種類の蛍光色で染色をすることが可能です 商品コード商品名梱包単位希望小売価格 QVC0001 ViewRNA ISH Cell Assay kit 1 kit 234,000 ViewRNA ISH Cell 740 Module Type10 のターゲットプローブを Alexa 750 で蛍光ラベルするための試薬です ISH Cell Assay kit と一緒に使用することで 4 種類の蛍光色で染色することが可能になります QVC0200 ViewRNA ISH Cell 740 Module 1 kit 73,000 ViewRNA Probe Set 検出したい遺伝子を特異的に検出するためのプローブです プローブタイプにより蛍光色が異なりますので 目的の蛍光色にあわせてプローブタイプをお選び下さい 新規デザイン ( カスタム ) プローブも最短 2 週間でお届けします V#1-#####-06 ViewRNA TYPE 1 Catalog Probe Set ( 遺伝子名 ) 120 μ L \30,000 VX ViewRNA TYPE 1 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 V#4-#####-06 ViewRNA TYPE 4 Catalog Probe Set ( 遺伝子名 ) 120 μ L \30,000 VX ViewRNA TYPE 4 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 V#6-#####-06 ViewRNA TYPE 6 Catalog Probe Set ( 遺伝子名 ) 120 μ L \30,000 VX ViewRNA TYPE 6 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 V#10-#####-06 ViewRNA TYPE 10 Catalog Probe Set ( 遺伝子名 ) 120 μ L \30,000 VX ViewRNA TYPE 10 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 9

10 ViewRNA ISH Cell Assay 各種消耗品及びキット個別製品 ViewRNA ISH Cell Assay 用の試薬と器具です ViewRNA ISH Cells Accessory Kit は QVC0500 から QVC0507 の 7 点がまとまったスターターキットです QVC0700 ViewRNA ISH Cell Accessory Kit 1 kit 141,000 QVC0500 Hydrophobic Barrier Pen 1 each 39,000 QVC0501 Forceps 1 each 9,000 QVC0502 Tissue-Tek Staining Dish (Clear) 1 each 24,000 QVC0503 Tissue-Tek slide rack 1 each 36,000 QVC0504 Tissue culture 24-well plate 1 each 5,000 QVC0505 Microscope slides 12 枚 20,000 QVC0506 Rectangular cover glass 15 枚 18,000 QVC0507 Cover slips 50 枚 20,000 QVC X PBS 42 ml 14,000 QVC0509 Detergent Solution QC 11 ml 14,000 QVC chamber dish 10 枚 28,000 QVC0511 Protease QS 22 µl \12,000 QVC0512 Probe Set Diluent QF 12 ml 20,000 QVC0513 Amplifier diluent QF 24 ml 34,000 QVC0514 Label Probe Diluent QF 12 ml 20,000 QVC X DAPI 105 µl 10,000 ViewRNA TM mirna ISH Cell Assay 培養細胞用 mirna 検出試薬 マイクロ RNA(miRNA) は細胞に局在する ヌクレオチドから成るノンコーディング RNA(ncRNA) の一種で 遺伝子の発現制御に重要な役割を果たすと考えられています さらに最近では mirna の異常発現と癌化や神経疾患の関連性についても注目されています しかし 従来のin situ Hybridization では検出感度や特異性に問題がありました ViewRNA mirna ISH Cell Assay は 24 ウェルプレートまたは 96 ウェルプレートで培養した細胞に対して染色し蛍光顕微鏡で観察するin situ Hybridization アッセイで mirna および mrna を 1 コピーから同時検出します 特長 1 コピーの mirna/mrna を 1 ドットで表示 1 種類の mirna と最大 2 種類の mrna を同時染色 24 ウェルプレート * または 96 ウェルプレートに対応 * カバースリップを入れた 24 ウェルプレートを使用 プローブ 蛍光ラベルの種類 Type 1 :Fast Red(miRNA) Type 4 :Alexa 488(mRNA) Type 10 :Alexa 750*(mRNA) * ViewRNA ISH Cell 740 Module ( 商品コード :QVC0200) もご用意下さい 10

11 ViewRNA mirna ISH Cell Assay Kit 24 ウェルプレートまたは 96 ウェルプレートで培養した細胞を染色するための試薬です Type 1 Type 4 のターゲットプローブと一緒に使用することで mirna および mrna を各 1 種類染色することが可能です 1 キットあたり 24 ウェルプレートの場合は 24 ウェル分 96 ウェルプレートの場合は 144 ウェル分のアッセイができます 細胞の固定液や架橋剤は含まれておりませんので別途ご用意下さい 24 assays / QVCM0001 ViewRNA mirna ISH Cell Assay Kit 144 assays 302,000 ViewRNA mirna ISH Cell 740 Module Type 10 のターゲットプローブを Alexa 750 で蛍光ラベルするための試薬です ViewRNA mirna ISH Cell Assay Kit と一緒に使用することで 1 種類の mirna と 2 種類の mrna を同時染色することが可能になります QVC0200 ViewRNA ISH Cell 740 Module 1 kit 73,000 ViewRNA Probe Set 検出したい遺伝子を特異的に検出するためのプローブです mirna には Type 1 を mrna には Type 4 または Type 10 をお選び下さい 新規デザイン ( カスタム ) プローブでも最短 2 週間でお届けします mirna VM1-#####-06 ViewRNA mirna TYPE 1 Probe Set(miRNA 名 ) 120 µl \30,000 VM ViewRNA mirna TYPE 1 Probe Set, By Request 440 µl 73,000 mrna V#4-#####-06 ViewRNA TYPE 4 Catalog Probe Set( 遺伝子名 ) 120 μ L \30,000 VX ViewRNA TYPE 4 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 V#10-#####-06 ViewRNA TYPE 10 Catalog Probe Set( 遺伝子名 ) 120 μ L \30,000 VX ViewRNA TYPE 10 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 ViewRNA mirna ISH Cell Assay 各種消耗品及びキット個別製品 QVCM0500 View mirna ISH Cell Wash Buffer Components assays/ 144 assays 37,000 QVCM0501 View mirna ISH Cell Cross-Linking Buffer QM 40 ml 23,000 11

12 ViewRNA TM CTC Platform CTC のための遺伝子発現検出プラットフォーム CTC(circulating tumor cell : 循環腫瘍細胞 ) は血中内に循環するがん細胞で 進行したがん細胞が血液やリンパの流れに乗って循環し離れた臓器へ転移を起こします CTC の細胞数は転移性がん患者の全血 1 ml あたり 1-10 cells/ml 程度と非常に少なく また CTC 分析機は非常に高価なことから 簡便かつ高感度に CTC を検出する方法が検討されてきました ViewRNA CTC Platform は ヒト全血中の CTC から in situ Hybridization により 1 コピー以上の mrna を検出可能なプラットフォームです 全血から ScreenCell により短時間で赤血球 血小板および血漿を除去した細胞に対し ViewRNA ISH Cell Assay Kit を用いて最大 4 遺伝子を同時検出します ScreenCell キットの種類により 分離した CTC を培養可能な ViewRNA CTC-CC Kit と 分離直後に CTC を固定する ViewRNA CTC-Cyto Kit の 2 種類から選択頂けます ScreenCell は ScreenCell 社の登録商標です 特長 フィルターに通すだけの簡便な CTC 分離 EpCAM 非発現の CTC も検出 CTC の種類を問わず全てのがん細胞で共通のプロトコール 1 コピーの mrna を 1 ドットで検出 最大 4 種類の mrna を同時検出 ViewRNA CTC Platform 実験の流れ ScreenCell 12

13 ViewRNA CTC Isolation kit の分離例 ViewRNA CTC Fixed Cell Isolation kit による高回収率な CTC の回収 ViewRNA CTC Fixed Cell Isolation kit (QVC0551) を使用した正常血液への H2030 細胞のスパイク試験の結果です * 結果は 25 回の実験の平均です 血液 1 ml にスパイクした平均回収率 H2030 細胞数 5 約 4 個以上 (91.2%) 2 約 1 個以上 (74%) Filtration buffer にスパイクした平均回収率 H2030 細胞数 5 約 4 個以上 (88%) 2 約 1 個以上 (82%) ViewRNA CTC-CC Kit 全血 6 ml から生きた CTC を分離後に in situ Hybridization を行うキットです ScreenCell CC Kit で分離した CTC は 24 ウェルで培養可能で 培養後に細胞を固定し ViewRNA ISH Cell Assay Kit で CTC に発現する遺伝子を染色します ViewRNA CTC-CC Kit( 商品コード :QVC0050) は ScreenCell CC Kit および ViewRNA ISH Cell Assay Kit(24 assay) のセット製品で ViewRNA CTC Live Cell Isolation Kit( 商品コード :QVC0550) は ScreenCell CC Kit の単品売りです QVC0050 ViewRNA CTC-CC kit 24 assay/12 filters 832,000 QVC0550 ViewRNA CTC Live Cell Isolation kit 3 filters 152,000 ViewRNA CTC-Cyto Kit 全血 3 ml から CTC を分離後すぐに固定し in situ Hybridization により CTC に発現する遺伝子を検出します ScreenCell Cyto Kit で分離した CTC をすぐに固定し ViewRNA ISH Cell Assay Kit で CTC に発現する遺伝子を染色します ViewRNA CTC-Cyto Kit( 商品コード :QVC0051) は ScreenCell Cyto Kit および ViewRNA ISH Cell Assay Kit(24 assay) のセット製品で ViewRNA CTC Fixed Cell Isolation Kit( 商品コード :QVC0551) は ScreenCell Cyto Kit の単品売りです QVC0051 ViewRNA CTC-Cyto kit 24 assay/12 filters 653,000 QVC0551 ViewRNA CTC Fixed Cell Isolation kit 4 filters 142,000 * ViewRNA CTC-CC kit (QVC0050) 及び, ViewRNA CTC-Cyto kit(qvc0051) にはそれぞれ別に検出用のプローブが必要です 検出用のプローブはページ 9 ViewRNA Probe Set をご参照下さい 13

14 ViewRNA TM ISH Tissue Assay FFPE 切片 凍結切片用検出試薬 ViewRNA ISH Tissue Assay は パラフィン組織切片や凍結組織切片に対応した 高感度 in situ Hybridization 試薬です 従来の Fast Red による単色染色に加えて Fast Blue との 2 色同時染色により 2 種類の遺伝子を同時に検出することが可能になりました Red: Klk3 Dark Blue: ハウスキーピング遺伝子 Blue: 核染色 ヒト前立腺正常細胞 ( 左 ) および前立腺癌細胞 ( 右 ) 組織切片 ViewRNA ISH Tissue Assay Kit 2 色同時染色向け製品 Wash Buffer ハイブリ用 Buffer サンプル前処理用の試薬及びシグナル検出のためのプローブや色素試薬が一式含まれております 単色染色もご利用になれます QVT0012 ViewRNA ISH Tissue Assay Kit 24 tests 359,000 QVT0013 ViewRNA ISH Tissue Assay Kit 96 tests 1,092,000 旧商品コード QVT0010 QVT0011 は それぞれ QVT0012 QVT0013 に変更されました 製品内容に変更ありません 単色染色向け製品 Fast Red による単色で検出する場合は ViewRNA ISH Tissue Assay Kit と ViewRNA Chromogenic Signal Amplification Kit をそれぞれご用意下さい ViewRNA ISH Tissue Assay Kit は Wash Buffer ハイブリ用 Buffer サンプル前処理用の試薬が また ViewRNA Chromogenic Signal Amplification Kit はシグナル検出のためのプローブや色素試薬が含まれております QVT0050 ViewRNA ISH Tissue Assay kit 24 assays 72,000 QVT0051 ViewRNA ISH Tissue Assay kit 96 assays 280,000 QVT0200 ViewRNA Chromogenic Signal Amplification kit 24 assays 200,000 QVT0201 ViewRNA Chromogenic Signal Amplification kit 96 assays 674,000 14

15 ViewRNA Probe Set 検出したい遺伝子を特異的に検出するためのプローブです Fast Red には Type 1 Fast Blue には Type 6 を選択下さい 新規デザインが必要な場合は By request と記載のある製品をご購入下さい 新規デザインの必要の有無は弊社までお問い合わせ下さい 新規デザイン ( カスタム ) プローブも最短 2 週間でお届けします V#1-#####-06 ViewRNA TYPE 1 Catalog Probe Set ( 遺伝子名 ) 120 ul \30,000 VX ViewRNA TYPE 1 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 V#6-#####-06 ViewRNA TYPE 6 Catalog Probe Set ( 遺伝子名 ) 120 ul \30,000 VX ViewRNA TYPE 6 Probe Set By Request 440 μ L 73,000 ViewRNA ISH Tissue Assay 各種消耗品及びキットの個別製品 QVT X Pretreatment Solution 21 ml 21,000 QVT0502 Wash Buffer Components (1 and 2) 24 tests 59,000 QVT0503 Wash Buffer Components (1 and 2) 96 tests 98,000 QVT0504 Fast Red Substrate (20 ml Naphthol Buffer + 4 Fast Red Tablets) 24 tests 93,000 QVT0505 Fast Red Substrate (41 ml Naphthol Buffer + 8 Fast Red Tablets) 96 tests 156,000 QVT0506 Fast Blue Substrate (20 ml Blue Buffer ul each Blue Reagent 1-3) 24 tests 93,000 QVT0507 Fast Blue Substrate (40 ml Blue Buffer ul each Blue Reagent 1-3) 96 tests 156,000 QVT0508 AP Enhancer Solution 10 ml 28,000 QVT0509 AP Enhancer Solution 40 ml 81,000 QVT0510 Probe Set Diluent QT 12 ml 28,000 QVT0511 Probe Set Diluent QT 43 ml 81,000 QVT0512 Protease QF 180 ul 39,000 QVT0513 Label Probe Diluent QF 24 ml 28,000 QVT0514 Label Probe Diluent QF 86 ml 81,000 QVT0515 Protease QF 500 ul 67,000 QVT0517 AP Stop QT 10 ml 31,000 QVT0518 AP Stop QT 40 ml 84,000 QV0523 View Temprature Validation Kit each 57,000 15

16 初回評価 検討用キット ViewRNA TM Evaluation Kit ViewRNA Evaluation Kit は ViewRNA をお安く お気軽にお試し頂くためのキットです 検出に必要な試薬 プローブ コントロールサンプルまで入った all in one の商品です ViewRNA の優れたテクノロジーを初めて試されたい場合に最適な商品です in situ での mrna 発現解析にお困りのお客様は 是非とも ViewRNA Evaluation Kit をお試し下さい ViewRNA ISH Tissue Assay Evaluation Kit, 1 plex ViewRNA ISH Tissue Assay kit ViewRNA Chromogenic Signal Amplification kit Type 1, ViewRNA Probe Set, 120 μ L ( ターゲット mrna にハイブリするプローブ ) Type 1, ViewRNA Probe Set, 120 μ L ( コントロール mrna にハイブリするプローブ ) ViewRNA HC Screening Evaluation Kit HC Screening Assay Kit (Assay に必要な試薬のキット ) HC Screening Signal Aplication Kit ( 蛍光による検出試薬 ) 各ターゲットに対するプローブ ViewRNA ISH Tissue Assay Evaluation Kit, 2plex ISH Tissue 2plex Assay Kit, 1 kit (Assay に必要な試薬のキット ) Type 1, 6 ViewRNA Probe Set, 120 μ L ( ターゲット mrna にハイブリするプローブ ) Type 1, 6 ViewRNA Probe Set, 120 μ L ( コントロール mrna にハイブリするプローブ ) QVT0001 ViewRNA ISH Tissue Assay Evaluation Kit, 1 plex 1 kit 267,000 QVT0002 ViewRNA ISH Tissue Assay Evaluation Kit, 2 plex 1 kit 281,000 QVP0020 ViewRNA HC Screening Evaluation Kit, 1 plex 1 kit 439,000 QVP0021 ViewRNA HC Screening Evaluation Kit, 2 plex 1 kit \641,000 QVP0022 ViewRNA HC Screening Evaluation Kit, 3 plex 1 kit 806,000 QVP0023 ViewRNA HC Screening Evaluation Kit, 4 plex 1 kit 906,000 ViewRNA は Affymetrix Inc. の商標です SPAF