非臨床概要毒性試験の目次 項目 - 頁 毒性試験の概要文 ~xr1i - p まとめ ~xr2i - p 単回投与毒性試験 ~xr3i - p マウス...

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2 非臨床概要毒性試験の目次 項目 - 頁 毒性試験の概要文 ~xr1i - p まとめ ~xr2i - p 単回投与毒性試験 ~xr3i - p マウス ~xr4i - p ラット ~xr5i - p イヌ ~xr6i - p 反復投与毒性試験 ~xr7i - p ラット13 週間反復投与毒性試験 ~xr8i - p ラット13 週間反復投与比較毒性試験 (1) ~xr9i - p ラット13 週間反復投与比較毒性試験 (2) イヌ13 週間反復投与毒性試験 イヌ13 週間反復投与比較毒性試験 遺伝毒性試験 p p p ~xr13i - p 細菌を用いる復帰突然変異試験 ~xr14i - p マウスリンフォーマTK 試験 ~xr15i - p ヒト培養リンパ球を用いる染色体異常試験 ~xr16i - p マウス骨髄小核試験 ~xr17i - p がん原性試験 ~xr18i - p 生殖発生毒性試験 ~xr19i - p 胚 胎児発生に関する試験 ~xr20i - p ラット ~xr21i - p ウサギ ~xr22i - p 局所刺激性 ~xr23i - p その他の毒性試験 ~xr24i - p 免疫毒性試験 ~xr25i - p リンパ球サブセット検査 ~xr26i - p 不純物の毒性試験 ~xr27i - p 考察及び結論 ~xr28i - p 図表 ~xr29i - p 参考文献 ~xr30i - p. 20

3 毒性試験概要表 ~xr31i - p 毒性試験 : 一覧表 ~xr32i - p トキシコキネティクス : トキシコキネティクス試験一覧 ~xr33i - p トキシコキネティクス : トキシコキネティクデータ一覧 ~xr34i - p 毒性試験 : 被験物質 ( バッチごと ) 一覧 ~xr35i - p 単回投与毒性試験 ~xr36i - p 反復投与毒性試験 : 重要な試験以外の試験 ~xr37i - p 反復投与毒性 ~xr38i - p ラット13 週間反復投与毒性試験 ~xr39i - p ラット13 週間反復投与比較毒性試験 (1) ~xr40i - p ラット13 週間反復投与比較毒性試験 (2) ~xr41i - p イヌ13 週間反復投与毒性試験 ~xr42i - p イヌ13 週間反復投与比較毒性試験 ~xr43i - p I n vitro 遺伝毒性試験 ~xr44i - p 細菌を用いる復帰突然変異試験 ~xr45i - p マウスリンフォーマTK 試験 ~xr46i - p ヒト培養リンパ球を用いる染色体異常試験 ~xr47i - p I n vivo 遺伝毒性試験 ~xr48i - p マウス骨髄小核試験 ~xr49i - p がん原性試験 ~xr50i - p 生殖発生毒性試験 : 重要な試験以外の試験 ~xr51i - p 生殖発生毒性試験 : 受胎能 初期胚発生および胚 胎児発生に関する試験 ~xr52i - p 生殖発生毒性試験 : 胚 胎児発生に関する試験 ~xr53i - p ラット胚 胎児発生に関する試験 ~xr54i - p ウサギ胚 胎児発生に関する試験 ~xr55i - p 生殖発生毒性試験 : 出生前および出生後の発生ならびに母体の機能に関する試験 ~xr56i - p 新生児を用いた試験 ~xr57i - p 局所刺激性試験 ~xr58i - p その他毒性試験 ~xr59i - p 免疫毒性試験 ~xr60i - p 不純物の毒性試験 ( 細菌を用いる復帰突然変異試験 ) ~xr61i - p. 30

4 2.6.6 および の略語等一覧 セチリジン セチリジン塩酸塩 レボセチリジン レボセチリジン塩酸塩 ALT アラニンアミノトランスフェラーゼ AST アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ AUC 血漿中濃度 - 時間曲線下面積 AUC 0-t t 時間までの血漿中濃度 - 時間曲線下面積 C max 最高血漿中濃度 Hb ヘモグロビン Ht ヘマトクリット LD 50 50% 致死量 NOAEL 無毒性量 NZW ウサギ New Zealand White ウサギ SD ラット Sprague Dawley ラット ucb レボセチリジン塩酸塩のフリー体

5 毒性試験の概要文 まとめレボセチリジンについて マウス ラットおよびイヌを用いた単回投与毒性試験 ラットおよびイヌを用いた 13 週間反復投与毒性試験 in vitro/in vivo 遺伝毒性試験ならびに不純物の毒性評価を実施した また レボセチリジンとラセミ体であるセチリジンの毒性プロファイルをラットおよびイヌの 13 週間反復投与比較毒性試験 ラットおよびウサギの胚 胎児発生に関する試験ならびに免疫毒性試験により比較した 実施した毒性試験の一覧を表 および に示した 表 毒性試験一覧表 試験項目 / 期間 投与経路 動物種 / 系統 被験物質 単回投与毒性試験 経口 NMRI マウス レボセチリジン 経口 SD ラット レボセチリジン 経口 ビーグル犬 レボセチリジン 反復投与毒性試験 13 週間 経口 SD ラット レボセチリジン 13 週間 経口 SD ラット レボセチリジン セチリジン 13 週間 経口 ビーグル犬 レボセチリジン 13 週間 経口 ビーグル犬 レボセチリジン セチリジン 遺伝毒性試験復帰突然変異試験 in vitro ネズミチフス菌 大腸菌 レボセチリジン マウスリンフォーマ TK 試験 in vitro マウスリンパ腫細胞 レボセチリジン 染色体異常試験 in vitro ヒト培養リンパ球 レボセチリジン 骨髄小核試験 経口 CD-1 マウス レボセチリジン 生殖発生毒性試験胚 胎児発生に関する試験 経口 SD ラット レボセチリジン セチリジン 胚 胎児発生に関する試験 経口 NZW ウサギ レボセチリジン セチリジン その他の毒性試験免疫毒性試験 経口 SD ラット レボセチリジン セチリジン 単回投与毒性レボセチリジンをマウス ラットおよびイヌに単回経口投与したときのおもな所見は げっ歯類では脱力 腹臥位 跳躍 呼吸障害および血様内容物を伴った消化管のうっ血 / 出血ならびにイヌでは流涎 嘔吐および下痢であった 経口投与時の概略の致死量はマウスおよびラットではともに 560mg/kg であり イヌでは 320mg/kg 超であった 反復投与毒性ラットおよびイヌにレボセチリジンを 13 週間経口投与したときの ucb の曝露量 (C max および AUC) は ラットでは投与量増加の割合を上回って増加し 8 および 25mg/kg/ 日群では雄の曝露量は雌よりも高い傾向を示した イヌの曝露量は投与量増加に伴い増加し 性差はなく 反復投与により蓄積性を示した しかしながら 75mg/kg/ 日群では嘔吐の発現頻度増加のため曝露量は投与量増加の割合を下回って増加した p. 1

6 レボセチリジンの 75mg/kg/ 日までをラットに 13 週間経口投与した結果 25mg/kg/ 日以上の群の雄で可逆性の体重補正肝臓重量の高値 小葉中心性肝細胞肥大および脂肪沈着がみられたが いずれも肝代謝酵素誘導に対する適応性の変化と考えられ 毒性と判断しなかった その他に レボセチリジンの投与によると考えられる毒性所見は認められなかった したがって ラットにおける無毒性量は雌雄ともに 75mg/kg/ 日と推定された セチリジン群においてもレボセチリジン群と同様に肝臓への影響 ( 小葉中心性肝細胞肥大および脂肪沈着 ) が認められ 発現頻度および程度は同投与量のレボセチリジンとほぼ同程度であった イヌでは 13 週間反復投与毒性試験において レボセチリジンの 25mg/kg/ 日以上の群で対照群と比較して嘔吐の発現頻度増加が認められた しかしながら 嘔吐に関連する変化は観察されず また 嘔吐以外に投与に関連する変化も認められなかった したがって 無毒性量は 8mg/kg/ 日と推定された セチリジン群においてもレボセチリジン群と同様に 投与に関連する変化は嘔吐のみであり レボセチリジンとセチリジンはほぼ同様の毒性プロファイルを示した 遺伝毒性細菌を用いる復帰突然変異試験 マウスリンフォーマ TK 試験 ヒト培養リンパ球を用いる染色体異常試験およびマウス骨髄小核試験により評価した結果 いずれの試験においても陰性を示したことから レボセチリジンは遺伝毒性を有していないと考えられた 生殖発生毒性ラットおよびウサギを用いた胚 胎児発生に関する試験では レボセチリジンのそれぞれ 100 および 60mg/kg/ 日以上の群で一般状態の悪化および体重増加量 / 摂餌量への影響がみられ ウサギでは死亡も認められた また 胚 胎児への影響として ラットの 200mg/kg/ 日群では胎児体重の低値によると考えられる胸骨分節未骨化の発現頻度に高値傾向がみられ ウサギの 120mg/kg/ 日群では第 13 肋骨出現頻度に高値傾向が認められた したがって ラットおよびウサギの母動物に対する無毒性量はそれぞれ 50 および 30mg/kg/ 日 胚 胎児発生に対する無毒性量はそれぞれ 100 および 60mg/kg/ 日と推定された セチリジン群 ( ラットおよびウサギでそれぞれ 200 および 120mg/kg/ 日 ) においてもレボセチリジン群とほぼ同様の母体毒性および胚 胎児への影響が観察された 催奇形性はいずれの動物種または投与群においても認められなかった 以上より レボセチリジンは生殖発生毒性においてもセチリジンと同様の毒性プロファイルを示した その他の毒性免疫毒性レボセチリジンの 75mg/kg/ 日までをラットに 13 週間反復経口投与した結果 免疫毒性を示す所見は認められなかった p. 2

7 不純物の毒性規格値で安全性確認の必要な閾値を超える不純物 ( 類縁物質 ) は 製剤では gsk002* であり 原薬では gsk005*( 不純物 A) gsk001*( 不純物 B) gsk004*( 不純物 C) gsk008*( 不純物 D) および gsk002* の計 5 種類である なお ucb のエナンチオマーである gsk002* に関してはセチリジンの申請概要において安全性は十分評価されていると考えられたため それ以外の不純物の安全性について ラットの 4 および 13 週間反復投与毒性試験ならびに遺伝毒性試験 ( 細菌を用いる復帰突然変異試験およびマウス骨髄小核試験 ) に使用したバッチに含まれている不純物含量を基に各不純物の安全性を評価した その結果 これらの試験の無毒性量または陰性用量における不純物の推定曝露量は臨床推奨用量投与時の推定最大曝露量を大きく上回っており 遺伝毒性試験においても異常はみられなかった これらのことから 原薬中に含まれるこれらの不純物により 臨床使用時に危惧されるような有害作用または遺伝毒性が発現する可能性は低く いずれの不純物の安全性についても確認されていると判断した * 新薬承認情報提供時に置き換え p. 3

8 単回投与毒性試験 レボセチリジンの経口投与による急性毒性を検討するため マウス ラットおよびイヌを用いた単回投与毒性試験を実施した ( 表 ) 成績の概要はいずれも に示した 動物種 / 系統 投与経路 表 被験物質 単回投与毒性試験一覧表 投与量 (mg/kg) 動物数 / 性 / 群 GLP 適用 実施施設 NMRI マウス 経口 レボセチリジン 0, 240, 560, 1300, 適 UCB ( ベルギー ) SD ラット 経口 レボセチリジン 0, 240, 560, 1300, 5 適 UCB 3200 ( ベルギー ) ビーグル犬 経口 レボセチリジン 32, 100, 適 UCB ( ベルギー ) 資料番号 マウス レボセチリジンの 0( 媒体 ) および 3200mg/kg を各群雌雄各 5 匹のマウスに単回経口投与した結果 雌雄ともに 560mg/kg 以上の群で死亡が認められたことから 概略の致死量は雌雄ともに 560mg/kg であった 240mg/kg 以上の群で鎮静 半眼および痙攣性呼吸などが認められた また 560mg/kg 以上の群ではこれらの変化に伴い脱力 呼吸障害および腹臥位などが観察され および 3200mg/kg 群でそれぞれ投与後 6 日 3 日および 7 時間までに死亡例が認められた 一方 生存例では 一般状態への影響は投与後 3 日までには回復し 体重増加量は対照群と同程度であった 剖検および組織学的検査では 1300mg/kg 以上の群の死亡例で血様内容物を伴った胃の出血 / うっ血および腸のうっ血などがみられ そのうち 2 例に腺胃壊死が観察され 1300mg/kg/ 日群の雌 1 例では肝臓に広範な壊死が認められた なお 生存例では投与に関連する異常は観察されなかった ラット レボセチリジンの 0( 媒体 ) および 3200mg/kg を各群雌雄各 5 匹のラットに単回経口投与した結果 雌雄ともに 560mg/kg 以上の群で死亡が認められたことから 概略の致死量は雌雄ともに 560mg/kg であった 240mg/kg 以上の群で半眼および痙攣性呼吸 560mg/kg 以上の群では鎮静 脱力 腹臥位および跳躍などが認められ および 3200mg/kg 群でそれぞれ投与後 22 時間 2 日および 1 時間までに死亡例が認められた 生存例の一般状態への影響は 240mg/kg 群の雌 1 例 ( 投与後 7 日までに回復 ) を除き投与後 2 日までに回復した 生存例の体重増加量は対照群と同程度であった 剖検では 560mg/kg 以上の群の死亡例で血様 / 白色内容物を伴った胃および腸の出血 / うっ血 ならびに膵臓のうっ血などが認められ 組織学的検査において 1300mg/kg 群で腺胃に壊 p. 4

9 死が認められた 生存例では 560mg/kg 群の 1 例に剖検で腎臓に赤斑がみられ 組織学的検 査では腎皮質の尿細管拡張 線維化および単核球浸潤が認められた イヌ レボセチリジンの および 320mg/kg を各群雌雄各 1 匹のビーグル犬に単回経口 ( カプセル ) 投与した結果 いずれの投与群においても死亡例はみられず 概略の致死量は 320mg/kg 超であった 一般状態の変化として 流涎 (32mg/kg 以上の群 ) および嘔吐 下痢 (100mg/kg 以上の群 ) が認められたが これらの変化は投与後 48 時間までに回復した 体重への影響は全投薬群で認められなかった なお 320mg/kg 群では全例で嘔吐がみられたため これ以上の高用量は投与しなかった 反復投与毒性試験ラットおよびイヌにレボセチリジンを 13 週間経口投与し レボセチリジンの毒性プロファイルを評価した さらに レボセチリジンとセチリジンの毒性プロファイルを比較するため レボセチリジンおよびセチリジンを 13 週間経口投与した反復投与比較毒性試験を実施した ( 表 ) 表 反復投与毒性試験一覧表 動物種 / 系統 投与経路 投与期間 被験物質 投与量 (mg/kg/ 日 ) SD ラット 経口 13 週間 レボセチリジン 経口 13 週間 レボセチリジン セチリジン 経口 13 週間 レボセチリジン セチリジン ビーグル犬 経口 13 週間 レボセチリジン 経口 13 週間 レボセチリジン セチリジン 75 動物数 / 性 / 群 10 (R5) 10 (T6) 10 (T6) 10 (T6) 10 (R5, T6) 10 (R5) 10 (T6) 10 (T6) 10 (R5, T6) 10 (T6) 10 (R5, T6) R: 休薬群 T:TK 用動物 実施施設 : = = GLP 適用適 適 適 適 適 実施施設 ( 英国 ) ( 英国 ) ( 英国 ) ( 英国 ) ( 英国 ) 資料番号 p. 5

10 ラット 13 週間反復投与毒性試験 /ref および レボセチリジンの 0( 媒体 ) および 75mg/kg/ 日を各群雌雄各 10 匹のラットに 13 週間経口投与した 対照群および高用量群にはさらに各群雌雄各 5 匹からなる 4 週間休薬群を設けた また 各投薬群には各群雌雄各 6 匹のサテライト群を設け 投与 13 週にトキシコキネティクスを実施した 本試験の投与量は ラット 4 週間反復投与毒性試験 ( 参照 ) でレボセチリジンの および 225mg/kg/ 日を経口投与したところ 225mg/kg/ 日群で死亡 体重 摂餌量低値 肝臓重量増加 小葉中心性 / 中間帯肝細胞肥大 脂肪沈着 腎臓皮質尿細管の好塩基性変化などが認められたため 最高用量は 75mg/kg/ 日とした 成績の概略は に示した ucb の曝露量 (C max および AUC 0-24 ) は雌雄ともに投与量増加の割合を上回って増加し 8 および 25mg/kg/ 日群では雌に比べて雄でより高値を示した 投与に関連する死亡はみられなかった 一般状態の変化として 75mg/kg/ 日群の雌雄で投与後にレボセチリジンの苦味に起因すると考えられる流涎が高頻度に認められたが 休薬期間中には観察されなかった また 25mg/kg/ 日以上の群の雌で投与期間中の体重増加量の低値が認められたが いずれの群においても体重に有意な変化は認められなかった また 後述の 13 週間反復投与比較毒性試験 ( および 参照 ) では体重および体重増加量への影響は認められなかったことから 本所見は再現性のない変化と考え 悪影響とはしなかった 眼科学的検査および血液学的検査に異常は認められなかった 血液生化学的検査において 8mg/kg/ 日以上の群の雌で AST の高値がみられたが 明らかな投与量との関連性はなく 8 および 75mg/kg/ 日群の各 1 例で対照群値の範囲 (38~88mU/mL) を上回ったのみで その他の動物に変化はみられなかったことから 偶発的な変化と考えられた また 尿検査では 25mg/kg/ 日以上の群の雄および 75mg/kg/ 日群の雌に軽度の尿 ph 低値 8mg/kg/ 日以上の群の雄および 75mg/kg/ 日群の雌に尿蛋白量の高値がみられたが 尿蛋白量の変化は尿中に排泄された被験物質の測定系への影響が原因と考えられ [RRLE99E1801] さらに組織学的検査において腎臓に変化がみられなかったことから これらの変化は毒性学的意義のない変化と考えられた 休薬期間終了後に特記すべき変化は認められなかった 器官重量測定において 25mg/kg/ 日以上の群の雄で体重補正肝臓重量の軽度の高値が認められたが 相対肝臓重量に影響はみられなかった 組織学的検査では 25mg/kg/ 日以上の群の雄の肝臓に軽微な小葉中心性肝細胞肥大または脂肪沈着が認められた しかしながら ラットではレボセチリジンの投与により肝代謝酵素が誘導される ( 参照 ) ことから これらの変化は肝代謝酵素誘導に対する適応性およびそれに関連した変化であると考えられ 毒性学的意義は低いと推察された 休薬期間終了後では 器官重量測定および組織学的検査に変化は認められなかった 以上より レボセチリジンの無毒性量は雌雄ともに 75mg/kg/ 日と推定された p. 6

11 ラット 13 週間反復投与比較毒性試験 (1) レボセチリジンおよびセチリジンをラットに13 週間反復経口投与したときの毒性プロファイルを比較した レボセチリジンの 0( 媒体 ) および 75mg/kg/ 日 ならびに比較対照群にはセチリジンの 37.5 および 75mg/kg/ 日を各群雌雄各 10 匹のラットに 13 週間経口投与した 媒体対照群ならびにレボセチリジンおよびセチリジンの高用量群にはさらに各群雌雄各 5 匹の4 週間休薬群を設けた 本試験の最高用量は先の 13 週間反復投与毒性試験 ( 参照 ) と同じ 75mg/kg/ 日とし 以下 37.5 および 18.7mg/kg/ 日を設定した また 各投薬群には雌雄各 6 匹のサテライト群を設けトキシコキネティクスを実施したが 血漿中濃度測定の結果 レボセチリジンの 75mg/kg/ 日群以外の群で信頼性のあるデータが得られず 血漿サンプルのラベルミスが原因と考えられた そのため トキシコキネティクスの評価は後述の 13 週間反復投与比較毒性試験 ( 参照 ) で実施した さらに リンパ系組織の詳細な組織学的検査およびリンパ球サブセット解析により免疫機構への影響について検討した ( 参照 ) 成績の概要は に示した いずれの投薬群においても投与に関連する死亡または一般状態の変化は認められず 体重増加量 摂餌量 摂水量 眼科学的検査 尿検査および血液学的検査にも投与の影響はみられなかった また 免疫グロブリンおよびリンパ系組織の形態 器官重量ならびに剖検所見で投与に関連する変化はみられなかった レボセチリジン群において 投与 3 時間後の直腸温に投与前に比べ軽度な低下が認められたが 明らかな用量相関性はなく また 後述の 13 週間反復投与比較毒性試験 ( 参照 ) では同様の変化は観察されていないことから 本所見は偶発的な変化と考えられた 血液生化学的検査では レボセチリジン群およびセチリジン群で ALT または AST の高値傾向がみられたが 投与量との明らかな関連性もみられなかった その他のパラメータに変化は認められなかった 投与に関連する組織学的変化として 先の 13 週間反復投与毒性試験 ( 参照 ) と同様にレボセチリジンおよびセチリジンの 75mg/kg/ 日群の雄に軽微な小葉中心性肝細胞肥大および脂肪沈着が認められた 脂肪沈着の発現頻度 程度は同投与量のレボセチリジンに比べ セチリジン群でより高値を示した いずれの変化も 4 週間の休薬によりほぼ回復した 以上より レボセチリジンの 75mg/kg/ 日までの投与により毒性学的に意義のある変化は認められなかった また レボセチリジンおよびセチリジンは同投与量で概して同様の毒性プロファイルを示し レボセチリジンの投与により新たな毒性発現はみられなかった ラット 13 週間反復投与比較毒性試験 (2) 前述の 13 週間反復投与比較毒性試験 ( 参照 ) においてトキシコキネティクスの十分な評価ができなかったため レボセチリジンおよびセチリジンを用いた追加の 13 週間反復投与比較毒性試験を実施した レボセチリジンの 0( 媒体 ) および 75mg/kg/ 日ならびに比較対照群にはセチリジンの 37.5 および 75mg/kg/ 日を各群雌雄各 6 匹のラットに 13 週間経口投与し 一般状態 体重 摂餌量および直腸温について検討した p. 7

12 成績の概要は に示した ucb の AUC 0-12 は投与量増加の割合を上回って増加した また 18.7 および 37.5mg/kg/ 日群では雄の曝露量は雌よりも高い傾向を示した 投与に関連する死亡は認められなかった 一般状態への影響として レボセチリジンおよびセチリジンのおもに 75mg/kg/ 日群の雌雄で流涎の発現頻度の増加がみられたが その他に変化は認められなかった 体重および摂餌量に投与による影響はみられなかった また 先の 13 週間反復投与比較試験 ( 参照 ) において軽度な直腸温の低下がみられたが 同投与量を用いた本試験では直腸温に投与の影響は認められず 再現性のない変化であった 以上より いずれの投与群においても毒性学的に意義のある変化は認められなかった また レボセチリジンおよびセチリジンは同様の毒性プロファイルを示した イヌ 13 週間反復投与毒性試験 /ref および レボセチリジンの 0( 媒体 ) 8 25 および 75mg/kg/ 日を各群雌雄各 4 匹のイヌに 13 週間経口 ( カプセル ) 投与し 媒体対照群には空カプセルのみを同様に投与した 本試験の投与量は イヌ 4 週間経口投与毒性試験 ( 参照 ) において および 135/90mg/kg/ 日を投与したところ 135/90mg/kg/ 日群で死亡 一般状態の変化 ( 嘔吐 振戦および流涎 ) 体重 摂餌量低下および胃 気管での粘膜萎縮 炎症などが認められたため 最高用量は 75mg/kg/ 日とした 成績の概要は に示した ucb の曝露量 (C max および AUC 0-24 ) に性差は認められず 25mg/kg/ 日までは投与量増加の割合を上回って増加し 75mg/kg/ 日では投与量増加の割合を下回って増加した この原因として 75mg/kg/ 日群における高頻度の嘔吐の関与が考えられた また 投与 13 週の曝露量が投与 1 日よりも高かったことから 反復投与による蓄積性が考えられた 一般状態への影響として 8mg/kg/ 日以上の群で嘔吐が認められた 8mg/kg/ 日群における嘔吐の発現頻度は低く 散発的にみられたのに対し 25mg/kg/ 日以上の群では対照群に比べて発現頻度は高く 投与期間を通じて連続して観察された個体も認められた 体重 摂餌量測定 血液 血液生化学的検査 眼科学的検査 剖検および組織学的検査ではいずれの群においても投与に関連する変化は認められなかった 尿検査では 75mg/kg/ 日群の投与 6 および 12 週に有意な尿蛋白量の高値がみられたが 尿中に排泄された被験物質が測定系に影響を及ぼしたためと考えられた 以上より 25mg/kg/ 日以上の群で嘔吐の発現頻度増加が認められたため 無毒性量は 8mg/kg/ 日と推定された 嘔吐以外に投与に関連する変化は認められなかった イヌ 13 週間反復投与比較毒性試験 レボセチリジンおよびセチリジンをイヌに 13 週間反復経口投与したときの毒性プロファイルについて比較した レボセチリジンの 0( 媒体 ) 37.5 および 75mg/kg/ 日を各群雌雄各 4 匹のイヌに 13 週間経口 ( カプセル ) 投与し 比較対照群にはセチリジンの 75mg/kg/ 日 媒体 p. 8

13 対照群には空カプセルのみを投与した 本試験の最高用量は先の 13 週間反復投与毒性試験 ( 参照 ) と同様に 75mg/kg/ 日とした 成績の概要は に示した いずれの投与群においても投与に関連する死亡は認められなかった 一般状態への影響として 先の 13 週間反復投与毒性試験と同様に レボセチリジン群およびセチリジン群で嘔吐の発現頻度増加がみられ セチリジン群の雄でもっとも高頻度に認められた また レボセチリジンの 37.5mg/kg/ 日以上の群の雄で投与 8 週に媒体対照群と比較して投与後直腸温の軽度の低下がみられたが 各個体における投与前値からの変化量は媒体対照群とほぼ同程度であり また 雌では直腸温への影響はみられていないことから 投与に関連する変化ではないと判断した レボセチリジンの 75mg/kg/ 日群の雌 1 例 (No.940) および 37.5mg/kg/ 日群の雄 1 例 (No.935) で投与期間中に貧血を示唆する所見 ( 粘膜蒼白 四肢冷感など ) が認められたため これらの動物について血液 血液生化学的検査を実施したところ 多くのパラメータに変化 (Ht Hb 赤血球 総白血球 好中球 好酸球 リンパ球および血小板の減少 軽度の連銭形成 有核赤血球および巨大血小板 ならびに総蛋白およびアルブミンの減少 ) が認められた しかしながら 糞便検査および寄生虫検査に異常は認められず 血液生化学的検査では貧血または出血の指標であるビリルビン値などにも変化はみられなかった このため 投与 28 日にレボセチリジンの 75mg/kg/ 日群の全例で血液学的検査を実施したが 上述の No.940 以外の動物で血液学的パラメータに異常は認められなかった なお これら 2 例 (No.940 および No.935) については投与を継続したところ 投与期間内に正常な一般状態および血液 血液生化学的パラメータを示すにまで改善し 他の動物および先に実施した 13 週間反復投与毒性試験 ( 参照 ) では同様の変化はみられていないことから これらの変化は投与に関連する所見ではないと推察された 体重 摂餌量 眼科学的検査および心電図検査に投与による影響は認められなかった また 尿検査においても毒性学的意義のある変化はみられなかった 器官重量測定では 75mg/kg/ 日群の雌で対照群に比べ体重補正肝臓重量の高値が認められたが 剖検 組織学的検査で関連する変化はみられなかったため 毒性変化ではないと考えられた 以上より レボセチリジン群およびセチリジン群ともに投与に関連する変化は嘔吐のみであり レボセチリジンおよびセチリジンは同様の毒性プロファイルを示した p. 9

14 遺伝毒性試験 レボセチリジンの in vitro および in vivo 遺伝毒性評価として 表 に示した試験を実 施した 表 遺伝毒性試験一覧 試験系 動物種 / 系統 投与量 / 処理濃度 GLP 適用 復帰突然変異試験 ネズミチフス菌大腸菌 31.25~1000µg/plate (-S9) ~5000µg/plate (+S9) 適 マウスリンフォーマ マウスリンパ腫細胞 50~350µg/mL (-S9) 適 TK 試験 100~300µg/mL (+S9) 染色体異常試験 ヒト培養リンパ球 300~700µg/mL (-S9) 適 400~700µg/mL (+S9) 骨髄小核試験 CD-1 マウス 800mg/kg ( 単回 ) 適 実施施設 : = 実施施設 ( 英国 ) ( 英国 ) ( 英国 ) ( 英国 ) 資料番号 細菌を用いる復帰突然変異試験 ネズミチフス菌 (TA1535 TA1537 TA98 および TA100 株 ) および大腸菌 (WP2uvrA 株 ) を用いてプレインキュベーション法によりレボセチリジンの変異原性について評価した 細胞毒性試験においてレボセチリジンの 0.1~5000µg/plate を TA100 に処理した結果 代謝活性化系 (S9) の存在下および非存在下でそれぞれ 5000 および 1000µg/plate より細胞毒性が認められたため 本試験では S9 の存在下および非存在下でそれぞれ ~5000 および 31.25~ 1000µg/plate の処理濃度で 2 試験実施した 成績の概要は に示した いずれの試験においても S9 の有無にかかわらず変異原性は認められなかった 以上より レボセチリジンは本条件下でネズミチフス菌および大腸菌に対して復帰突然変異誘発能を示さないと考えられた マウスリンフォーマ TK 試験 マウスリンパ腫 L5178Y 細胞株 (clone C) を用いて S9 の存在下および非存在下で遺伝子突然変異誘発能について検討した S9 存在下および非存在下でそれぞれ 2 試験ずつ実施した レボセチリジンの処理時間は S9 存在下の 2 試験および非存在下の 1 回目の試験は 4 時間 非存在下の 2 回目の試験では 24 時間とした 先に実施した細胞毒性試験において 0.5~5000µg/mL で処理した結果 S9 存在下および非存在下の 4 時間処理でそれぞれ 50 および 500µg/mL 非存在下の 24 時間処理では 150µg/mL より毒性 (S9 存在下および非存在下の 4 時間ならびに非存在下の 24 時間処理でそれぞれ および 45.7% の相対生存率 ) が認められた これより 本試験には S9 の存在下 (4 時間処理 ) および非存在下 (4 または 24 時間処理 ) でそれぞれ 100~300 および 50~ 350µg/mL の処理濃度を用いた p. 10

15 成績の概要は に示した いずれの試験においても S9 の有無にかかわらず 相対生存率の低下した処理濃度で突然変異体の発現頻度に有意な増加はみられなかった 以上のことから レボセチリジンはマウスリンパ腫 L5178Y 細胞に対して細胞毒性を示す処理濃度まで突然変異誘発能を示さなかった ヒト培養リンパ球を用いる染色体異常試験 レボセチリジンの染色体異常誘発能について S9 の存在下および非存在下でヒト培養リンパ球を用いる染色体異常試験 (2 試験 ) により評価した 試験 1 では S9 存在下および非存在下で 3 時間処理し その後 17 時間の回復期間を設けた 本試験の処理濃度は分裂指数を基に設定し ( 表 ) S9 の有無でそれぞれ 47 および 44% の有糸分裂阻害を示した最大処理濃度を含む 3 用量で染色体異常を評価した 試験 2 では S9 の存在下で 3 時間処理 +17 時間回復時間および非存在下で 20 時間処理した S9 の非存在下では 150~500µg/mL の処理濃度において有糸分裂指数の増加がみられたため もっとも強い有糸分裂指数を示した 300µg/mL を加え S9 の有無でそれぞれ 57 および 65% の有糸分裂阻害を示した最大処理濃度を含む 3~4 用量で染色体異常試験を実施した ( 表 ) 表 染色体異常試験概要 試験 S9 処理時間 + 回復時間処理濃度陽性対照群媒体対照群 (h) (µg/ml) (µg/ml) 試験 , 650, 700 NQO: , 550, 650 CPA:12.5 試験 , 550, 600, 650 NQO: , 650, 700 CPA:12.5 NQO=4-Nitroquinoline 1-oxide CPA=シクロホスファミド 成績の概要は に示した いずれの処理群においても染色体構造異常を示す細胞比は S9 の有無にかかわらず媒体対照群と同程度であり 全処理群において染色体異常数 (gap を除く ) は陰性対照群の背景値の範囲内であった また 染色体の数的異常を示す細胞比においても S9 の有無にかかわらず陰性対照群の背景値の範囲を超える増加は認められなかった このことから S9 非存在下の 300µg/mL の 20 時間処理群で認められた有糸分裂指数の増加は倍数体の増加とは関連していないと判断された 以上のことから レボセチリジンはヒト培養リンパ球に対して S9 の有無にかかわらず 細胞毒性を示す処理濃度で染色体の構造的および数的異常を誘発しなかった マウス骨髄小核試験 レボセチリジンをマウスに経口投与したときの骨髄細胞における小核誘発能について評価した 予備試験において 800mg/kg で一般状態への影響 1000mg/kg で死亡が認められたため p. 11

16 本試験では 800mg/kg をマウスに単回経口投与した 対照群には媒体 陽性対照群にはマイトマイシン C を 12mg/kg 単回経口投与した レボセチリジンおよび対照群では投与 および 72 時間後 陽性対照群は投与 24 時間後に各群雌雄各 5 匹から骨髄塗沫標本を作製し 小核を有する多染性赤血球の出現頻度を求めた また 全赤血球に対する多染性赤血球比および小核を有する多染性赤血球の発現頻度を求めた 成績の概要は に示した 800mg/kg で昏睡などの一般状態への影響および 3 例の死亡が認められ レボセチリジンの骨髄毒性によると考えられる多染性赤血球 / 正染性赤血球比の有意な低下がみられた レボセチリジン群で小核を有する多染性赤血球の出現頻度に有意な増加は認められず レボセチリジンは骨髄小核誘発能を示さなかった がん原性試験レボセチリジンを用いた試験は実施していない 生殖発生毒性試験レボセチリジンのラットおよびウサギを用いた胚 胎児発生に関する試験を実施した ( 表 ) なお レボセチリジンおよびセチリジンを用いた 13 週間反復投与毒性試験および反復投与比較毒性試験ならびに 後述する胚 胎児発生に関する試験において レボセチリジンおよびセチリジンは同投与量でほぼ同様の毒性プロファイルを示し レボセチリジンの生殖機能への影響はセチリジンの毒性試験データ ( セチリジン申請概要 ) により評価可能と判断したため レボセチリジンを用いた受胎能および着床までの初期胚発生に関する試験ならびに 出生前および出生後の発生ならびに母体の機能に関する試験は実施しなかった 表 生殖発生毒性試験一覧 試験系動物種 / 系統胚 胎児発生に SD ラット関する試験 NZW ウサギ 妊娠 0 日 : 交尾確認日 実施施設 : = a: 比較対照としてセチリジンを投与 投与経路 ( 投与期間 ) 経口 ( 妊娠 6~15 日 ) 経口 ( 妊娠 6~18 日 ) 投与量 動物数 (mg/kg/ 日 ) a a 15 GLP 適用適 適 実施施設 ( 英国 ) ( 英国 ) 資料番号 p. 12

17 胚 胎児発生に関する試験 レボセチリジンの胚 胎児への影響について ラットおよびウサギを用いた胚 胎児発生に関する試験により評価し いずれの試験においても比較対照としてセチリジン群を設けた ラット /ref および レボセチリジンの および 200mg/kg/ 日ならびに比較対照群としてセチリジンの 200mg/kg/ 日を各群 24~25 匹の雌ラットの妊娠 6~15 日 ( 妊娠 0 日 : 交尾確認日 ) に経口投与した ラットを用いた胚 胎児発生に関する予備試験 ( 参照 ) においてレボセチリジンの および 260mg/kg/ 日を投与したところ 260mg/kg/ 日群で死亡 一般状態の悪化 ( 流涎 異常呼吸音 体調不良および摂餌量低値 ) などの母体毒性が認められたため 本試験の最高用量は200mg/kg/ 日とした 妊娠 15 日に血漿中薬物濃度を測定するために採血し 妊娠 20 日に剖検して 胚 胎児発生に及ぼす影響について検討した 成績の概要は に示した 投与 2 時間後の ucb の曝露量は投与量増加に伴い増加した レボセチリジン群で死亡はみられなかったが セチリジン群の 2 例で一般状態の悪化による死亡または切迫屠殺例 ( それぞれ妊娠 15 および 16 日 ) が認められた 一般状態の変化として レボセチリジンの 100mg/kg/ 日以上の群およびセチリジン群で流涎 / 被毛湿潤および異常呼吸音が観察された また レボセチリジンの 50mg/kg/ 日群の 2 例で投与 1 日に流涎 200mg/kg/ 日群の 1 例で円背位および四肢蒼白が認められた レボセチリジンの 200mg/kg/ 日群およびセチリジン群で体重増加量および摂餌量の低値がみられ レボセチリジンの 100mg/kg/ 日群でも妊娠 6~10 日に体重増加量の低値がみられたが 摂餌量は対照群と同程度であった いずれの投与群においても投与に関連する剖検所見は認められなかった レボセチリジンの 100mg/kg/ 日以上の群およびセチリジン群で胎児体重に軽度の低値傾向がみられた 胎児骨格検査では レボセチリジンの 200mg/kg/ 日群およびセチリジン群で胸骨分節未骨化の発現頻度に軽度の高値傾向が認められた これらの群では 母動物に体重増加量および摂餌量の低値がみられており また 未骨化の発現頻度は形態的変化よりもむしろ胎児の骨化段階の指標と考えられることから 本所見は母動物の体重増加量 摂餌量の低値に基づく胎児体重の低値に起因した変化であると推察された いずれの群においても催奇形性は認められなかった 以上より レボセチリジンの母動物および胚 胎児発生に対する無毒性量はそれぞれ 50 および 100mg/kg/ 日と推定された また レボセチリジンおよびセチリジンの同投与量の投与により同様で同程度の母体毒性がみられた ウサギ /ref および レボセチリジンの および 120mg/kg/ 日ならびにセチリジンの 120mg/kg/ 日を各群 14 ~16 匹の雌ウサギの妊娠 6~18 日 ( 妊娠 0 日 : 交尾確認日 ) に経口投与した ウサギを用い p. 13

18 た胚 胎児発生に関する予備試験 ( 参照 ) においてレボセチリジンの および 90mg/kg/ 日を投与したところ 90mg/kg/ 日群で一過性の体重および摂餌量の低下以外に明らかな母体毒性は認められなかったため 本試験の最高用量は 120mg/kg/ 日とした 妊娠 6 および 18 日に血漿中薬物濃度を測定するために採血した 妊娠 29 日に剖検し 胚 胎児発生に及ぼす影響について検討した 成績の概要は に示した 投与 1.5 時間後の ucb の曝露量は投与量増加に伴い増加した レボセチリジンの 120mg/kg/ 日群において 顕著な体重減少 摂餌量の低値および体調不良のため 3 例が死亡または切迫屠殺した ( 妊娠 および 25 日 ) セチリジン群では誤投与により 1 例が死亡した 一般状態の変化として レボセチリジンの 120mg/kg/ 日群で対照群に比べて糞量減少の発現頻度の軽度な増加が投与期間後期 ~ 終了後に認められた ( 対照群の 2/13 例に対し 4/13 例 ) 一方 セチリジン群では呼吸数の増加 瞳孔散大および流涎がそれぞれ 5/13 2/13 および 1/13 例に観察された レボセチリジン群では投与に関連する体重の変化はみられなかったが セチリジン群で投与開始時 ( 妊娠 6~8 日 ) に一過性の体重減少が認められた また 投与期間終了後の妊娠 19~22 日にレボセチリジンの 60mg/kg/ 日以上の群およびセチリジン群で摂餌量の低値が観察された いずれの投与群においても投与に関連する剖検所見は認められなかった 胚 胎児発生に対する影響として レボセチリジンの 120mg/kg/ 日群およびセチリジン群で胎児の第 13 肋骨出現頻度の高値がみられたが いずれの群においても催奇形性は認められなかった 以上より レボセチリジンの母動物および胚 胎児発生に対する無毒性量はそれぞれ 30 および 60mg/kg/ 日と推定された また 同投与量のレボセチリジンおよびセチリジンの投与により同様で同程度の母体毒性および胎児に対する影響がみられた 局所刺激性本剤は経口剤であるため レボセチリジンを用いた局所刺激性試験は実施していない その他の毒性試験 免疫毒性試験 リンパ球サブセット検査 ラット 13 週間反復投与比較毒性試験 ( 参照 ) において 媒体対照群 レボセチリジン群 ( および 75mg/kg/ 日 ) およびセチリジン群 (37.5 および 75mg/kg/ 日 ) より投与 13 週に採血して得た末梢血を用いてリンパ球サブセット (T 細胞 ヘルパー T 細胞 サプレッサー T 細胞 CD4 陽性 CD8 陽性 T 細胞 IL-2R 陽性活性化 T 細胞 ナチュラルキラー細胞および B 細胞 ) をフローサイトメトリーにより評価した p. 14

19 レボセチリジン群およびセチリジン群ともにリンパ球サブセットに投与に関連する変化は認められなかったことから レボセチリジンおよびセチリジンの 75mg/kg/ 日までを経口投与しても免疫機構に影響を及ぼさないと考えられた 不純物の毒性試験規格値で安全性確認の必要な閾値を超える不純物 ( 類縁物質 ) は 製剤ではgsk002*( 2%) であり (2.3.P.5.1 参照 ) 原薬ではgsk005*( 不純物 A: 0.2%) gsk001*( 不純物 B: 0.2%) gsk004*( 不純物 C: 0.2%) gsk008*( 不純物 D: 0.2%) およびgsk002*( 2%) の計 5 種類である (2.3.S.4.1 参照 ) なお gsk002* の安全性に関してはセチリジンの申請概要において十分評価されている 各不純物を用いた毒性試験は実施していないが ラットの 4 および 13 週間反復投与毒性試験ならびに遺伝毒性試験 ( 細菌を用いる復帰突然変異試験またはマウス骨髄小核試験 ) に使用したバッチに含まれていた不純物含量ならびにそれぞれの試験での無毒性量または陰性用量を基に算出した類縁物質曝露量およびヒトでの類縁物質の推定最大曝露量を比較し その安全性について評価した ( 表 ) 不純物 CおよびDはそれぞれ遺伝毒性試験に用いたバッチまたは非臨床試験に用いたすべてのバッチ ( 不純物 Cのバッチ No.100 を除く ) で検出されたが ( 検出下限 :0.04%) いずれも定量下限(0.1%) 未満であったため 不純物 CおよびDの含量は検出下限である 0.04% と仮定して安全性の評価を実施した また 細菌を用いる復帰突然変異試験においては 本試験 ( 参照 ) に用いた 506 バッチの不純物 A~Dの含量はいずれも 0.1% 未満であり このバッチでは十分な不純物の評価ができないため もっとも不純物含量が多いD005 バッチを用いた復帰突然変異試験 ( 参照 ) により評価した なお この試験では レボセチリジンの 5000μg/plateまでをネズミチフス菌 5 株に処理した結果 いずれの菌株においても変異原性は認められなかった ラットの 4 および 13 週間反復投与毒性試験の無毒性量投与時の不純物の推定曝露量は 臨床推奨用量 (5mg/ 日 =0.1mg/kg/ 日 ) における各不純物の推定最大曝露量 ( それぞれの規格値の上限が含まれていると仮定した場合 ) の少なくとも 50 倍以上 マウス骨髄小核試験における陰性用量での各不純物の推定曝露量は 臨床推奨用量での推定曝露量の 1600 倍以上となる また 0.04~0.8% の類縁物質を含む細菌を用いる復帰突然変異試験においても 5000µg/plate まで変異原性はみられなかった 以上より 反復投与毒性試験における無毒性量および遺伝毒性試験における陰性用量での不純物の推定曝露量が臨床推奨用量投与時のそれを上回っていたことから いずれの不純物においても設定した規格値までの安全性は確認されていると判断した * 新薬承認情報提供時に置き換え p. 15

20 試験項目 表 バッチ番号 不純物含量 (%) 毒性試験に使用したバッチの不純物含量 無毒性量または陰性用量 曝露量 (µg/kg/ 日 ) 1) ヒト曝露量 (µg/kg/ 日 ) 2) 安全係数 3) 反復投与毒性試験 D 5 A (0.8) ラット 4 週間 B (0.2) C (0.04) 4) (mg/kg/ 日 ) D (0.04) 4) ラット 13 週間 1 0 A (NQ) B (NQ) C (0.1) 75 (mg/kg/ 日 ) D (0.04) 4) 遺伝毒性試験 D 5 A (0.8) マウス骨髄小核 B (0.2) (mg/kg) C (0.04) 4) D (0.04) 4) 復帰突然変異 D (µg/plate) NQ: 定量下限未満かつ検出下限以上 (0.02% A, B の不純物含量 <0.1% 0.04 C, D の不純物含量 <0.1%) 1) 試験に使用したバッチの不純物量と無毒性量または陰性用量から算出した推定曝露量 2) 不純物の規格値 (0.2%) と臨床用量 (5mg/ 日 ) から算出した推定曝露量 : 5(mg/ 日 ) 50(kg) ) 毒性試験における曝露量 ヒトにおける最大曝露量 4) 推定不純物含量 p. 16

21 考察及び結論単回投与毒性レボセチリジンをマウス ラットおよびイヌに単回経口投与したときのおもな所見は げっ歯類の脱力 腹臥位 跳躍 呼吸障害および血様内容物を伴った消化管のうっ血 / 出血 ならびにイヌでの流涎 嘔吐および下痢であった 経口投与時の概略の致死量はマウスおよびラットではともに 560mg/kg であり イヌでは 320mg/kg 超であった 反復投与毒性ラットおよびイヌ反復投与毒性試験の投与 13 週における ucb の曝露量 (C max および AUC 0-t ) を表 に示した ラットの曝露量は投与量増加の割合を上回って増加し 8 および 25mg/kg/ 日群では雄の曝露量は雌よりも高い傾向を示した イヌの曝露量は投与量増加に伴い増加し 性差はなく 反復投与により蓄積性を示した しかしながら 高用量群では嘔吐の発現頻度増加のため曝露量は投与量増加の割合を下回って増加した 表 動物種 ラット イヌ ラットおよびイヌ反復投与毒性試験における曝露量および臨床曝露量の比較 用量性別 (mg/kg/ 日 ) C max (µg/ml) AUC 0-t 動物 / ヒト曝露量比 (µg hr/ml) C max AUC ヒト 5mg a a: 海外健康成人 ( 男女各 10 名 ) にレボセチリジンの臨床推奨用量である 5mg を 8 日間経口投与 ( ) レボセチリジンをラットに 13 週間反復経口投与した結果 25mg/kg/ 日以上の群の雄で肝代謝酵素誘導に対する適応性の変化と考えられる一連の肝臓所見 ( 可逆的な体重補正肝臓重量の高値 小葉中心性肝細胞肥大および脂肪沈着 ) がみられた また ラセミ体であるセチリジン群でもレボセチリジンと同様に小葉中心性肝細胞肥大および脂肪沈着がみられ 発現頻度および程度は同投与量でレボセチリジンとほぼ同程度であった 同様の変化は既承認薬であるセチリジンの毒性試験においても認められている ( セチリジン申請概要 ) その他の投与に関連する所見として 13 週間反復投与毒性試験の 25mg/kg/ 日以上の群の雌で体重増加量の低値がみられたが これらの群で体重への影響は認められず その他の 13 週間反復投与比較毒性試験でも体重および体重増加量の変化はみられなかったことから 悪影響とはしなかった 13 週間反復投与毒性試験および 13 週間反復投与比較毒性試験において p. 17

22 レボセチリジンおよびセチリジンのおもに高用量群で流涎が認められたが セチリジンはわずかに苦味を示すことが確認されている ( セチリジン申請概要 ) ことから 本所見はレボセチリジンおよびセチリジンの物理化学的性質に起因する変化であり 毒性学的意義はないと考えられた 以上より レボセチリジンのラットに対する無毒性量は雌雄ともに 75mg/kg/ 日と推定された レボセチリジンの投与によりみられた所見は 同投与量のセチリジン投与時とほぼ同様であった イヌの 13 週間反復投与毒性試験および 13 週間反復投与比較毒性試験では 投与に関連する変化としてレボセチリジン群およびセチリジン群で嘔吐がみられ 25mg/kg/ 日以上の群で高頻度に認められた しかしながら 8mg/kg/ 日群における発現頻度は対照群と比較して大きな差はなく 散発的であったことから 毒性学的意義は低いと考えられた なお いずれの投与群においても嘔吐に伴う脱水症状 ( 一般状態の変化 Ht Hb の上昇および電解質の低下など ) はみられなかった その他に レボセチリジン群およびセチリジン群で投与に関連する変化 またはラットの主要所見である肝臓への影響 肝代謝酵素誘導を示唆する所見も認められなかった 以上より 25mg/kg/ 日以上の群で嘔吐の発現頻度増加が認められたため イヌでの無毒性量は 8mg/kg/ 日と推定された また セチリジン群でも投与に関連する変化は嘔吐のみであり レボセチリジンとセチリジンは同様の毒性プロファイルを示した レボセチリジンの反復投与毒性試験における主要所見は ラットの肝臓への影響およびイヌでの嘔吐であり これらの変化はセチリジンでも同投与量でほぼ同程度 / 同頻度に認められた これより レボセチリジンとセチリジンは概して同様の毒性プロファイルを示すと考えられ セチリジンと比較してレボセチリジンの投与により新たな毒性発現や毒性の増強がみられる可能性は低いと考えられた 遺伝毒性レボセチリジンの遺伝毒性について 一連の in vitro/in vivo 遺伝毒性試験 ( ネズミチフス菌および大腸菌を用いる復帰突然変異試験 マウスリンフォーマ TK 試験 ヒト培養リンパ球を用いる染色体異常試験ならびにマウス骨髄小核試験 ) の結果 レボセチリジンはいずれの試験においても陰性を示したことから レボセチリジンは遺伝毒性を有していないと考えられた 生殖発生毒性ラットおよびウサギを用いた胚 胎児発生に関する試験では レボセチリジンのそれぞれ 100 および 60mg/kg/ 日以上の群で一般状態の悪化および体重増加量 / 摂餌量への影響 ( ラットおよびウサギ ) および死亡 ( ウサギ ) などの母体毒性が観察された 胚 胎児発生への影響として ラットでは 200mg/kg/ 日群で胸骨分節未骨化の発現頻度に軽度の高値傾向がみられた この群では母動物の体重増加量 摂餌量の低値ならびに胎児体重の軽度の低値傾向を p. 18

23 伴っていたことから 本所見は母動物への影響に基づく胎児体重の低値に起因する変化と推察された ウサギでは 120mg/kg/ 日群で第 13 肋骨出現頻度の高値傾向が認められた したがって ラットおよびウサギの母動物に対する無毒性量はそれぞれ 50 および 30mg/kg/ 日 胚 胎児発生に対する無毒性量はそれぞれ 100 および 60mg/kg/ 日と推定された 比較対照として用いたセチリジン ( ラットおよびウサギでそれぞれ 200 および 120mg/kg/ 日 ) においても レボセチリジンと同様の母体毒性および胚 胎児への影響 ( ラットの胸骨分節未骨化の発現頻度の高値傾向およびウサギでの第 13 肋骨出現頻度の高値 ) が認められた いずれの試験においてもレボセチリジン群およびセチリジン群で催奇形性はみられなかった 以上より レボセチリジンおよびセチリジンは 生殖発生毒性試験においても 同様の毒性プロファイルを示し セチリジンと比較してレボセチリジンの投与により新たな毒性の発現や毒性の増強がみられる可能性は低いと考えられた 免疫毒性レボセチリジンの 75mg/kg/ 日までをラットに 13 週間経口投与しても 免疫機構に影響は認められなかった 不純物の毒性規格値で安全性確認の必要な閾値を超える不純物 ( 類縁物質 ) は 製剤では gsk002* であり 原薬では gsk005*( 不純物 A) gsk001*( 不純物 B) gsk004*( 不純物 C) gsk008* ( 不純物 D) および gsk002* の計 5 種類である なお gsk002* に関してはセチリジンの申請概要において安全性は十分評価されていると考えられたため それ以外の不純物の安全性について ラットの 4 および 13 週間反復投与毒性試験ならびに遺伝毒性試験 ( 細菌を用いる復帰突然変異試験およびマウス骨髄小核試験 ) に使用したバッチに含まれている不純物含量を基に評価した その結果 これらの試験の無毒性量または陰性用量における不純物の推定曝露量は臨床推奨用量投与時の推定最大曝露量を大きく上回っており 遺伝毒性試験においても異常はみられなかったことから 原薬中に含まれるこれらの不純物により 臨床使用時に危惧されるような有害作用または遺伝毒性が発現する可能性は低く いずれの不純物の安全性についても確認されていると判断した 以上より レボセチリジンの非臨床試験における毒性プロファイルは既承認薬であるセチリジンと概して同様であり レボセチリジンの投与による新たな毒性および毒性の増強は認められなかった このことから レボセチリジンの長期反復投与毒性 がん原性 受胎能および着床までの初期胚発生ならびに出生前 後の発生および母体の機能に関する影響については セチリジンの毒性試験データ ( セチリジン申請概要 ) により評価可能であると考えられた * 新薬承認情報提供時に置き換え p. 19

24 図表 図表は本文中に記載した 参考文献 RRLE99E1801,. In vitro interference study of ucb 28556, gsk002* and ucb P071 on protein and bile salts levels determination in urine of rats and Beagle dogs. UCB 社内資料. ;:. * 新薬承認情報提供時に置き換え p. 20

25 p 毒性試験概要表 毒性試験 : 一覧表 Test Article: Levocetirizine Type of Study Species and Strain Method of Duration of GLP Location in Doses (mg/kg/day) Testing Facility Report No. Administration Dosing Compliance CTD Single-dose toxicity Mouse, NMRI Oral, gavage Single 0, 240, 560, 1300, 3200 Yes UCB (Belgium) RRLE92C Rat, SD Oral, gavage Single 0, 240, 560, 1300, 3200 Yes UCB (Belgium) RRLE92D Dog, Beagle Oral, capsule Single 32, 100, 320 Yes UCB (Belgium) RRLE92C Repeat-dose toxicity Rat, SD OFA Oral, gavage 4 weeks 0, 25, 75, 225 Yes UCB (Belgium) RRLE95C /ref Rat, SD Oral, gavage 13 weeks 0, 4, 8, 25, 75 Yes (UK) RRLE92G Oral, gavage 13 weeks Levocetirizine; 0, 18.7, 37.5, 75 Yes (UK) RRLE98H Cetirizine; 37.5, 75 Oral, gavage 13 weeks Levocetirizine; 0, 18.7, 37.5, 75 Yes (UK) RRLE98F Cetirizine; 37.5, 75 Dog, Beagle Oral, capsule 4 weeks Levocetirizine; 0, 33.75, 67.5, 135/90 Yes UCB (Belgium) RRLE99J /ref Oral, capsule 13 weeks 0, 8, 25, 75 Yes (UK) RRLE92G Oral, capsule 13 weeks Levocetirizine; 0, 37.5, 75 Yes (UK) RRLE97F Cetirizine; 75 Genotoxicity Bacterial mutation S. typhimurium/ In vitro - -S9 up to 1000; +S9 up to 5000µg/plate Yes (UK) RRLE99K E. coli TK locus assay Mouse lymphoma In vitro - -S9/+S9 up to 400µg/mL Yes (UK) RRLE99K Chromosome aberration Human lymphocytes In vitro - -S9 up to 700, +S9 up to 700µg/mL Yes (UK) RRLE06B Micronucleus Mouse, CD-1 Oral, gavage Single 800mg/kg Yes (UK) RRLE92F Reproductive and Developmental Toxicity Embryofetal development Rat, SD Oral, gavage F: G6-15 0, 65, 130, 260 Yes (UK) RRLE92G /ref Rat, SD Oral, gavage F: G6-15 Levocetirizine; 0, 50, 100, 200 Yes (UK) RRLE93F Cetirizine; 200 Rabbit, NZW Oral, gavage F: G6-18 0, 23, 45, 90 Yes (UK) RRLE92G /ref Rabbit, NZW Oral, gavage F: G6-18 Levocetirizine; 0, 30, 60, 120 Yes (UK) RRLE93C Cetirizine; 120 Other toxicity studies Immunotoxicity Rat, SD Oral, gavage 13 weeks Levocetirizine; 0, 18.7, 37.5, 75 Cetirizine; 37.5, 75mg/kg Yes (UK)/ (France) RRLE98H Underlined doses correspond to the NOAEL, G=Day of gestation, :, :

26 p トキシコキネティクス : トキシコキネティクス試験一覧 Test Article: Levocetirizine Type of Study Test System Method of GLP Doses (mg/kg) Administration Compliance Report No. Location in CTD Single-dose toxicity Dog Oral, capsule 32, 100, 320, Yes RRLE92C week toxicity Rat Oral, gavage 0, 25, 75, 225 Yes RRLE95C /ref 13-week toxicity Rat Oral, gavage 0, 4, 8, 25, 75 Yes RRLE92G week toxicity Rat Oral, gavage Levocetirizine; 0, 18.7, 37.5, 75 Yes RRLE98H Cetirizine; 37.5, week toxicity Rat Oral, gavage Levocetirizine; 0, 18.7, 37.5, 75 Yes RRLE98F Cetirizine; 37.5, 75 4-week toxicity Dog Oral, capsule Levocetirizine; 0, 33.75, 67.5, 135/90 Yes RRLE99J /ref 13-week toxicity Dog Oral, capsule 0, 8, 25, 75 Yes RRLE92G week toxicity Dog Oral, capsule Levocetirizine; 0, 37.5, 75 Yes RRLE97F Cetirizine; 75 Embryofetal development Rat Oral, gavage 0, 65, 130, 260 Yes RRLE92G /ref Embryofetal development Rat Oral, gavage Levocetirizine; 0, 50, 100, 200 Yes RRLE93F Cetirizine; 200 Embryofetal development Rabbit Oral, gavage 0; 23, 45, 90 Yes RRLE92G /ref Embryofetal development Rabbit Oral, gavage Levocetirizine; 0, 30, 60, 120 Cetirizine; 120 Yes RRLE93C

27 p トキシコキネティクス : トキシコキネティクデータ一覧 Test Article: Levocetirizine Rat Rabbit Dog Human Dose C C max (µg/ml) AUC (µg hr/ml) C max (µg/ml) AUC (µg hr/ml) C max (µg/ml) AUC (µg hr/ml) max AUC (mg/kg/day) (µg/ml) (µg hr/ml) M F M F M F M F M F M F Combined Combined 5mg/day 1) b 1.2 b 3 b 2 b b 3.6 b 33 b 11 b 18.8 e 25.1 e 194 e 188 e c 17.1 c 68.4 c 41.8 c b 16.6 b 107 b 47 b 83.3 e 74.0 e 822 e 795 e h 12.4 h 89 h 41 h 30 NA 23.6 d NA NC f 99.1 f 1243 f 1393 f c 30.8 c 160 c 108 c 70.6 g 65.6 g 846 g 810 g 50 NA 31.4 a NA NC 60 NA 38.7 d NA NC f f 2670 f 2775 f b 89.0 b 441 b 386 b e e 2379 e 1934 e c 56.9 c 405 c 481 c 122 g 141 g 1680 g 1655 g h 44.8 h 387 h 199 h 100 NA 60.6 a NA NC 120 NA 95.7 d NA NC 135/90 2) f f 3114 f 2967 f 200 NA a NA NC h h 1005 h 1010 h NA: Not applicable, NC: Not calculated 1) From clinical Study A238: One week administration of levocetirizine 5 mg in 10M + 10F, 2) Reduced to 90mg/kg/day on Day 11 (females); Day 18 (males) Footnotes to overview of toxicokinetic data Note Report No. Type of Study Method of Administration Sampling timepoint AUC period a RRLE93F3001 Rat/Embryofetal development Oral, gavage Day 15 - b RRLE92G0902 Rat/13-week toxicity Oral, gavage Week c RRLE98F0401 Rat/13-week toxicity Oral, gavage Week d RRLE93C3005 Rabbit/Embryofetal development Oral, gavage Day 18 - e RRLE92G1003 Dog/13-week toxicity Oral, capsule Week f RRLE99J1401 Dog/4-week toxicity Oral, capsule Day 29 (males); Day 18 (females) 0-24 g RRLE97F0201 Dog/13-week toxicity Oral, capsule Week h RRLE95C1401 Rat/4-week toxicity Oral, gavage Day

28 p 毒性試験 : 被験物質 ( バッチごと ) 一覧 Test Article: Levocetirizine Batch No. Purity (%) Specified Impurities (%) A B C D Report Number(s) Type of Study D <0.1 <0.1 RRLE92C1003 Mouse single dose RRLE92D2104 Rat single dose RRLE92C1202 Dog single dose RRLE95C1401 Rat 4weeks RRLE92F1501 Mouse micronucleus test RRLE92B1303 Ames test (For evaluation of impurity) D < <0.1 <0.1 RRLE92G0902 Rat 13 weeks RRLE92G1003 Dog 13 weeks D <0.1 <0.1 <0.1 <0.1 RRLE92G0903 Rabbit pilot study RRLE92G0903 Rabbit range finding embryo-fetal RRLE93C3005 Rabbit embryo-fetal RRLE92G1001 Rat range finding embryo-fetal RRLE93F3001 Rat embryo-fetal D <0.1 <0.1 <0.1 <0.1 RRLE99J1401 Dog 4 weeks /99.3 <0.1 < <0.1 RRLE98H2402 Rat 13 weeks + 4 weeks recovery RRLE98F0401 Rat 13 weeks TK RRLE97F0201 Dog 13 weeks <0.1 <0.1 <0.1 <0.1 RRLE99K1101 Ames test RRLE99K1102 Mouse lymphoma <0.1 <0.1 <0.1 <0.1 RRLE06B1736 Chromosome aberration Impurity A: gsk005*, Impurity B: gsk001*, Impurity C: gsk004*, Impurity D: gsk008* * 新薬承認情報提供時に置き換え

29 単回投与毒性試験 p. 5 Species/ Strain Mouse, NMRI Rat, SD Dog, Beagle Method of Administration (Vehicle/ Formulation) Oral, gavage (distilled water/solution) Oral, gavage (distilled water/solution) Oral (gelatine capsule) Doses (mg/kg) 0, 240, 560, 1300, , 240, 560, 1300, , 100, 320 Gender and No/Group Maximum Nonlethal Dose (mg/kg) Approximate Lethal Dose (mg/kg) 5M, 5F 240 M/F: 560 (LD 50 M/F: 804) 5M, 5F 240 M/F: 560 (LD 50 M/F: 472) Noteworthy Findings 240mg/kg - quiet behaviour, arched back, half-closed eyelids and jerky breathing 560mg/kg - death occurred and, muscular weakness, piloerection and dyspnoea 1300mg/kg - ventral lying, closed eyelids and hypothermia, and macroscopic lesions related to treatment are hemorrhagic or congested stomach associated with hemorrhagic contents and congested intestine. The two female (1300mg/kg) examined microscopically showed necrotic glands in the stomach and one presented large multifocal necrotic areas in the liver. 240mg/kg - half-closed eyelids, jerky breathing and bradypnoea (female at 240mg/kg) 560mg/kg - death occurred and, ventral lying, jerks, muscular weakness, quiet behaviour and dyspnoea, and congested or hemorrhagic mucosa associated with hemorrhagic content in stomach and intestine contained sanguinolent mucus. 1300mg/kg - cell necrosis in the mucosa of the glandular stomach. 1M, 1F >320 M/F: >320 32mg/kg - salivation. 100mg/kg - vomiting and diarrhoea. Toxicokinetics for doses of 32, 100, 320mg/kg C max (µg/ml): 69.0, 50.0, AUC 0-48 (µg hr/ml): 830, 988, 2613 Test Article: Levocetirizine Report No. Location in CTD RRLE92C RRLE92D RRLE92C

30 反復投与毒性試験 : 重要な試験以外の試験 Species/ Strain Rat, SD Method of Administration (Vehicle/ Formulation) Duration of Dosing Doses (mg/kg) Oral, gavage 4 weeks Gender and No/Group (Recovery) 12M/F (6M/F), 12M/F 12M/F 12M/F (6M/F) Noteworthy Findings 225 mg/kg/day: mortalities and clinical signs, decreased bodyweight gain and food consumption, increased liver weight, clinical pathology changes and renal and hepatic histomorphological changes (rays of basophilic dilated cortical tubules or hepatocellular enlargement and fat deposition). They were more marked in males than in females. All the changes were at least partially reversible within 4 weeks. Some of these changes were also observed at 75 mg/kg/day. Systemic exposure levels were overall higher in males than in females. No toxic effect level can be determined at 25 mg/kg/day in males and females. Report No. RRLE95C1401 Location in CTD /ref p. 6 Dog, Beagle Oral, capsule 4 weeks /90* 3M/F (1M/F) 3M/F 3M/F 3M/F (1M/F) *: dose level reduced to 90 mg/kg/day from Day 11 (females) or Day 18 (males) 135 mg/kg/day: deaths among females (2/4), clinical signs in both sexes (principally emesis, tremors and hypersalivation) and, in females markedly reduced food consumption associated with severe bodyweight loss. Macroscopic findings included impaction in the gastrointestinal tract (jejunum and/or colon) and red spots in the stomach mucosa. Microscopic changes were seen in the stomach of a few male dogs (mucosal atrophy and erosion, hemorrhage and/or inflammation) and in the trachea (mucosal atrophy, hyperplasia/disorganization, granulocytic inflammation and/or loss of goblet cells) mg/kg/day: emesis, lower bodyweight and food consumption, faecal impaction in the colon, and histopathological changes in the stomach and trachea comparable to those seen in the high dose group mg/kg/day: a slightly higher incidence of emesis and microscopic changes in the gastrointestinal tract (mucosal atrophy and/or hemorrhage in the stomach and ileum) of a few animals. A no observed effect level could not be established for any of the test substances. RRLE99J /ref

31 反復投与毒性 ラット 13 週間反復投与毒性試験 Report Title: Toxicity to rats by repeated oral administration for 13 weeks followed by a 4-week recovery period Test Article: Levocetirizine Species/Strain: Rat, SD Duration of Dosing: 13 weeks Report No. RRLE92G0902 Initial Age: 5-6 weeks at study initiation Duration of Postdose: 4 weeks Location in CTD: Date of First Dose: 19 Method of Administration: Oral (gavage) Vehicle/Formulation: Distilled water/solution GLP Compliance: Yes Special Features: Potential effect on hepatic drug metabolizing enzymes investigated No Observed Adverse Effect Level: 75mg/kg/day p. 7 Daily Dose (mg/kg) 0 (Control) Gender M F M F M F M F M F No. of Animals Main /Recovery groups 10/5 10/5 10/0 10/0 10/0 10/0 10/0 10/0 10/5 10/5 Toxicokinetic groups Toxicokinetics C max (µg/ml) NA NA AUC 0-24 (µg hr/ml) NA NA No. died or sacrificed in extremis Clinical signs Incidence of salivation (%) (Main and recovery combined) Weeks Weeks Weeks Weeks Weeks Weeks Weeks Bodyweights Week Week Week Week Recovery Week NA NA NA NA NA NA Week NA NA NA NA NA NA Bodyweight gain (g) Weeks * * Weeks NA NA NA NA NA NA 51 18

32 p ラット 13 週間反復投与毒性試験 ( 続き ) Daily Dose (mg/kg) 0 (Control) Gender M F M F M F M F M F No. of Animals Main /Recovery groups 10/5 10/5 10/0 10/0 10/0 10/0 10/0 10/0 10/5 10/5 Toxicokinetic groups Food consumption Water consumption Ophthalmoscopy Haematology Biochemistry AST (mu/ml) Week * K 58 61* K 59 62** K Week NA NA NA NA NA NA Urinalysis ph Week * ** 6.1* Week NA NA NA NA NA NA Protein (mg/dl) Week * * ** 102** Week NA NA NA NA NA NA Organ weights Liver, adjusted (g) ** ** 10.3 Macroscopic findings Microscopic findings Liver - Examined Hepatocyte enlargement, centrilobular, minimal Hepatocyte vacuolation, centrilobular, minimal Hepatocyte fat, centrilobular Trace Minimal : No noteworthy findings, NA: Not applicable *: p<0.05, **: p<0.01 in comparison with controls (Williams test), +: p<0.05 in comparison with controls (Student s t test), K: Kruskal-Wallis analysis of mean ranks applied

33 ラット 13 週間反復投与比較毒性試験 (1) Report Title: Toxicity to rats by repeated oral administration for 13 weeks followed by a 4 week recovery phase in comparison Test Article: Levocetirizine/Cetirizine with ucb P071 Species/Strain: Rat, SD Duration of Dosing: 13 weeks Report No. RRLE98H2402 Initial Age: Age: 5-6 weeks at study initiation Duration of Postdose: 4 weeks Location in CTD: Date of First Dose: 19 Method of Administration: Oral (gavage) Vehicle/Formulation: Distilled water/solution GLP Compliance: Yes Special Features: Rectal temperature, blood lymphocyte subsets counts and immunoglobulin levels, hepatic drug metabolizing enzymes also investigated Conclusion: Levocetirizine and cetirizine showed generally similar toxicological profiles p. 9 Daily Dose (mg/kg) Control Levocetirizine Cetirizine Gender M F M F M F M F M F M F No. of Animals Main/Recovery groups 10/5 10/5 10/0 10/0 10/0 10/0 10/5 10/5 10/0 10/0 10/5 10/5 Toxicokinetic groups Toxicokinetics a No. died or sacrificed in extremis 0 1 b c d Clinical signs Bodyweights Food consumption Water consumption Ophthalmoscopy Rectal temperature ( C) Week 4 Pre-dose h after dosing * Week 8 Pre-dose h after dosing ** ** 36.9* 36.7** 37.0* Week 13 Pre-dose * h after dosing * ** Haematology Biochemistry ALT (U/L) AST (U/L) Urinalysis Organ weights Macroscopic findings

34 ラット 13 週間反復投与比較毒性試験 (1)( 続き ) Daily Dose (mg/kg) Control Levocetirizine Cetirizine Gender M F M F M F M F M F M F No. of Animals Main/Recovery groups 10/5 10/5 10/0 10/0 10/0 10/0 10/5 10/5 10/0 10/0 10/5 10/5 Toxicokinetic groups Microscopic findings Liver Examined Minimal hepatocyte centrilobular hypertrophy # # 0 Centrilobular fat deposition Trace Minimal Moderate : No noteworthy findings, a: Original data obtained was suspect; TK values re-assessed in repeated study (report RRLE98F0401 [see table ]), b: One control female (No. 76) died following routine blood sampling during Week 13, c: One satellite female (No. 203) was found dead during Week 11, d: One female (No. 101) was found dead and partially cannibalised in Week 8. +: p<0.05, ++: p<0.01 (Student's t test) - group compared to concurrent control value, *: p<0.05; **: p<0.01 (Williams' test), #: p<0.05 (Fisher s Exact Test) p. 10

35 ラット 13 週間反復投与比較毒性試験 (2) Report Title: 13 week oral toxicokinetics study in the rat in comparison with ucb P071. Test Article: Levocetirizine/Cetirizine Species/Strain: Rat, SD Duration of Dosing: 13 weeks Report No. RRLE98F0401 Initial Age: 5-6 weeks at study initiation Duration of Postdose: None Location in CTD: Date of First Dose: 19 Method of Administration: Oral (gavage) Vehicle/Formulation: Distilled water/solution GLP Compliance: Yes Special Features: This repeat study was conducted to provide toxicokinetic and rectal temperature data due to inconsistencies in data in previous study (see Table ). Conclusion: Levocetirizine and cetirizine showed generally similar toxicological profiles p. 11 Daily Dose (mg/kg) Control Levocetirizine Cetirizine Gender M F M F M F M F M F M F No. of Animals Main groups Toxicokinetics, Week 13 ucb C max (µg/ml) NA NA AUC 0-12 (µg hr/ml) NA NA gsk002 # C max (µg/ml) NA NA NA NA NA NA NA NA AUC 0-12 (µg hr/ml) NA NA NA NA NA NA NA NA No. died or sacrificed in extremis a Clinical signs Salivation b Week Week Week Week Week Bodyweights Food consumption Rectal temperature ( C) Week 4 Pre-dose h after dosing Week 8 Pre-dose h after dosing Week 12 Pre-dose * * * h after dosing Toxicokinetic evaluation report RRLE99G1201, -: No noteworthy findings, NA: Not applicable, a: One female rat (No.49) died following the blood sampling procedure in Week 13. This death was not considered to be treatment related. b: Incidence of salivation = number of animals in group showing sign / number of animals in group x 100% *: p<0.05 (Williams' test) compared to the control group # 新薬承認情報提供時に置き換え

36 イヌ 13 週間反復投与毒性試験 Report Title: Toxicity to dogs by repeated oral administration for 13 weeks Test Article: Levocetirizine Species/Strain: Dog, Beagle Duration of Dosing: 13 weeks Report No. RRLE92G1003 Initial Age: 20 to 23 weeks at study initiation Duration of Postdose: None Location in CTD: Date of First Dose: 19 Method of Administration: Oral, gelatine capsule Vehicle/Formulation: Gelatine capsule No Observed Adverse Effect Level: 8mg/kg/day GLP Compliance: Yes p. 12 Daily Dose (mg/kg) 0 (Control) Gender M F M F M F M F No. of Animals Main groups Toxicokinetics C max (µg/ml), Day 1 NA NA C max (µg/ml), Week 13 NA NA AUC 0-24 (µg hr/ml), Day 1 NA NA AUC 0-24 (µg hr/ml), Week 13 NA NA No. died or sacrificed in extremis Clinical signs Vomiting (%) a < < Bodyweights Food consumption Ophthalmoscopy Electrocardiography Haematology Biochemistry Urinalysis Volume (ml) Week Week Week ph Week Week Week * * Specific gravity Week Week * Week Protein (mg/dl) Week Week ** 66** Week ** 78* 66**

37 イヌ 13 週間反復投与毒性試験 ( 続き ) Daily Dose (mg/kg) 0 (Control) Gender M F M F M F M F No. of Animals Main groups Organ weights Macroscopic findings Microscopic findings : No noteworthy findings, NA: Not applicable, a: Maximum possible group incidence - males: 364, females: 364, *: p<0.05, **: p<0.01 (Williams' test) +: p<0.05 (Student's 't' test) p. 13

38 イヌ 13 週間反復投与比較毒性試験 Report Title: Toxicity to dogs by repeated oral administration for 13 weeks in comparison with ucb P071. Test Article: Levocetirizine/Cetirizine Species/Strain: Dog, Beagle Duration of Dosing: 13 weeks Report No. RRLE97F0201 Initial Age: 21 to 36 weeks at study initiation Duration of Postdose: None Location in CTD: Date of First Dose: 19 Method of Administration: Oral, gelatine capsule Vehicle/Formulation: Gelatine capsule Special Features: Rectal temperature; faecal occult blood; hepatic drug metabolizing enzymes. GLP Compliance: Yes Conclusion: Levocetirizine and cetirizine showed generally similar toxicological profiles p. 14 Daily Dose (mg/kg) Control Levocetirizine Cetirizine Gender M F M F M F M F No. of Animals Main groups Toxicokinetics ucb C max (µg/ml), Day 1 NA NA C max (µg/ml), Week 13 NA NA AUC 0-24 (µg hr/ml), Day 1 NA NA AUC 0-24 (µg hr/ml), Week 13 NA NA gsk002* C max (µg/ml), Day 1 NA NA NA NA NA NA C max (µg/ml), Week 13 NA NA NA NA NA NA AUC 0-24 (µg hr/ml), Day 1 NA NA NA NA NA NA AUC 0-24 (µg hr/ml), Week 13 NA NA NA NA NA NA No. died or sacrificed in extremis a 0 0 Clinical sign Vomiting (%) b 0 < c 13 9 Bodyweights Food consumption Ophthalmoscopy Electrocardiography Rectal temperatures ( C) Pre-dose c Week 4 0h c h c Week 8 0h c h * ** 37.6 c Week 12 0h c h c * 新薬承認情報提供時に置き換え