PIPC CTM CFPM FMX CPDX A/BT AZT MEPM GM FM T Mck 35 3 微量液体希釈法腸内細菌科 I Mkp 75 > > > 3 > > Mmm 0 > > > 3 > 3 > I I 班により管程度の違いがある薬剤もありますカテゴリーはブレイクポイント別表

Size: px

Start display at page:

Download "PIPC CTM CFPM FMX CPDX A/BT AZT MEPM GM FM T Mck 35 3 微量液体希釈法腸内細菌科 I Mkp 75 > > > 3 > > Mmm 0 > > > 3 > 3 > I I 班により管程度の違いがある薬剤もありますカテゴリーはブレイクポイント別表"

しょうりことじ
5 years ago
Views:

福臨技微生物部門研修会 Feb, 07 美萩野臨床医学専門学校薬剤感受性測定について実習

&Etest おまけ :CIM test, β-lactamase type 推定ディスク

とする理由を説明できることを使用するときはとすること > μg/ml と μg/ml

とする 5 株のを判定しカテゴリーをつける表記解説とは最小発育阻止濃度すなわち (-)

一番低い値 μg/ml がとなる同様に CDT は μg/ml, は μg/ml となるは

の両方の可能性があるしたがって (-) ならば 3 μg/ml + ならそれ以上となる

したがって + ならば μg/ml (-) ならばそれ以下となるしたがって < μg/ml

1 福臨技微生物部門研修会 Feb, 07 美萩野臨床医学専門学校薬剤感受性測定について実習 A: 微量液体希釈法実習 B: ディスク拡散法実習 C: 酵母様真菌薬剤感受性テスト ATY &Etest おまけ :CIM test, β-lactamase type 推定ディスク村谷哲郎実習 A 微量液体希釈法実習 A の目的 ( 微量液体希釈法 ). 目視判定し判定用紙に記入する. 判定結果を数値として記入する 3. 感受性カテゴリー記入する菌の発育を認めない最小濃度をとして記載するすべてのウェルに発育を認めない時は μg/ml と記載するは測定最小濃度とする理由を説明できること < は間違いである理由を説明できること実習内容あらかじめ前日に実施した黄色ブドウ球菌株と腸内細菌科 3 株の計すべてのウェルに発育を認めた時は > μg/ml と記載するは測定最大濃度 > とする理由を説明できることを使用するときはとすること > μg/ml と μg/ml は同義であることを説明できること MA と判定された株は β-lactam のカテゴリーをとする 5 株のを判定しカテゴリーをつける表記解説とは最小発育阻止濃度すなわち (-) となった最も低い濃度となりますしたがって下記の FPM は,,, が (-) なので一番低い値 μg/ml がとなる同様に CDT は μg/ml, は μg/ml となるは測定最高能である μg/ml で発育しており 3 μg/ml を実施した場合 (-) または + の両方の可能性があるしたがって (-) ならば 3 μg/ml + ならそれ以上となるしたがって μg/ml は不正解となる通常は > μg/ml と記載しますが 3 μg/ml と同義であり正解であるが数学的には矛盾が生じるは測定最小濃度 μg/ml で発育を認めていないので μg/ml を実施した場合 (-) または + の両方の可能性があるしたがって + ならば μg/ml (-) ならばそれ以下となるしたがって < μg/ml は不正解 μg/ml と記載しなければならない > CFX MPIPC FMX GM ABK 微量液体希釈法 taphylococcus aureus IA53 > ~ > MA ATCC 9 MA,, 3 班の違いにより管の差はあります IA53 EM CLDM 0. VCM TEIC LZD FM 3 T ATCC 9 3

PIPC CTM CFPM FMX CPDX A/BT AZT MEPM GM FM T Mck 35 3 微量液体希釈法腸内細菌科 I Mkp 75 > > > 3 > > Mmm 0 > > >

薬剤の判定腸内細菌科 7 株 Acinetobacter 株実習 B の目的ディスク拡散法ディスクは必須アイテム /CVA AZT. 実際にディスクを判定してみる.

感受性パターンから β-lactamase タイプを推定する MA AZT デジタルは便利ノギスの扱い方楕円の場合の判定方法ムコイド部分を除外して測定 β-lactamase type 推定のための

阻害剤を用いた確認試験は求められるがに変換することはできない結果的にカテゴリーのみの報告となる通常は完全手作業ノギスを用いた目視判定結果は手入力操作は簡単薬剤の組み合わせ自由

FLX, 緑膿菌 CL, PL-B その他グラム陰性桿菌すべてなしブドウ球菌 MPIPC, VCM, TEIC, DAP 腸球菌属 DAP 肺炎球菌 β-lactamのほとんど嫌気性菌すべて

2 PIPC CTM CFPM FMX CPDX A/BT AZT MEPM GM FM T Mck 35 3 微量液体希釈法腸内細菌科 I Mkp 75 > > > 3 > > Mmm 0 > > > 3 > 3 > I I 班により管程度の違いがある薬剤もありますカテゴリーはブレイクポイント別表に従って判定実習 B ディスク拡散法 00 mm シャーレを用いた KB ディスク薬剤の判定腸内細菌科 7 株 Acinetobacter 株実習 B の目的ディスク拡散法ディスクは必須アイテム /CVA AZT. 実際にディスクを判定してみる. 判定基準と照合しカテゴリーをつける 3. 感受性パターンから β-lactamase タイプを推定する MA AZT デジタルは便利ノギスの扱い方楕円の場合の判定方法ムコイド部分を除外して測定 β-lactamase type 推定のための Key drug LMX LMX MA McFarland = を綿棒で 0 3 方向から塗布判定はノギス使用液体微量希釈法では困難な薬剤追加ができるデータ疑義の際の確認相乗作用誘導耐性を確認できる図は EBL+IMP- 同時産生株ディスク拡散法の長所短所液体微量希釈法のパネルに搭載されていない薬剤使用頻度は低いが特殊な耐性菌にのみ使用する薬剤微量液体希釈法の疑わしい結果の確認液体培地で発育しない株の感受性測定相乗作用の確認耐性機序の確認誘導耐性阻害剤を用いた確認試験は求められるがに変換することはできない結果的にカテゴリーのみの報告となる通常は完全手作業ノギスを用いた目視判定結果は手入力操作は簡単薬剤の組み合わせ自由ディスクは安価ただし特殊培地を常備することは事実上困難 5% 羊脱繊維血液加 CA-MHA HTM agar GC agar ディスク拡散法の判定基準がない (あり) M00-7 腸内細菌科 FLX, 緑膿菌 CL, PL-B その他グラム陰性桿菌すべてなしブドウ球菌 MPIPC, VCM, TEIC, DAP 腸球菌属 DAP 肺炎球菌 β-lactamのほとんど嫌気性菌すべて M5Ed3 Abiotrophia & Granulicatella, Aerococcus, Bacillus, Corynebacterium & related coryneform bacteria, Erysipelothrix rhusiopathiae, Gemella, HACEK, Helicobacter pylori, Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Listeria monocytogenes, Micrococcus, Pediococcus, othia mucilaginosa,

9±3 7±3 ±3 9±3 3±3 3 9±3 9±3 ±3 33± ±3 3±3 or I or I Escherichia coli

DHA-(AmpC) および HV-(EBL) 産生株 CP T >5 > > 5 0 I 0 30 0 30 3 ディスク拡散法 No.

AmpC と考える CP T 5 > 0. 0. >5 0. 0. 7 30 7 9 3 3 9 7 33 7 ディスク拡散法 No.

EBL と誘導型 AmpCβ-lactamase 産生株と考えられる -M-, DHA- 産生株 CP T >5 > 3 > > 9 3

3 ディスク拡散法 No. ディスク拡散法 No. E. coli ATCC59 薬剤はから時計回りに表に示す順番で並んでいるすべて感受性 CP T ±3 7±3 ±3 9±3 3±3 3 9±3 9±3 ±3 33± ±3 3±3 or I or I Escherichia coli Mec 50, の両方が高いことより Metallo-β-lactamase または EBL+ AmpCβ-lactamase 産生を疑う DHA-(AmpC) および HV-(EBL) 産生株 CP T >5 > > 5 0 I ディスク拡散法 No. 3 K. pneumoniae Mkp 75, とも低くも低いがは耐性 XA- を疑う XA- 産生株 CP T >5 5 3 > 7 I 0 7 ディスク拡散法 No. Enterobacter aerogenes Mea 79 のみ耐性誘導型 Class Cβ-lactamase 菌種より染色体性 AmpC と考える CP T 5 > > ディスク拡散法 No. 5 Proteus mirabilis Mpm 039 感受性耐性耐性低感受性感染症法の基準を満たすため CE となる -M 型 EBL と誘導型 AmpCβ-lactamase 産生株と考えられる -M-, DHA- 産生株 CP T >5 > 3 > > I I ディスク拡散法 No. Escherichia coli Mec 79, セファロスポリンセファマイシンカルバペネムがすべて高度耐性 Metalloβ-lactamase KPC type β-lactamaseなどcpe と推測 NDM- 産生株 CP T >5 >5 > >5 >5 > >5 3 > 7 5 I

>5 >5 > > > >5 3 > 7 3 I 9 Acinetobacter baumannii Mab 035 CP T >5 >5 > > > > 3 >5 7 β-lactamase typeを推定するために必要なkey drug

AmpCβ-lactamase に比較的安定 EBL に安定 AmpCβ-lactamase の好誘導基質 AmpCβ-lactamase の好基質 AZT Metallo-β-lactamase に安定 MEPM CPE の好基質

β-lactamaseの推定は可能となる実習 C ATY & Etest 実習 C の目的 ATY &Etest 主な抗真菌薬. 酵母様真菌薬剤感受性検査 ATY を判定してみる.

薄い部分がある場合抗真菌薬 Amphotericin B Flucytosine Miconazole Fluconazole Itraconazole Micafungin Voriconazole Caspofungin

4 ディスク拡散法 No. 7 ディスク拡散法 No. Escherichia coli Mel 7333, セファロスポリンセファマイシンカルバペネムがすべて高度耐性 Metalloβ-lactamase KPC type β-lactamase など CPE と推測 KPC- 産生株 CP T >5 >5 > > > >5 3 > 7 3 I 9 Acinetobacter baumannii Mab 035 CP T >5 >5 > > > > 3 >5 7 β-lactamase typeを推定するために必要なkey drug PIPC, TAZ により阻害を受ける β-lactamase XA- の推定 TEM および HV type EBL の好基質 Class B metallo-β-lactamase の好基質 CP -M type β-lactamase の好基質 AmpCβ-lactamase に比較的安定 EBL に安定 AmpCβ-lactamase の好誘導基質 AmpCβ-lactamase の好基質 AZT Metallo-β-lactamase に安定 MEPM CPE の好基質 β-lactamase 阻害剤キレート剤 CVA クロキサシリン 3 アミノフェニルボロン酸アビバクタム今回ディスク拡散法に選択された薬剤以外に AZT, /CVA, CP/CVA を入れれば分離頻度の高い広域 β-lactamaseの推定は可能となる実習 C ATY & Etest 実習 C の目的 ATY &Etest 主な抗真菌薬. 酵母様真菌薬剤感受性検査 ATY を判定してみる.Etest を判定してみる完全発育阻止と 50% 発育阻止の薬剤の判定を把握するトレーリング発育株の決定法とその理由を習得する CLI の判定法と ATY の判定法の違いを理解する Etest の判定方法を理解する左右の値が異なる場合薄い部分がある場合抗真菌薬 Amphotericin B Flucytosine Miconazole Fluconazole Itraconazole Micafungin Voriconazole Caspofungin Ketoconazole Terbinafine Efinaconazole 略号 L-AMB (F-) VCZ CPFG KCZ EFCZ 和名アムホテリシン B フルシトシンミコナゾールフルコナゾールホスフルコナゾールイトラコナゾールミカファンギンボリコナゾールカスポファンギンケトコナゾールテルビナフィンエフィナコナゾール商品名ファンギゾン注射用 /D アムビゾーム点滴静注用アンコチル錠フロリード F 注 / ゲル / 膣錠ジフルカンカプセル / 静注液プロジフ静注液イトリゾールカプセル / 注ファンガード点滴用ブイフェンド錠 / 静注用カンサイダス点滴静注用ニゾラールクリームラミシール錠クレナフィン爪外用液

5 菌量培養温度培地 CPFG VCZ 測定方法および判定方法の比較 ATY( 極東 ) DP( 栄研 ) + レサズリン時間完全発育阻止時間完全発育阻止時間 50% 発育阻止および時間 50% 発育阻止設定なし約 0 3 cfu/ml 35 PMI0 CLI 又は時間完全発育阻止時間 50% 発育阻止 EUCAT 約 0 5 cfu/ml +% glucose ~ 時間完全発育阻止 ~ 時間 50% 発育阻止設定なし抗真菌薬のブレイクポイントとカテゴリー M 年抗菌薬 Amphotericin B Fluconazole Itraconazole Miconazole Voriconazole Micafungin Flucytosine ( 感受性 ) ブレイクポイント -DD* -3 ~ I( 中間 ) ~ ( 耐性 ) 3 赤字は EUCAT その他は CLI(M7-3) のブレイクポイント *DD: 用量依存的感受性 CLI M7-(0 年月 ) で改訂された Fluconazole のブレイクポイントとカテゴリー CLI M7-(0 年月 ) で改訂された Voriconazole のブレイクポイントとカテゴリー菌種 C. albicans C. glabrata C. krusei C. parapsilosis C. tropicalis ( 感受性 ) ブレイクポイント -DD* 3 I( 中間 ) ( 耐性 ) 菌種 C. albicans C. glabrata C. krusei C. parapsilosis C. tropicalis ( 感受性 ) ブレイクポイント -DD* I( 中間 ) ( 耐性 ) M7-3 *DD: 用量依存的感受性 -3 M7-3 *DD: 用量依存的感受性 CLI M7-(0 年月 ) で改訂された Micafungin のブレイクポイントとカテゴリー菌種 C. albicans C. glabrata C. krusei C. parapsilosis C. tropicalis C. guilliermondii M7-3 ( 感受性 ) 0.0 *DD: 用量依存的感受性ブレイクポイント -DD* I( 中間 ) 0. ( 耐性 ) VCZ ATY 最終判定 Candida parapsilosis 0.03 Candida glabrata

6 酵母様真菌薬剤感受性試験 Etest Candida glabrata hr hr VCZ hr hr Etest は抗菌剤が連続 5 段階の濃度勾配にコーティングされているプラスチックのストリップです独自の革新的なドライケミストリー技術を用いて抗菌剤および抗真菌剤の最少発育阻止濃度 () を正確に測定します Etest は 5 倍希釈系列のを測定する作業効率の高い製品として認められています Etest では多数の抗菌剤をラインアップしており好気性菌だけでなく栄養要求の厳しい菌である肺炎球菌ピロリ菌髄膜炎菌淋菌嫌気性菌酵母様真菌などの検査が可能です班によりやや異なりますシスメックス HP より特殊なラインナップ Etest 一般細菌 5 年間有効 7 種類 ( 同一薬剤で異なる濃度設定あり ) TGC, DAP, MPC, CL, PCM, MNZ, QP/DP, MUP, MFLX, FP, TB Etest の結果 No. No. 酵母様真菌 5 年間有効,,,,, VCZ, KCZ, CPFG PMI0 培地 (L- グルタミン添加重炭酸無添加 )+ MP(0.5mol/L)+% グルコース +.5% Bactoagar (ph7.0±0.) 抗結核薬 5 年間有効 INH, EB, ETH, 7H 寒天培地有効期間はパックや薬剤により多少異なる左 μg/ml 右.5 μg/ml 左 μg/ml μg/ml μg/ml 右 3 μg/ml 班によっては若干の違いがありました Etest の結果 Enterococcus faecium/vanb Enterococcus faecalis/vanb No. 3 No. CIM test 今回は時間が余った場合のために用意したのみです月 5 日 ( 水 ) の北九州地区の勉強会で詳細をお話します被検菌を TB で一夜培養菌液に MEPM ディスクを入れ時間インキュベートエーゼで MEPM ディスクを引き出す管壁で余分な液体培地を除去する左 3 右左 3 μg/ml 右 μg/ml No. は班によっては μg/ml でしたディスポエーゼでもよいがピンセットの方が普段慣れているはず E. coli ATCC59 を塗布した MHA に載せる通常のディスク拡散法と同様 35 で培養する

coli ATCC 59 non-producer K. pneumoniae Mkp MEPM 0.

カルバペネマーゼ陽性 : < 5mm または mm の阻止円中にコロニー形成のみ Carbapenemase 検出

判定保留 : ~mm PC など別法で確認 β-lactamase typte 推定ディスク ( 関東化学 )

阻害剤ディスク D: ファロペネム +AmpC 阻害剤ディスク E: テモシリン +MBL 阻害剤 H N

penicillin N CH EBL を含む Class A β-lactamase に安定

coli ATCC 59 FPMμg/ml K. pneumoniae Mkp KPC-, FPM µg/ml E.

7 C. koseri Mck 35 IMP-, MEPM μg/ml E. coli Mec 79 NDM-, MEPM 3 μg/ml CIM test E. coli ATCC 59 non-producer K. pneumoniae Mkp MEPM 0.0μg/ml KPC-, MEPM μg/ml 3 mm. 35 で - 時間培養後判定する判定 9. を測定する. カルバペネマーゼ陽性 : < 5mm または mm の阻止円中にコロニー形成のみ Carbapenemase 検出と報告する. カルバペネマーゼ陰性 : 9mm Carbapenemase 非検出と報告する 3. 判定保留 : ~mm PC など別法で確認 β-lactamase typte 推定ディスク ( 関東化学 ) ディスク A: ファロペネムディスク B: ファロペネム +MBL 阻害剤ディスク C: ファロペネム +KPC 阻害剤ディスク D: ファロペネム +AmpC 阻害剤ディスク E: テモシリン +MBL 阻害剤 H N ファロペネム EBL に安定 CH HC C H C N H テモシリン CH 3 -methoxy penicillin N CH EBL を含む Class A β-lactamase に安定 β-lactamase type 推定ディスク ( 関東化学 ) E. coli ATCC 59 FPMμg/ml K. pneumoniae Mkp KPC-, FPM µg/ml E. cloacae Mel 577 -M-5, FPM μg/ml 参加者の皆さんお疲れ様でした! A B E D C E. coli Mec E. coli Mec 79 E. cloacae Mel 7 IMP-, FPM µg/ml NDM-5, FPM > µg/ml DHA-, HV-, FPM µg/ml

ｽﾗｲﾄﾞﾀｲﾄﾙなし

ｽﾗｲﾄﾞﾀｲﾄﾙなし第 4 回ひびき臨床微生物シンポジュウム June 24,27, 港ハウス感受性検査を読む ( 同定検査結果確認やスクリーニング検査と捉えて ) ( 株 ) キューリン小林とも子キューリン微生物検査課塗抹鏡検グラム染色分離培養検査血液 BTB, エッグーヨーク報告書作成結果承認同定検査 VITEK TSI,LIM クリスタル NF 薬剤感受性検査 MIC2 ディスク法薬剤感受性結果 (

PIPC CTM CFPM FMX CPDX A/BT AZT MEPM GM FM T Mck 35 3 微量液体希釈法腸内細菌科 I Mkp 75 > > > 3 > > Mmm 0 > > > 3 > 3 > I I 班により 管程度の違いがある薬剤もあります カテゴリーはブレイクポイント別表

PIPC CTM CFPM FMX CPDX A/BT AZT MEPM GM FM T Mck 35 3 微量液体希釈法腸内細菌科 I Mkp 75 > > > 3 > > Mmm 0 > > > 3 > 3 > I I 班により管程度の違いがある薬剤もありますカテゴリーはブレイクポイント別表