スライド 1

Flow PRA 法の検査状況の解析 福岡赤十字病院 検査部 移植検査課 / 輸血細胞治療部 金本人美

参加施設数 -Flow PRA- Screening ClassⅠ 25 施設 ClassⅡ 24 施設 Single antigen ClassⅠ 2 施設 ClassⅡ 2 施設 18th 17th Screening ClassⅠ 22 施設 ClassⅡ 20 施設 Single antigen ClassⅠ 4 施設 ClassⅡ 3 施設

参加部門内訳 -Flow PRA- 18 ~ 重複 ~ 臓器 - 輸血 - 造血 3 施設臓器 - 輸血 - 造血 2 施設臓器 - 輸血 - 造血 2 施設 10 6 0 臓器移植輸血関連造血細胞 その他

Lab ID 輸血関連臓器移植造血細胞その他 I II 26S03 16 18 26S04 16 18 26S05 16 18 26S06 16 18 I II 1-4 5 6 7 1-4 26S09 16 18 13.1 10 11 10.1 11 26S10 16 18 26S18 18 18 26S22 16 17.1 26S24 16 18 26S25 16 26S26 15.1 18 26S27 16 18 26S30 15 18 26S31 16 18 26S32 16 18 26S33 16 18 26S34 16 18 26S35 16 18 13 11 26S36 16 18 26S42 16 18 26S45 16 18 26S46 16 18 FlowPRA Screening Single antigen 26S50 16 18 26S52 16 18 26S55 16 18 25 10 18 6 0 25 24 2 1 1 1 2

試薬キットの使用期限 Lot Screening ClassⅠ Lot.15 使用期限切れ 偽陰性 偽陽性の原因となる 受領後 キットの箱を開封せず -80 ~-65 フリーザー保管 箱に記載された有効期限は安定 解凍後 試薬 2 ~5 保管し 一度解凍したビーズ FITC は再凍結しない解凍したビーズは 3 ヵ月または有効期限内 Wash Buffer FITC は 12 ヵ月または有効期限内

測定機器 48% 52% EpicsXL EPICS XL, 3, 12% FC500 FC500, 4, 16% Calibur, 8, 32% FACS Calibur NAVIOS, 5, 20% CantoII, 5, 20% Navios FACS Canto2

スコア比較判定結果記入表 Screening 検体別抗体の有無 ( 有 =8, 無 =1) 抗原 /ID 2601 2602 2603 2604 Class I Class II 記載漏れ 記載漏れ lab CLASS Ⅰ CLASS Ⅱ 2601 2602 2603 2604 2601 2602 2603 2604 26S03 8 8 8 8 1 8 8 8 26S04 8 8 8 8 1 8 8 8 26S05 8 8 8 8 1 8 8 8 26S06 8 8 8 8 1 8 8 8 26S09 8 8 8 8 1 8 8 8 26S10 8 8 8 8 1 8 8 8 26S18 8 8 8 8 1 8 8 8 26S22 8 8 8 8 1 8 8 8 26S24 8 8 8 8 1 8 8 8 26S25 8 8 8 8 26S26 8 8 8 8 1 8 8 8 26S27 8 8 8 8 1 8 8 8 26S30 8 8 8 8 1 8 8 8 26S31 8 8 8 8 1 8 8 8 26S32 8 8 8 8 1 8 8 8 26S33 8 8 8 8 1 8 8 8 26S34 8 8 8 8 1 8 8 8 26S35 8 8 8 8 1 8 8 8 26S36 8 8 8 8 1 8 8 8 26S42 8 8 8 8 1 8 8 8 26S45 8 8 8 8 1 8 8 8 26S46 8 8 8 8 1 8 8 8 26S50 8 8 8 8 1 8 8 8 26S52 8 8 8 8 1 8 8 8 26S55 8 8 8 8 1 8 8 8 N 25 25 25 25 24 24 24 24 一致率 (%) 100 100 100 100 100 100 100 100

判定スコア一致率 Screening 2601 2602 2603 2604 ClassⅠ 25/25 25/25 25/25 25/25 100% 100% 100% 100% ClassⅡ 24/24 24/24 24/24 24/24 100% 100% 100% 100%

%PRA の考え方 数値として結果は出るが 定量性はさほどなく あくまでも多い 少ないの目安程度に考える UNOS では %PRA 高い患者は 移植選定時にポイントが加算されていたが %PRA の値の信憑性 移植成績との相関が疑問視されて現在は ポイント加算はなくなっている %PRA が変動する要因 1) マーカー位置設定 2) 機器設定汎用機のフローサイトメーターを用いるので 各施設での機器調整は必要

マーカーの設定 Negative Serum Sample Serum ネガティブピークがはっきり分かる形状の場合 ネガティブコントロール血清で設定した M1 をそのまま用いるのではなく ネガティブピークのすぐ横のピーク谷間に合わせて M2 を再設定して %PRA を求める

陽性検体 多峰性 膨らみ

Screening/ClassⅠ/2601~2604/%PRA CLASS Ⅰ lab PC 2601 2602 2603 2604 2601-2604 total 26S03 99.7 86.1 89.6 60.7 98 334.4 26S04 99.66 69.97 75.14 20.51 86.08 251.7 26S05 99.9 84.36 79.22 43.88 94.44 301.9 26S06 97.5 64 68.5 15.3 77.2 225.0 26S09 76.9 80.1 19.3 68.7 245.0 26S10 99.7 74.4 75.78 22.99 91.99 265.2 26S18 95.4 92.1 72.4 18.7 85.5 268.7 26S22 97.73 56.18 64.95 20.76 85.14 227.0 26S24 98.3 74.9 78.4 28 81.3 262.6 26S25 98.6 70.9 59.7 21.3 56.2 208.1 26S26 99.3 73.6 73 20.9 88.8 256.3 26S27 77.7 63.8 61.9 4.3 82.2 212.2 26S30 99.55 69.64 74.12 24.09 92.11 260.0 26S31 99.79 71.18 65.95 3.72 70.89 211.7 26S32 99.9 92 75.5 22.7 87.2 277.4 26S33 99.9 69.55 60.84 3.56 59.53 193.5 26S34 99.98 81.81 79.77 19.76 95.76 277.1 26S35 65.87 76.33 19.07 95.34 256.6 26S36 63.8 81 21.1 86.2 252.1 26S42 99.57 53.76 77.31 19.41 80.87 231.4 26S45 96.44 70.52 65.65 14.82 80.28 231.3 26S46 100 80.9 76.6 27.5 93.8 278.8 26S50 77.1 80.1 21 84.9 263.1 26S52 99.3 86.9 69.4 18.8 78.8 253.9 26S55 99.93 97.75 77.87 28.24 94.16 298.0 N 21 25 25 25 25 25 Mean 97.99 74.72 73.57 21.62 83.82 253.72 SD 4.8 11.1 7.3 11.6 10.9 32.2 CV 4.9 14.8 9.9 53.6 13.0 12.7 Min 77.70 53.76 59.70 3.56 56.2 193.48 Max 100.00 97.75 89.60 60.70 98.0 334.4

Screening/ClassⅡ/2601~2604/%PRA CLASS Ⅱ lab PC 2601 2602 2603 2604 2601-2604 total 26S03 99.5 2.7 99.9 70.2 93.5 266.3 26S04 99.83 0.75 99.16 22.63 78.99 201.5 26S05 96.74 3.72 99.43 49.32 91.22 243.7 26S06 99.7 1.6 99.5 27.1 88.3 216.5 26S09 2.4 99.8 24.5 69.9 196.6 26S10 99.9 1.1 98.83 28.86 84.4 213.2 26S18 98.5 2.9 100 39.8 89.3 232.0 26S22 98.66 1.5 99 39.05 86.56 226.1 26S24 99.9 1.1 99.8 27.6 89.7 218.2 26S25 26S26 100 2.8 100 35.3 89.4 227.5 26S27 78.1 1.07 92.9 21 84.7 199.7 26S30 99.99 5.86 99.97 51.76 95.1 252.7 26S31 99.91 0.79 97.97 17.22 74.11 190.1 26S32 100 2.6 99.9 38.2 90.2 230.9 26S33 98.8 1.88 97.94 19.66 79.81 199.3 26S34 99.98 2.88 99.99 57.62 57.62 218.1 26S35 2.06 99.79 59.97 88.38 250.2 26S36 2.7 100 59.2 90 251.9 26S42 99.97 1.52 99.85 36.52 89.3 227.2 26S45 90.04 3.19 99.69 54.01 88.66 245.6 26S46 98.4 1.4 98.8 31.1 86.6 217.9 26S50 1.7 97.6 30.9 88.3 218.5 26S52 95.2 2.3 97 26.5 84.4 210.2 26S55 99.97 2.38 99.96 53.41 89.7 245.5 N 20 24 24 24 24 24 Mean 97.65 2.20 99.03 38.39 85.34 224.97 SD 5.19 1.12 1.57 15.02 8.27 20.4 CV 5.3 50.8 1.6 39.1 9.7 9.1 Min 78.10 0.75 92.90 17.22 57.62 190.1 Max 100.00 5.86 100.00 70.20 95.10 266.3

Screening/ClassⅠ/2601~2604/%PRA/ 機器別 2601.ClassⅠ.ALL 2602.ClassⅠ.ALL 2603.ClassⅠ.ALL 2604.ClassⅠ.ALL N 25 N 25 N 25 N 25 Mean 74.72 Mean 73.57 Mean 21.62 Mean 83.82 SD 11.06 SD 7.31 SD 11.59 SD 10.86 CV 14.80 CV 9.94 CV 53.62 CV 12.96 Min 53.76 Min 59.7 Min 3.56 Min 56.2 Max 97.75 Max 89.6 Max 60.7 Max 98 2601.ClassⅠ.Calibur 2602.ClassⅠ.Calibur 2603.ClassⅠ.Calibur 2604.ClassⅠ.Calibur N 8 N 8 N 8 N 8 Mean 76.04 Mean 73.09 Mean 19.83 Mean 83.73 SD 9.58 SD 6.29 SD 10.35 SD 12.60 CV 12.60 CV 8.61 CV 52.18 CV 15.04 Min 69.55 Min 60.84 Min 3.56 Min 59.53 Max 97.75 Max 78.4 Max 28.24 Max 94.16 2601.ClassⅠ.Canto2 2602.ClassⅠ.Canto2 2603.ClassⅠ.Canto2 2604.ClassⅠ.Canto2 N 5 N 5 N 5 N 5 Mean 72.64 Mean 78.54 Mean 27.00 Mean 85.70 SD 9.05 SD 8.69 SD 18.98 SD 11.86 CV 12.46 CV 11.06 CV 70.30 CV 13.84 Min 63.8 Min 65.65 Min 14.82 Min 68.7 Max 86.1 Max 89.6 Max 60.7 Max 98 2601.ClassⅠ.EPICS XL 2602.ClassⅠ.EPICS XL 2603.ClassⅠ.EPICS XL 2604.ClassⅠ.EPICS XL N 3 N 3 N 3 N 3 Mean 68.30 Mean 70.17 Mean 13.53 Mean 81.43 SD 7.62 SD 9.21 SD 8.49 SD 3.91 CV 11.16 CV 13.13 CV 62.73 CV 4.80 Min 63.8 Min 61.9 Min 4.3 Min 77.2 Max 77.1 Max 80.1 Max 21 Max 84.9 2601.ClassⅠ.FC500 2602.ClassⅠ.FC500 2603.ClassⅠ.FC500 2604.ClassⅠ.FC500 N 4 N 4 N 4 N 4 Mean 74.62 Mean 71.78 Mean 20.06 Mean 87.13 SD 13.46 SD 6.26 SD 0.98 SD 7.09 CV 18.04 CV 8.72 CV 4.88 CV 8.13 Min 56.18 Min 64.95 Min 18.8 Min 78.8 Max 86.9 Max 79.77 Max 20.9 Max 95.76 2601.ClassⅠ.NAVIOS 2602.ClassⅠ.NAVIOS 2603.ClassⅠ.NAVIOS 2604.ClassⅠ.NAVIOS N 5 N 5 N 5 N 5 Mean 78.62 Mean 72.83 Mean 25.20 Mean 80.84 SD 16.37 SD 7.76 SD 10.56 SD 14.61 CV 20.81 CV 10.65 CV 41.91 CV 18.08 Min 53.76 Min 59.7 Min 18.7 Min 56.2 Max 92.1 Max 79.22 Max 43.88 Max 94.44

Screening/ClassⅡ/2601~2604/%PRA/ 機器別 2601.ClassⅡ.ALL 2602.ClassⅡ.ALL 2603.ClassⅡ.ALL 2604.ClassⅡ.ALL N 24 N 24 N 24 N 24 Mean 2.20 Mean 99.03 Mean 38.39 Mean 85.34 SD 1.12 SD 1.57 SD 15.02 SD 8.27 CV 50.81 CV 1.58 CV 39.13 CV 9.70 Min 0.75 Min 92.9 Min 17.22 Min 57.62 Max 5.86 Max 100 Max 70.2 Max 95.1 2601.ClassⅡ.Calibur 2602.ClassⅡ.Calibur 2603.ClassⅡ.Calibur 2604.ClassⅡ.Calibur N 8 N 8 N 8 N 8 Mean 1.91 Mean 99.05 Mean 31.53 Mean 84.80 SD 1.69 SD 0.82 SD 13.81 SD 6.87 CV 88.61 CV 0.83 CV 43.81 CV 8.10 Min 0.75 Min 97.94 Min 17.22 Min 74.11 Max 5.86 Max 99.97 Max 53.41 Max 95.1 2601.ClassⅡ.Canto2 2602.ClassⅡ.Canto2 2603.ClassⅡ.Canto2 2604.ClassⅡ.Canto2 N 5 N 5 N 5 N 5 Mean 2.61 Mean 99.84 Mean 53.58 Mean 86.09 SD 0.42 SD 0.12 SD 17.28 SD 9.28 CV 16.02 CV 0.12 CV 32.25 CV 10.77 Min 2.06 Min 99.69 Min 24.5 Min 69.9 Max 3.19 Max 100 Max 70.2 Max 93.5 2601.ClassⅡ.EPICS XL 2602.ClassⅡ.EPICS XL 2603.ClassⅡ.EPICS XL 2604.ClassⅡ.EPICS XL N 3 N 3 N 3 N 3 Mean 1.457 Mean 96.67 Mean 26.33 Mean 87.10 SD 0.339 SD 3.40 SD 4.99 SD 2.08 CV 23.243 CV 3.51 CV 18.97 CV 2.39 Min 1.07 Min 92.9 Min 21 Min 84.7 Max 1.7 Max 99.5 Max 30.9 Max 88.3 2601.ClassⅡ.FC500 2602.ClassⅡ.FC500 2603.ClassⅡ.FC500 2604.ClassⅡ.FC500 N 4 N 4 N 4 N 4 Mean 2.37 Mean 99.00 Mean 39.62 Mean 79.50 SD 0.63 SD 1.41 SD 13.10 SD 14.73 CV 26.76 CV 1.43 CV 33.08 CV 18.52 Min 1.5 Min 97 Min 26.5 Min 57.62 Max 2.88 Max 100 Max 57.62 Max 89.4 2601.ClassⅡ.NAVIOS 2602.ClassⅡ.NAVIOS 2603.ClassⅡ.NAVIOS 2604.ClassⅡ.NAVIOS N 4 N 4 N 4 N 4 Mean 2.69 Mean 99.80 Mean 40.96 Mean 90.01 SD 0.91 SD 0.25 SD 5.73 SD 0.91 CV 33.88 CV 0.25 CV 13.99 CV 1.02 Min 1.52 Min 99.43 Min 36.52 Min 89.3 Max 3.72 Max 100 Max 49.32 Max 91.22

Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ/Reagent Lot,16/Calibur/Negative Control Control/Lot.20 26S04 26S10 26S24 26S46 Control/Lot.17 Control/Lot.19 自家製 26S31 26S33 26S55 26S30 Reagent/Lot,15

Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅡ/Reagent Lot,18/Calibur/Negative Control Lot.20 26S04 26S10 26S24 26S46 Lot.17 Lot.19 自家製 26S31 26S33 26S55 26S30

Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/CantoⅡ/Negative Control Lot.20 自家製 26S03 26S35 26S36 26S45 26S09

Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/ Epics-XL /Negative Control Lot.20 Lot.19 Lot. 不明 26S06 26S50 26S27

Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/ FC500 /Negative Control Lot.20 Lot. 不明 自家製 26S22 26S52 26S26 26S34

Flow PRA Screening マーカー比較 ClassⅠ&Ⅱ/Reagent Lot16,18/ NAVIOS/Negative Control Lot.20 Lot.19 Lot.17 Lot.16 26S25 26S32 26S18 26S42 26S05

Flow PRA Single Antigen 26S09 26S35 機器 FACS Canto II FACS Canto II 陰性対象血清自家製 / ドナー血清 One Lambda/FlowPRA Negative Control Serum/020 ClassⅠ Group 1-4(Lot.13) Group 1-4(Lot.13) Group 5-7 (5,7 Lot.10) (6 Lot.11 ) ClassⅡ Group 1-4(Lot.11) Group 1-4(Lot.11)

Flow PRA Single Antigen ClassⅠ Antigen Distribution,Group1-4,5,6,7

Flow PRA Single Antigen ClassⅡ Antigen Distribution,Group1-4

判定スコア一致率 Consensus vs. Flow PRA Single Antigen Class Ⅰ SH2601_Ⅰ SH2602_Ⅰ SH2603_Ⅰ SH2604_Ⅰ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 FP 0 0 FP 7 2 FP 4 0 FP 5 1 FN 0 0 FN 1 0 FN 1 0 FN 2 0 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 一致 56 33 一致 46 29 一致 49 32 一致 46 29 未検査 23 46 未検査 23 46 未検査 20 42 未検査 22 45 Class Ⅱ SH2601_Ⅱ SH2602_Ⅱ SH2603_Ⅱ SH2604_Ⅱ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 FP 0 0 FP 0 0 FP 0 1 FP 0 0 FN 0 0 FN 3 2 FN 0 0 FN 1 1 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 保留 0 0 一致 24 24 一致 21 22 一致 21 20 一致 21 21 未検査 0 0 未検査 0 0 未検査 0 0 未検査 0 0

HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus Single Antigen Consensus_HLA-A SH2601_Ⅰ SH2602_Ⅰ SH2603_Ⅰ SH2604_Ⅰ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 A1 1 1 A1 8 8 A1 1 1 A1 1 1 A2 8 8 A2 1 1 A2 1 1 A2 1 1 A3 1 1 A3 8 8 A3 1 1 A3 1 1 A11 1 1 A11 8 8 A11 8 8 A11 1 1 A24 8 8 A24 8 8 A24 1 1 A24 1 1 A26 1 1 A26 8 8 A26 8 1 A26 1 1 A30 1 1 A30 1 1 A30 1 1 A30 8 8 A31 1 1 A31 1 1 A31 1 1 A31 8 8 A33 1 1 A33 1 1 A33 8 1 A33 1 1 A23 8 8 A23 8 8 A23 1 1 A23 8 1 A25 8 8 A25 8 8 A25 1 1 A25 1 1 A29 1 1 A29 1 1 A29 1 1 A29 8 1 A32 8 8 A32 1 1 A32 1 1 A32 8 8 A34 1 1 A34 1 1 A34 1 1 A34 1 1 A36 A36 A36 A36 A43 A43 A43 A43 A66 A66 A66 A66 A68 1 1 A68 1 1 A68 1 1 A68 1 1 A69 A69 A69 A69 A74 A74 A74 A74 A80 A80 A80 A80 False Positive?

Single Antigen Consensus_HLA-B SH2601_Ⅰ SH2602_Ⅰ SH2603_Ⅰ SH2604_Ⅰ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 B7 1 1 B7 8 8 B7 1 1 B7 8 8 B13 8 8 B13 8 8 B13 1 1 B13 8 8 B27 8 8 B27 8 8 B27 1 8 B27 8 8 B35 1 1 B35 1 1 B35 1 1 B35 1 1 B37 8 B37 1 B37 1 B37 1 B38 8 8 B38 1 1 B38 1 1 B38 8 8 B39 1 B39 1 B39 1 B39 8 B44 8 8 B44 1 1 B44 1 1 B44 8 8 B46 1 B46 1 B46 8 B46 8 B48 1 B48 8 B48 1 B48 8 B51 8 8 B51 1 1 B51 1 1 B51 1 8 B52 8 8 B52 1 1 B52 1 1 B52 8 8 B54 1 B54 1 B54 1 B54 1 B55 1 1 B55 8 8 B55 8 1 B55 8 8 B56 1 B56 1 B56 1 B56 1 B58 8 B58 1 B58 1 B58 1 B59 8 B59 1 B59 1 B59 8 B60 1 1 B60 8 8 B60 1 1 B60 8 8 B61 1 B61 8 B61 1 B61 8 B62 1 1 B62 1 1 B62 1 1 B62 8 8 B67 1 B67 1 B67 1 B67 1 B71 B71 B71 B71 B75 1 B75 1 B75 1 B75 8 B64 1 B64 1 B64 8 B64 1 B65 1 1 B65 1 1 B65 1 1 B65 1 1 B72 1 B72 1 B72 1 B72 1 B8 1 1 B8 8 1 B8 1 1 B8 8 8 B18 1 1 B18 1 1 B18 1 1 B18 1 1 B41 1 B41 1 B41 1 B41 8 B42 1 B42 1 B42 1 B42 8 B45 1 1 B45 1 1 B45 1 1 B45 8 8 B47 8 B47 8 B47 1 B47 8 B49 8 8 B49 1 1 B49 1 1 B49 8 8 B50 1 B50 8 B50 8 B50 8 B53 8 B53 1 B53 1 B53 1 B57 8 8 B57 1 1 B57 1 1 B57 8 8 B63 8 B63 1 B63 1 B63 8 B73 1 B73 8 B73 8 B73 8 B76 1 B76 1 B76 1 B76 8 B77 8 B77 1 B77 1 B77 8 B78 1 B78 1 B78 1 B78 8 B81 1 B81 8 B81 1 B81 8 B82 B82 B82 B82 False Negative? Group7 B67:01beads False Negative? HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus

Single Antigen Consensus_HLA-DR SH2601_Ⅱ SH2602_Ⅱ SH2603_Ⅱ SH2604_Ⅱ Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 Lab. 26S09 26S35 DR1 1 1 DR1 1 1 DR1 1 1 DR1 1 1 DR4 1 1 DR4 1 1 DR4 1 1 DR4 1 1 DR7 1 1 DR7 8 8 DR7 8 8 DR7 8 8 DR8 1 1 DR8 8 8 DR8 8 8 DR8 8 8 DR9 1 1 DR9 8 8 DR9 1 1 DR9 1 1 DR10 1 1 DR10 1 1 DR10 1 1 DR10 1 1 DR11 1 1 DR11 8 8 DR11 8 8 DR11 8 8 DR12 1 1 DR12 8 8 DR12 8 8 DR12 8 8 DR13 1 1 DR13 8 8 DR13 8 8 DR13 8 8 DR14 1 1 DR14 8 8 DR14 1 8 DR14 8 8 DR15 1 1 DR15 1 1 DR15 1 1 DR15 1 1 DR16 1 1 DR16 8 8 DR16 1 1 DR16 8 8 DR17 1 1 DR17 1 1 DR17 1 1 DR17 8 8 DR18 1 1 DR18 1 1 DR18 1 1 DR18 8 8 DR51 1 1 DR51 8 8 DR51 1 1 DR51 8 8 DR52 1 1 DR52 1 1 DR52 1 1 DR52 1 1 DR53 1 1 DR53 1 1 DR53 1 1 DR53 1 1 DQ2 1 1 DQ2 1 1 DQ2 1 1 DQ2 1 1 DQ4 1 1 DQ4 1 8 DQ4 1 1 DQ4 1 1 DQ5 1 1 DQ5 8 8 DQ5 1 1 DQ5 1 1 DQ6 1 1 DQ6 8 8 DQ6 1 1 DQ6 1 1 DQ7 1 1 DQ7 1 1 DQ7 1 1 DQ7 1 1 DQ8 1 1 DQ8 1 1 DQ8 1 1 DQ8 1 1 DQ9 1 1 DQ9 1 1 DQ9 1 1 DQ9 1 1 LAB Screen Single antigen Antigen Distribution DR4 Beads 9 種類 DRB1*04:01 DRB1*04:02 DRB1*04:03 DRB1*04:04 DRB1*04:05 DRB1*04:06 DRB1*04:07 DRB1*04:10 DRB1*04:11 Flow PRA Single antigen Antigen Distribution DR4 Beads 3 種類 DRB1*04:01 DRB1*04:04 DRB1*04:05 HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus

Flow PRA Single Antigen Score_SH2601_ClassⅠ SH2601_Ⅰ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score A1 A*01:01 8 1 0 B7 Bw6 B*07:02 2 1 0 B52 Bw4 B*52:01 13863 8 8 A2 A*02:01 13568 8 8 B7 Bw6 B*07:14 0 B53 Bw4 B*53:01 15817 8 A2 A*02:03 12559 B8 Bw6 B*08:01 4 1 0 B54 Bw6 B*54:01 7 1 A2 A*02:06 12849 B13 Bw4 B*13:01 12870 8 8 B55 Bw6 B*55:01 6 1 0 A2 A*02:05 14641 B13 Bw4 B*13:02 14216 B55 Bw6 B*55:02 0 A2 A*02:07 10284 B18 Bw6 B*18:01 2 1 0 B55 Bw6 B*55:04 0 A210 A*02:10 9642 B22 Bw6 B*56:03 0 B56 Bw6 B*56:01 3 1 A3 A*03:01 6 1 0 B27 Bw4 B*27:04 14762 B57 Bw4 B*57:01 17229 8 8 A11 A*11:01 42 1 0 B27 Bw4 B*27:05 15772 8 8 B57 Bw4 B*57:03 17923 A11 A*11:02 2 B27 Bw6 B*27:08 3 B58 Bw4 B*58:01 18392 8 A23 A*23:01 18944 8 8 B35 Bw6 B*35:01 2 1 0 B59 Bw4 B*59:01 17358 8 A24 A*24:02 18807 8 8 B35 Bw6 B*35:02 0 B60 Bw6 B*40:01 0 1 0 A24 A*24:03 18589 B35 Bw6 B*35:03 0 B61 Bw6 B*40:02 3 1 A25 A*25:01 18186 8 8 B37 Bw4 B*37:01 13879 8 B61 Bw6 B*40:06 7 A26 A*26:01 2 1 0 B38 Bw4 B*38:01 19279 8 8 B61 Bw6 B*40:03 0 A26 A*26:02 0 B38 Bw4 B*38:02 15570 B62 Bw6 B*15:01 2 1 0 A26 A*26:03 0 B39 Bw6 B*39:01 2 1 B62 Bw6 B*15:04 0 A29 A*29:01 46 B3902 Bw6 B*39:02 9 B62 Bw6 B*15:07 0 A29 A*29:02 33 1 0 B39 Bw6 B*39:04 0 B62 Bw6 B*15:20 4 A30 A*30:01 7 1 0 B39 Bw6 B*39:05 0 B62 Bw4 B*15:24 17059 A30 A*30:02 4 B39 Bw6 B*39:13 11 B62 Bw6 B*15:27 0 A31 A*31:01 5 1 0 B4005 Bw6 B*40:05 0 B63 Bw4 B*15:16 17766 8 A32 A*32:01 18086 8 8 B41 Bw6 B*41:01 4 1 B63 Bw4 B*15:17 19890 A33 A*33:01 88 1 0 B42 Bw6 B*42:01 6 1 B64 Bw6 B*14:01 10 1 A33 A*33:03 6 B44 Bw4 B*44:02 11754 8 8 B65 Bw6 B*14:02 6 1 0 A34 A*34:01 3 1 0 B44 Bw4 B*44:03 16842 B67 Bw6 B*67:01 38 1 A34 A*34:02 12 B45 Bw6 B*45:01 10 1 0 B71 Bw6 B*15:10 3 A36 A*36:01 13 B46 Bw6 B*46:01 1 1 B71 Bw6 B*15:18 0 A43 A*43:01 5 B47 Bw4 B*47:01 12903 8 B72 Bw6 B*15:03 0 1 A66 A*66:01 14 B48 Bw6 B*48:01 1 1 B73 Bw6 B*73:01 3 1 A66 A*66:02 17 B48 Bw6 B*48:02 0 B75 Bw6 B*15:02 4 1 A68 A*68:01 11 1 0 B49 Bw4 B*49:01 19485 8 8 B75 Bw6 B*15:11 1 A68 A*68:02 9 B50 Bw6 B*50:01 2 1 B76 Bw6 B*15:12 14 1 A69 A*69:01 11 B45 Bw6 B*50:02 0 B77 Bw4 B*15:13 17554 8 A74 A*74:01 13 B51 Bw4 B*51:01 17273 8 8 B78 Bw6 B*78:01 1 1 A80 A*80:01 50 B51 Bw4 B*51:02 18400 B81 Bw6 B*81:01 2 1 B82 Bw6 B*82:01 13 HLA Specificity Consensus Negative Consensus Positive Not Consensus 測定スコア 80% 8 50% 6 20% 4 10% 2 0% 1 NT 0 26S35 記入ミス? 0 1 で解析

Flow PRA Single Antigen Score_SH2602_ClassⅠ SH2602_Ⅰ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ HLA Molecular LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score Specificity Specificity Single_MFI.ave score score A1 A*01:01 14645 8 8 B7 Bw6 B*07:02 8919 8 8 B52 Bw4 B*52:01 121 1 0 A2 A*02:01 145 1 0 B7 Bw6 B*07:14 8320 B53 Bw4 B*53:01 97 1 A2 A*02:03 108 B8 Bw6 B*08:01 188 4 4 B54 Bw6 B*54:01 99 1 A2 A*02:05 27 B13 Bw4 B*13:01 770 4 4 B55 Bw6 B*55:01 1873 8 8 A2 A*02:06 106 B13 Bw4 B*13:02 970 B55 Bw6 B*55:02 354 A2 A*02:07 33 B18 Bw6 B*18:01 15 1 0 B55 Bw6 B*55:04 813 A210 A*02:10 85 B22 Bw6 B*56:03 1757 B56 Bw6 B*56:01 898 1 A3 A*03:01 14256 8 8 B27 Bw4 B*27:04 7530 B57 Bw4 B*57:01 143 1 0 A11 A*11:01 14433 8 8 B27 Bw4 B*27:05 5960 8 8 B57 Bw4 B*57:03 199 A11 A*11:02 11338 B27 Bw6 B*27:08 5991 B58 Bw4 B*58:01 160 1 A23 A*23:01 986 8 4 B35 Bw6 B*35:01 12 1 0 B59 Bw4 B*59:01 150 1 0 A24 A*24:02 13430 8 8 B35 Bw6 B*35:02 23 B60 Bw6 B*40:01 598 8 4 A24 A*24:03 14374 B35 Bw6 B*35:03 14 B61 Bw6 B*40:02 765 8 A25 A*25:01 8169 8 8 B37 Bw4 B*37:01 95 1 B61 Bw6 B*40:06 545 A26 A*26:01 5445 8 8 B38 Bw4 B*38:01 152 1 0 B61 Bw6 B*40:03 811 A26 A*26:02 4577 B38 Bw4 B*38:02 16 B62 Bw6 B*15:01 5 1 0 A26 A*26:03 5142 B39 Bw6 B*39:01 11 1 B62 Bw6 B*15:04 3 A29 A*29:01 36 B3902 Bw6 B*39:02 27 B62 Bw6 B*15:07 3 A29 A*29:02 17 1 0 B39 Bw6 B*39:04 12 B62 Bw6 B*15:20 28 A30 A*30:01 170 1 4 B39 Bw6 B*39:05 10 B62 Bw4 B*15:24 13 A30 A*30:02 141 B39 Bw6 B*39:13 9 B62 Bw6 B*15:27 4 A31 A*31:01 8 1 0 B4005 Bw6 B*40:05 16 B63 Bw4 B*15:16 120 1 A32 A*32:01 237 1 0 B41 Bw6 B*41:01 9 1 B63 Bw4 B*15:17 16 A33 A*33:01 17 1 0 B42 Bw6 B*42:01 227 1 B64 Bw6 B*14:01 19 1 A33 A*33:03 16 B44 Bw4 B*44:02 112 1 0 B65 Bw6 B*14:02 19 1 0 A34 A*34:01 773 1 4 B44 Bw4 B*44:03 136 B67 Bw6 B*67:01 2481 1 A34 A*34:02 790 B45 Bw6 B*45:01 10 1 0 B71 Bw6 B*15:10 12 A36 A*36:01 13188 B46 Bw6 B*46:01 4 1 B71 Bw6 B*15:18 4 A43 A*43:01 10220 B47 Bw4 B*47:01 867 4 B72 Bw6 B*15:03 28 1 A66 A*66:01 8070 B48 Bw6 B*48:01 466 8 B73 Bw6 B*73:01 996 8 A66 A*66:02 1154 B48 Bw6 B*48:02 15 B75 Bw6 B*15:02 5 1 A68 A*68:01 10 1 0 B49 Bw4 B*49:01 150 1 0 B75 Bw6 B*15:11 14 A68 A*68:02 311 B50 Bw6 B*50:01 4 8 B76 Bw6 B*15:12 3 1 A69 A*69:01 11 B45 Bw6 B*50:02 9 B77 Bw4 B*15:13 155 1 A74 A*74:01 35 B51 Bw4 B*51:01 85 1 0 B78 Bw6 B*78:01 9 1 A80 A*80:01 14183 B51 Bw4 B*51:02 182 B81 Bw6 B*81:01 6091 8 B82 Bw6 B*82:01 26

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Flow PRA Single Antigen Score_SH2604_ClassⅡ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score SH2604_Ⅱ HLA Molecular Molecular Specific Specificity Specificity LAB.SCreen_ 26S09_ 26S35_ Single_MFI.ave score score DR1 DRB1*01:01 7 1 0 DR51 DRB5*01:01 10416 8 8 DR1 DRB1*01:02 7 1 0 DR51 DRB5*01:02 11457 DR103 DRB1*01:03 12945 8 8 DR51 DRB5*02:02 35 DR4 DRB1*04:01 0 1 0 DR52 DRB3*01:01 259 DR4 DRB1*04:02 5022 DR52 DRB3*02:01 351 DR4 DRB1*04:03 4 DR52 DRB3*02:02 389 1 0 DR4 DRB1*04:04 5 1 0 DR52 DRB3*03:01 168 DR4 DRB1*04:05 8 1 0 DR53 DRB4*01:01 39 DR4 DRB1*04:06 0 DR53 DRB4*01:03 3 1 0 DR4 DRB1*04:07 0 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*02:01 0 1 0 DR4 DRB1*04:10 0 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*03:01 8 DR4 DRB1*04:11 43 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*04:01 1054 DR7 DRB1*07:01 2342 8 8 DQ2 DQB1*02:01 DQA1*05:01 1745 DR8 DRB1*08:01 17265 8 8 DQ2 DQB1*02:02 DQA1*02:01 2 DR8 DRB1*08:02 16863 DQ4 DQB1*04:01 DQA1*02:01 54 DR8 DRB1*08:03 15556 DQ4 DQB1*04:01 DQA1*03:03 2 DR8 DRB1*08:07 16993 DQ4 DQB1*04:02 DQA1*02:01 32 1 0 DR9 DRB1*09:01 62 1 0 DQ4 DQB1*04:02 DQA1*04:01 1202 DR9 DRB1*09:02 9 DQ5 DQB1*05:01 DQA1*01:01 2 1 0 DR10 DRB1*10:01 126 1 0 DQ5 DQB1*05:02 DQA1*01:02 10 DR11 DRB1*11:01 11746 8 8 DQ5 DQB1*05:03 DQA1*01:01 14 DR11 DRB1*11:04 12474 DQ6 DQB1*06:01 DQA1*01:03 151 DR12 DRB1*12:01 10621 8 8 DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01:01 74 1 0 DR12 DRB1*12:02 13337 8 8 DQ6 DQB1*06:02 DQA1*01:02 29 DR13 DRB1*13:01 6476 8 8 DQ6 DQB1*06:03 DQA1*01:03 85 DR13 DRB1*13:02 3529 DQ6 DQB1*06:04 DQA1*01:02 46 DR13 DRB1*13:03 15193 8 8 DQ6 DQB1*06:09 DQA1*01:02 3 DR14 DRB1*14:01 6506 8 8 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*02:01 24 1 0 DR14 DRB1*14:02 3256 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*03:01 15 DR14 DRB1*14:03 14047 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05:03 1792 DR14 DRB1*14:04 12678 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*05:05 1839 DR14 DRB1*14:05 1412 DQ7 DQB1*03:01 DQA1*06:01 1745 DR14 DRB1*14:06 2171 DQ7 DQB1*03:19 DQA1*02:01 0 DR14 DRB1*14:54 4934 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*01:01 8 1 0 DR15 DRB1*15:01 27 1 0 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*02:01 14 DR15 DRB1*15:02 40 1 0 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:01 10 DR15 DRB1*15:03 11 DQ8 DQB1*03:02 DQA1*03:02 0 DR16 DRB1*16:01 14202 8 8 DQ9 DQB1*03:03 DQA1*02:01 34 1 0 DR16 DRB1*16:02 13061 DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:01 16 DR17 DRB1*03:01 5564 8 8 DQ9 DQB1*03:03 DQA1*03:02 0 DR18 DRB1*03:02 4132 8 8

まとめ ~Flow PRA Screening~ Flow PRA Screening の結果一致率は 100% と良好であった %PRA の数値は 同一条件 ( 機器 試薬が同一 ) でも施設により 大きく違う箇所を認めた 機器設定 マーカー設定で %PRA の数値のある程度の収束は可能と考えられる

まとめ ~Flow PRA Single Antigen~ コンセンサスと不一致の原因として 試薬の抗原構成によるもの ビーズの反応性 設定によるものが推測された 試薬 group の Antigen Distribution を把握 確認する必要がある