今一番知ってほしいタカラバイオを一つにまとめました! タカラバイオマンスリーフォーカス vol.43 2019 年 1 2 月合併号 (1 月 15 日発行 ) 2019 年最初の タカラバイオマンスリーフォーカス は 1 月 2 月合併号でお届けいたします 好評実施中の 2018 年度タカラバイオウインターキャンペーン より 担当者おススメの製品をピックアップしてご紹介します 裏面のセミナースケジュールも是非ご覧ください 2018 年度タカラバイオウインターキャンペーン連動企画 平成最後の年度末! ベストバイ製品特集号 ウインターキャンペーン対象製品の中から 一度は使っていただきたい製品を担当者が ピックアップしました タカラバイオおススメの製品をご確認いただき まだお使いいただいて いない方はお得にご購入いただけるこの機会をぜひご利用ください! ピックアップカテゴリー PCR/ リアルタイムPCR ゲノム編集 (CRISPR/Cas9) クローニング (In-Fusion) 細胞 / 培地関連 NGS 用ライブラリー調製キット 多くのユーザー様にご愛用いただいているロングセラー 製品や 売上げ急上昇中の製品ばかりを集めました 詳しくは本パンフレットをご覧ください! 担当者 F
PCR タカラバイオの技術を結集した PCR 酵素 GC リッチ AT リッチ 長鎖ターゲット クルードサンプルも良好に増幅 Tks Gflex DNA Polymerase GC リッチ AT リッチ 長鎖ターゲットも OK! 抜群の PCR 成功率鋳型許容量も大きく 逆転写 PCR にも有効クルードサンプルにも強く 粗抽出液からの PCR も可能 おススメポイントその 1 : 高いプライミング特異性で目的の鋳型を確実に増幅 プライミングとは DNA ポリメラーゼはプライマーの 3 末端で酵素 /DNA 複合体を形成し 鎖伸長を始めます この複合体形成が プライミング です おススメポイントその 2 : 鋳型によらず バイアスのない増幅が可能 Tks Gflex PrimeSTAR GXL A 社 PCR 酵素 0.0003 X 軸 : GC% Y 軸 :normarized depth (PCR free) 対象生物 :E. coli ( 弊社比較データ ) 大腸菌ゲノムライブラリーを各種 PCR 酵素で増幅後 GA IIx(Illumina 社 ) で次世代シーケンス (NGS) 解析を行った PCR 増幅を行わないライブラリーと比較した結果 Tks Gflex は GC 含量にかかわらずもっとも均一な増幅を示した 鋳型配列にかかわらず増幅が可能な Tks Gflex DNA Polymerase は NGS のライブラリー増幅 メタゲノム解析にも効果的です 製品名容量 製品コード通常価格キャンペーン価格 250 U(200 回 ) R060A 31,500 25,200 Tks Gflex DNA Polymerase 1,000 U(800 回 ) R060B 101,000 80,800 50 μl 反応系での回数です - 2 - タカラバイオマンスリーフォーカス
Ct Ct (Crossing Point) リアルタイム PCR(qPCR) 試薬 完全プレミックス化で 操作性が向上! プローブ検出用 One Step リアルタイム RT-PCR 試薬 One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 新登場 RTase PCR 酵素 反応 Buffer をプレミックス化 簡単にミスなく実験卓越した反応阻害物質耐性 クルードなサンプルからも検出可能キャリーオーバーコンタミネーション防止の UNG バージョンをご用意 おススメポイントその 1 : 様々な遺伝子で一貫性の高い定量結果を取得 40.00 35.00 30.00 25.00 20.00 15.00 10.00 10 100 1000 10000 100000 Initial Quantity 遺伝子名 GC 含量 R2 Eff. TGFB1 Jun_12 Jun_16 ACTB PPIA GAPDH 66% 64% 47% 57% 47% 56% 0.99 0.99 0.98 0.99 0.99 0.99 104.5% 93.7% 94.0% 108.4% 100.4% 105.5% 鋳型 RNA: Human HeLa Cell Total RNA おススメポイントその 2 : 反応阻害物質に対して非常に高い抵抗性 添加なし ヘマチン 80 μm ヘパリン 0.125 U メラニン 100 ng フミン酸 100 ng タンニン酸 1,000 ng 検出されず 40 30 20 10 0 One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 弊社従来品 T 社製品 A T 社製品 B T 社製品 C R 社製品 D B 社製品 E ( 弊社比較データ ) 鋳型 RNA : Human HeLa Cell Total RNA ターゲット : Human ACTB 遺伝子プローブ : TaKaRa qpcr Probe 製品名容量 製品コード通常価格キャンペーン価格 200 回 RR600A 46,000 36,800 One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix NEW 1,000 回 RR600B 174,000 139,200 One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG 25 μl 反応系での回数です NEW 200 回 RR601A 48,000 38,400 1,000 回 RR601B 178,000 142,400-2 - タカラバイオマンスリーフォーカス - 3 -
リアルタイム PCR(qPCR) 試薬 インターカレーター法リアルタイム PCR 試薬の決定版! 非特異的増幅を抑制し 幅広い濃度範囲で正確な定量が可能 TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) 幅広いターゲットに対応するリアルタイム PCR のスタンダード試薬増幅効率と反応特異性のバランスが良く 非常に使いやすい耐熱性 RNaseH をプレミックス化 高い定量性を実現 おススメポイントその 1 : 耐熱性 RNaseH により 幅広いダイナミックレンジでの定量が可能 逆転写反応 mrna Oligo dt or/and Random primer Tli RNaseH Plus の効果 RNaseH による分解 cdna これまでの PCR 試薬 PCR primer PCR primer がアニールしにくい 増幅効率の低下 RNaseH による mrna の分解は PCR 反応液中で完了! 特別な操作は不要です おススメポイントその 2 : Perfect Real Time サポートシステム (PRTSS) 1 で設計したプライマーとの組み合わせで 条件検討なしですぐに反応が可能 1 : PRTSSとは リアルタイムRT-PCR 用に最適化されたプライマーを検索 オンライン注文できるシステムです ヒト マウス ラット ウシ イヌ ニワトリ イネ シロイヌナズナに対応しています タカラバイオ PRTSS 検索 製品名容量 2 製品コード通常価格キャンペーン価格 TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) 200 回 RR820A 42,000 33,600 2 : 50 μl 反応系での回数です 容量違いの製品もキャンペーン対象です 詳しくはウェブサイトをご覧ください - 4 - タカラバイオマンスリーフォーカス
RNA Ct 値 RNA Ct 値 リアルタイム PCR(qPCR) 試薬 RNA 精製なしで 培養細胞から一気にリアルタイム PCR へ! ハイスループット解析にも最適 CellAmp Direct RT-qPCR Kit シリーズ シンプルな実験操作でサンプルの取り違いなどの操作ミスのリスクを低減パワーアップした Lysis Buffer により 各種幹細胞 (ips 細胞など ) へ適用可能精製 RNA を用いた RT-qPCR との高い相関性 おススメポイントその 1 : 全工程が最短で 1.5 時間以内に終了 精製 RNA を使用する従来法 Cell Lysis RNA 精製逆転写反応 qpcr CellAmp Direct Cell Lysis 逆転写反応 qpcr 細胞洗浄 ライセート調製 ( 室温 5 分 ) 逆転写反応 (37 30 分 ) 失活処理 (85 5 秒 ) リアルタイム PCR ( 約 40 分 ) おススメポイントその 2 : 精製 RNA との高い相関性を確認済み CellAmp Ct 値 CellAmp Ct 値 インターカレーター法検出用 CellAmp Direct TB Green RT-qPCR Kit 3 1 Kit 1 3735S 22,000 17,600 1 Kit 2 3735A 90,000 72,000 プローブ検出用 CellAmp Direct Probe RT-qPCR Kit 4 補充用試薬セット CellAmp Direct Lysis and RT set 1 Kit 1 3736S 20,000 16,000 1 Kit 2 3736A 88,000 70,400 20 回 3737S 12,800 10,240 100 回 3737A 58,800 47,040 1 : Lysis 20 回 qpcr 100 回 (25 μl 反応系 ) 2 : Lysis 100 回 qpcr 500 回 (25 μl 反応系 ) 3 : qpcr 試薬 TB Green Fast qpcr Mix( 製品コード RR430A/B) は単品購入も可能です 4 : qpcr 試薬 Probe qpcr Mix( 製品コード RR391A/B) は単品購入も可能です - 2 - タカラバイオマンスリーフォーカス - 5 -
ゲノム編集 オフターゲットを抑制し in vivo での効率的なゲノム編集が可能! 高品質 Cas9 タンパク質 Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) 高濃度 (3 μg/μl) エレクトロポレーションやトランスフェクションに最適低グリセロール濃度 ( 他社比較 ) 生体へのダメージを低減 NLS( 核移行シグナル ) 細胞へ導入後 速やかに核に移行 おススメポイントその 1 : Cas9 タンパク質による直接導入はメリットがいっぱい Cas9 タンパク質を用いるゲノム編集の流れ 1 Cas9 と sgrna を用意 2 Cas9 タンパク質と sgrna の複合体 (RNP) を形成 3 RNP を導入 & ターゲット遺伝子を切断 Cas9タンパク質 sgrna エレクトロポレーション細胞 ( 株化 初代 ips ES etc.) or トランスフェクション組織 受精卵など え~! Cas9とsgRNAを用意するだけ!? こんなに簡単にゲノム編集を始められるんだ!! - プラスミドやウイルスによる導入法と比較して - Cas9 遺伝子を使わないため継続的な Cas9 の発現がなく オフターゲットを抑制 対象生物ごとにプロモーターやコドンの最適化不要 導入する Cas9 タンパク質量をコントロールしてゲノム編集効率を至適化 転写 翻訳 のタイムラグがないので 迅速 効率的に変異を導入 おススメポイントその 2 : 他社製品よりリーズナブルな価格で 継続使用しやすい 製品名 容量 価格 Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) 100 μg 20,000 C 社 Cas9タンパク質 100 μg 23,400 T 社 Cas9タンパク質 100 μg 23,000 タカラバイオの Cas9 タンパク質が最もお得です! Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) 2018 年 10 月 1 日時点の通常価格を基に比較 100 μg 632641 20,000 17,000 100 μg 3 632640 54,000 45,900-6 - タカラバイオマンスリーフォーカス
クローニング 圧倒的なコストパフォーマンス! 失敗しないシームレスクローニングシステム In-Fusion クローニングシリーズ 制限酵素もライゲーションキットも不要な超簡単プロトコール任意のベクターの任意の位置にディレクショナルクローニングが可能 15 kb 断片のクローニング実績あり 複数断片の同時クローニングも可能 おススメポイントその 1 : PCR 断片を任意のベクターにクローニングできます 1 線状化ベクターと目的遺伝子の準備 ベクター 2 5 In-Fusion HD Enzyme Premix & dh 2 O に 1 を加えて In-Fusion 反応 3 そのまま形質転換 ベクターを PCR 増幅 ベクターの線状化 目的遺伝子 PCR 増幅 目的遺伝子 In-Fusion 反応はわずか 50 15 分 おススメポイントその 2 : 使用文献増加中! 多くの方が使い始めています 140 120 100 80 60 40 20 0 In-Fusion Cloning Kit 使用文献数 文献検索数は Google Scholar により集計 2018 年 12 月 6 日時点のデータ High-throughput cloning CRISPR/Cas9 vector cloning Lentiviral plasmid cloning In-Fusion HD Cloning Kit 10 回 639648 23,000 18,400 In-Fusion HD Cloning Kit w/cloning Enhancer 10 回 639633 24,000 19,200 In-Fusion HD Cloning Kit w/nucleospin 10 回 639639 26,000 20,800 上記以外の In-Fusion シリーズもキャンペーン対象です 詳しくはウェブサイトをご覧ください - 2 - タカラバイオマンスリーフォーカス - 7 -
累積細胞数 細胞 培地 再生医療研究ユーザー様の実績が豊富です! 専用の増殖培地 分化培地をご用意 ヒト間葉系幹細胞 増殖培地 分化培地 骨髄 臍帯マトリックス 脂肪組織由来の間葉系幹細胞をラインナップ専用の増殖培地で 増殖が良好専用の分化培地で 脂肪 軟骨 骨芽 神経細胞へ分化誘導が可能 おススメポイントその 1 : 増殖がよく 各種細胞への分化能を確認済み a 脂肪細胞 b 軟骨細胞 分化培地にて誘導 c 骨芽細胞 d 神経細胞 間葉系幹細胞 おススメポイントその 2 : 動物由来成分を含まない Xeno-Free 培地として コーティング剤不要の培地もご用意 < 実験例 > Cellartis MSC Xeno-Free Culture Medium を使用して ヒト骨髄由来間葉系幹細胞の培養を行った その結果 プレートコーティング剤の有無にかかわらず 優れた増殖能を示した *1 : ヒトフィブロネクチンをコーティングして実施 *2 : 培養容器への大幅な接着率低下が確認されたため 細胞の培養を中断した ( 弊社比較データ ) 1.E+04 0 4 8 12 16 20 24 ヒト骨髄由来間葉系幹細胞 1 5 10 5 cells/vial C-12974 142,000 113,600 間葉系幹細胞増殖培地 2 1 500 ml C-28009 27,000 21,600 間葉系幹細胞骨芽細胞分化培地 1, 2 100 ml C-28013 24,000 19,200 Cellartis MSC Xeno-Free Culture Medium 1 Kit Y50200 49,800 39,840 1 : PromoCell 社の製品です 2 : 脂肪細胞 軟骨細胞 神経細胞への分化培地もキャンペーン対象です 詳しくはウェブサイトをご覧ください 1.E+10 1.E+08 1.E+06 ヒト骨髄由来 MSC の増殖曲線 *2 培養日数 本培地 ( コート剤無 ) 本培地 ( コート剤有 ) *1 E 社 XF 培地 ( コート剤無 ) E 社 XF 培地 ( コート剤有 ) - 8 - タカラバイオマンスリーフォーカス
細胞 培地 疾患モデリング研究をご検討中のユーザー様へ! ヒト ips 細胞専用血管内皮細胞への分化誘導キット 新登場 MiraCell ips Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit 複数のヒト ips 細胞株からの高い分化誘導効率 (>80%) を確認済み薬剤耐性遺伝子の導入などの複雑な工程を必要としない 簡便プロトコール分化誘導した血管内皮細胞は 凍結保存と拡大培養が可能 おススメポイントその 1 : DEF-CS 培地との組み合わせで 安定 高効率な分化誘導を実現! ChiPSC12 ChiPSC18 ChiPSC19 Day11 Day16 複数種類のヒト ips 細胞株からの分化誘導と血管内皮マーカーの発現を確認済み おススメポイントその 2 : 血管内皮細胞以外に 肝細胞への分化誘導キットもラインナップ! ヒト ips 細胞 Day0 Definitive Endoderm Diff. Kit ( 製品コード Y30035) Definitive Endoderm Day7 Hepatocyte Diff. Kit ( 製品コード Y30050) Hepatocyte Day21 Cellartis DEF-CS 500 Culture System Cellartis ips Cell to Hepatocyte Differentiation System による肝分化誘導 ( 製品コード Y30055) MiraCell ips Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit NEW 1 Kit Y50300 129,800 110,330 Cellartis DEF-CS 500 Culture System 1 Kit Y30010 59,800 50,830 MiraCell ips Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit with DEF-CS 500 Culture System NEW 1 Kit Y50301 169,000 143,650 MiraCell EC Culture Medium 1 Set Y50053 35,000 29,750-2 - タカラバイオマンスリーフォーカス - 9 -
NGS ChIP-seq ユーザー様から圧倒的支持を獲得! イルミナ社 NGS 装置用 DNA-seq 用ライブラリー調製キット SMARTer ThruPLEX DNA-Seq Kit わずか 50 pg の断片化 DNA も OK! 貴重な ChIP サンプルも確実に解析面倒なビーズ精製は 1 回のみ 1 チューブ 3 ステップで反応完了 G 社同タイプキットよりも安く コストパフォーマンスも Good おススメポイントその 1 : シンプルプロトコールで操作ストレスを減らします 1: エンドリペア Template Preparation Master Mix 添加 5 分 5 分 5 分ハンズオン 2: ライゲーション 3: 伸長 切断 増幅タイム 15 分 Library Synthesis Master Mix 添加 Library Amplification Master Mix &Index 添加 断片化 dsdna ビーズ精製 ( この 1 回のみ ) 定量プール イルミナ NGS おススメポイントその 2 : G 社同タイプキットよりも安く NGS コストの削減に貢献 製品名容量価格 SMARTer ThruPLEX DNA-Seq Kit( コアキット ) 24 回 104,000 SMARTer DNA Single Index Kit - 12S Set A(Index Kit) 96 回 54,000 158,000 製品名 容量 価格 G 社コアキット 24 回 108,000 G 社 Index Kit 96 回 75,600 弊社キットが 1 反応あたり約 1,000 円お得! 183,600 2018 年 10 月 1 日時点の通常価格を基に比較 SMARTer ThruPLEX DNA-Seq Kit 24 回 R400674 104,000 83,200 本キットには Index Kit は含まれていません 別途ご購入ください 容量違いの製品もキャンペーン対象です 詳しくはウェブサイトをご覧ください - 10 - タカラバイオマンスリーフォーカス
NGS 均一に全ゲノムを増幅し正確な 1 塩基変異 (SNV) 解析が可能! イルミナ社 NGS 装置用 DNA-seq 用ライブラリー調製キット SMARTer PicoPLEX Gold Single Cell DNA-Seq Kit シングルセルや 6 pg DNA から全ゲノム増幅 & ライブラリー調製が可能 MDA 法より均一に全ゲノムを増幅が可能でき 正確な SNV 解析を実現固定した細胞も使用可能 断片化操作は必要なし おススメポイントその 1 : MDA ベースキットより ヌケモレなく均一にゲノムを増幅 サンプル & リード数 : Single Cell 35 M Read pairs ( 弊社比較データ ) H 社 MDA ベースキット PicoPLEX Gold #1 #2 #1 #2 Chromosome 2, 73 kb #1 #2 #1 #2 H 社 MDAベースキットでは読めない領域 ( 赤い点線部分 ) がありましたが PicoPLEX リードが得られました Gold では均一に おススメポイントその 2 : MDA ベースキットより 各段に高い再現性を実現 100 kb bin の total read 数におけるカバレッジ再現性の比較 y = 0.96x + 16.882 R 2 = 0.9612 PicoPLEX Gold y = 0.4598x + 478.09 R 2 = 0.2541 H 社 MDA ベースキット ( 弊社比較データ ) 高い相関性に注目! 2 種類のシングルセルライブラリーからの total read 数の再現性は H 社 MDA ベースキット ( 右 ) や他社の技術 ( データ未表示 ) と比較して PicoPLEX Gold は非常に高い結果となりました SMARTer PicoPLEX Gold Single Cell DNA-Seq Kit 24 回 R300669 134,000 107,200 本キットには Index Kit は含まれていません 別途ご購入ください 容量違いの製品もキャンペーン対象です 詳しくはウェブサイトをご覧ください - 2 - タカラバイオマンスリーフォーカス - 11 -
vol.43 タカラバイオマンスリーフォーカス vol.43 タカラバイオ技術セミナー (-TGCA- Takara Gene & Cell Academy) 情報 タカラバイオでは 様々なテーマで技術セミナーを開催しています それぞれのセミナーでは 原理や基礎をわかりやすく説明し また実験のコツなどお役立ち情報もご紹介します セミナー終了後には 弊社スタッフによる技術相談会も実施しています セミナーに参加いただいた方限定のキャンペーンや 無償サンプル申し込み等の特典もございます 参加費は無料です! ご興味のあるテーマがございましたら ぜひご参加ください 2019 年 1 月 ~2 月開催のセミナースケジュール セミナー名日程会場セミナー内容 はじめてのゲノム編集 基礎と実施例 そしておススメ製品のご紹介 1 月 24 日 ( 木 ) 1 月 31 日 ( 木 ) 大阪 京都 CRISPR/Cas システムの原理や特徴 従来のゲノム編集技術との違い ならびに本システムを利用した実施例についてご説明します また 効率の高い CRISPR/Cas が簡単にスタートできる Cas9 と sgrna の導入システムや CRISPR/Cas の成功率と効率 Up に繋がるサポート製品をご紹介いたします 特に効率の良い長鎖ノックインを行いたい方に必見の製品もご用意しています ポイントがわかる! 遺伝子導入実験 基礎編 ips 細胞ワークショップ 1 ~ フィーダーフリー シングルセル継代によるヒト ips 細胞培養 ~ 2 月 7 日 ( 木 ) 東京 2 月 15 日 ( 金 ) 神奈川 哺乳類細胞への遺伝子導入は目的遺伝子の機能解析やタンパク質の大量発現に必要な技術です 本セミナーは これから遺伝子導入実験を開始する方やクローニングの基礎を学びたい方に向けた内容になっています ベクター構築からトランスフェクション法を用いた遺伝子導入実験の流れをわかりやすくご紹介します 実験操作の動画などを交え より実験のイメージをつかみやすいよう工夫を凝らしたセミナーです 本ワークショップでは Cellartis DEF-CS 500 Culture System を用いた ips 細胞のフィーダーフリー培養についてご説明後 実際の作業を間近でご覧いただきます 培地の調製から STEM-CELLBANKER を用いた凍結保存まで ips 細胞の培養に必要な基本作業を全て行い 操作のコツなどをお伝えします また最後に シングルセルクローニングの際に重要な < 細胞懸濁液の希釈調製 > と < プレートへの細胞播種密度 > のコツについても 顕微鏡観察を交えながらご説明します そろそろ NGS が気になりだした方へ ~DNA 解析 RNA 解析 受託 試薬 ~ 2 月開催予定つくば 最初に NGS の原理 流れについてざっくり簡単にご説明します 次に DNA 解析 RNA 解析それぞれに関連する受託サービス 試薬についてご紹介します NGS がどんなものか知りたい方や これから始めるにあたって色々と情報を仕入れておきたいという方は ぜひご参加ください! お申込み 詳細は タカラバイオ TGCA 検索 本パンフレットで紹介した製品はすべて研究用として販売しております ヒト 動物への医療 臨床診断用には使用しないようご注意ください また 食品 化粧品 家庭用品等として使用しないでください タカラバイオの承認を得ずに製品の再販 譲渡 再販 譲渡のための改変 商用製品の製造に使用することは禁止されています ライセンス情報については弊社ウェブサイトにてご確認ください 本パンフレットに記載された社名および製品名は 特に記載がなくても各社の商標または登録商標です 本パンフレット記載の価格は2019 年 1 月 15 日現在の希望小売価格です 価格に消費税は含まれておりません 2019 年 1 月作成 G 東京支店 TEL 03-3271-8553 FAX 03-3271-7282 関西支店 TEL 077-565-6969 FAX 077-565-6995 テクニカルサポートライン TEL 077-565-6999 FAX 077-565-6995 Website http://www.takara-bio.co.jp Facebook http://www.facebook.com/takarabio.jp 取扱店