HPLC UPLC JP UPLC システムによる注入回数 3000 回以上のルーチン製剤分析の実現分析スループットの向上と使用溶媒量の削減分析効率の向上日本薬局方 (JP) は薬事法第 41 条第一項の規定に基づき医薬品の品質を適性に担保するための公的な規範書であり多くの医薬品の分析

Size: px

Start display at page:

Download "HPLC UPLC JP UPLC システムによる注入回数 3000 回以上のルーチン製剤分析の実現分析スループットの向上と使用溶媒量の削減分析効率の向上日本薬局方 (JP) は薬事法第 41 条第一項の規定に基づき医薬品の品質を適性に担保するための公的な規範書であり多くの医薬品の分析"

まいかおとべ
5 years ago
Views:

JP システムによる注入回数 3000 回以上のルーチン製剤分析の実現分析スループットの向上と使用溶媒量の削減分析効率の向上日本薬局方 (JP) は薬事法第 41 条第一項の規定に基づき医薬品の品質を適性に担保するための公的な規範書であり多くの医薬品の分析法は JP 法を基に開発されますまた一方では最新の技術を積極的に導入することによって

クラリスロマイシンはマクロライド系抗生物質のひとつで一般感染症非結核性抗酸菌症ヘリコバクターピロリ感染症の治療に標準的に用いられています 1991 年に市販され現在では後発医薬品も販売されています本アプリケーションノートではクラリスロマイシン Extended Release tablet (500 mg) のJP 分析法について従来の

1 JP システムによる注入回数 3000 回以上のルーチン製剤分析の実現分析スループットの向上と使用溶媒量の削減分析効率の向上日本薬局方 (JP) は薬事法第 41 条第一項の規定に基づき医薬品の品質を適性に担保するための公的な規範書であり多くの医薬品の分析法は JP 法を基に開発されますまた一方では最新の技術を積極的に導入することによって分析法の質を向上すると同時に効率性の向上コストの削減も望まれています国際的には 2010 年 FDA よりドラフトガイダンスである CMC Post approval Manufacturing Changes Reportable in Annual Reports ( 年次報告書で報告可能な CMC 承認後製造変更 ) が発行され今後の動向に注目が集まっていますクラリスロマイシンはマクロライド系抗生物質のひとつで一般感染症非結核性抗酸菌症ヘリコバクターピロリ感染症の治療に標準的に用いられています 1991 年に市販され現在では後発医薬品も販売されています本アプリケーションノートではクラリスロマイシン Extended Release tablet (500 mg) のJP 分析法について従来のシステムでスループットの向上をもたらす粒子径 2.5 μm のカラムと更なる究極のスループットを実現するシステムで粒子径 1.7 μm のカラムに移管を行った例をご紹介しますまた粒子径 1.7 μm のカラムでは品質管理ラボにおける分析法の実現性の点からルーチン使用 ( 連続 3000 回以上の実サンプルの注入 ) 検証もあわせて実施しました ACQUITY システム Alliance システム ACQUITY BEH Shield RP18 カラム XBridge TM BEH Shield RP18 カラム XBridge BEH Shield RP18 XP カラム ACQUITY カラムカリキュレーター分析法移管クラリスロマイシン錠剤ハイスループット分析品質管理分析コスト削減ルーチン分析製剤分析 1

2 Alliance XBridge BEH Shield RP mm 5 μm ( 製品番号 ) 0.75 ml/min 10 μl 22 分 Alliance XBridge BEH Shield RP18 XP mm 2.5 μm ( 製品番号 ) 1.5 ml/min 5 μl 6 分サンプルは JP 記載クラリスロマイシン錠定量法に従って調製しました 1 市販のクラリスロマイシン錠 500 mg 5 錠を粉末とし緩衝液 ( 分析条件参照 ) を300 ml を加えて攪拌しました次にアセトニトリルおよび内部標準溶液を加えクラリスロマイシンが 5 mg/ml になるように調製しました時々振り混ぜながら10 分間超音波処理した後 4000 rpmで15 分間遠心分離しその上清を孔径 0.2 μm のメンブランフィルターでろ過しましたろ液を移動相で 10 倍に希釈し試料溶液としましたサンプル溶液中のクラリスロマイシン濃度は 0.5 mg/ml 内部標準物質 ( パラオキシ安息香酸ブチル ) は mg/mlですスタンダードも同様に JP 法に従って調製しましたクロライスロマイシン錠定量法では内径 4.6 mm 長さ15 cm 粒子径 5 μm のオクタデシルシリル化シリカゲルカラムが指定されていますそこで粒子径から粒子径まで幅広くラインアップしシステムおよびカラム間でのシームレスな分析法移管が可能な XBridge BEH Shield RP18 カラムを選択しましたまず JP 法を用いて Alliance システムでクラリスロマイシンのスタンダードおよびクラリスロマイシン錠サンプルを 6 回連続注入しましたクロマトグラムを図 1にシステム適合性結果を表 1に示します JP 法記載の定量法システム適合性に両サンプルとも適合しました次にスループットの向上と使用溶媒 / 廃棄溶媒の削減を目的として ACQUITY カラムカリキュレーターを用いて粒子径 5 μm のカラムから 2.5 μm および 1.7 μm のカラムに分析法を移管しました 2 このカリキュレーターはカラムの粒子径カラム長さと内径を基に分析条件が自動で算出されます ( 図 2) その結果を用い Alliance システム XBridge BEH Shield RP18 X P mm カラムと ACQUITY H-Classシステム ACQUITY BEH Shield RP mm (1.7 μm) カラムを用いてクラリスロマイシンスタンダードとサンプルを同様に分析し両カラムにおいて保持時間以外のシステム適合性に適合していることを確認しました ( 表 1) 各クロマトグラムを図 1に示します XBridge BEH Shield RP mm 2.5 μm X P カラムを用いることにより従来のシステムを用いた分析のハイスループット化と効率化を実現することが可能です更に ACQUITY システムと粒子径 1.7 μm の専用カラムを用いた場合には更なる分析のハイスループット化と効率化が実現します粒子径を 5 μm より小さい粒子径に変更した結果システム性能と再現性を維持したまま 2.5 μm のカラムでは 73% の分析時間短縮と45% の溶媒使用量の削減を 1.7 μm のカラムでは 88% の分析時間短縮と 93% の溶媒使用量の削減を実現しました表 1 およびのシステム適合性結果 ( スタンダードの 6 回繰り返し測定 ) ) J P 要件 5 μm XP(2.5 μm) (1.7 μm) 保持時間 ( 分 ) 約 8 分分離度相対標準偏差 ( 面積 ) 2.0% クラリスロマイシン錠のからへの JP 分析法移管 2

ACQUITY H-Class -1 0.020 5 m XBridge BEH Shield RP18 2.1 50 mm 1.7 μm ( 製品番号 186002853) 0.46 ml/min 0.7 μl 2.5 分 ACQUITY H-Class - 2 ACQUITY BEH Shield 2.1 50 mm 1.7 μm ( 製品番号 186002853) 図 1 0.020 0.

20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 1.7 m 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 クラリスロマイシンスタンダードおよびサンプルのクロマトグラム 0.92 ml/min 0.7 μl 1.

3 ACQUITY H-Class m XBridge BEH Shield RP mm 1.7 μm ( 製品番号 ) 0.46 ml/min 0.7 μl 2.5 分 ACQUITY H-Class - 2 ACQUITY BEH Shield mm 1.7 μm ( 製品番号 ) 図 m m m m m クラリスロマイシンスタンダードおよびサンプルのクロマトグラム 0.92 ml/min 0.7 μl 1.4 分 Empower 3 JP システムの性能 : クラリスロマイシン内部標準物質の順に溶出分離度 3 以上システムの再現性 : 内部標準物質のピーク面積に対するクラリスロマイシンのピーク面積の比の相対標準偏差が 2.0% 以下図 2 ACQUITY カラムカリキュレーターを用いたからへの分析法移管クラリスロマイシン錠のからへの JP 分析法移管 3

4 品質管理ラボで分析法を適用するためには分離能分析効率だけではなくカラムの耐久性装置の連続稼動も考慮に入れ検討する必要がありますそこでシステムとカラムを用いた分析法の頑健性を確認するためルーチン使用検証を実施しました今回のルーチン試験ではカラムの特性を生かしてシステム圧を考慮に入れながらカラムカリキュレーターから算出された分析条件と同様の分離能を維持し更にハイスループット分析に対応できるように流速を調整しました (ACQUITY H-Class 条件 - その2 参照 ) その結果分析時間は1.4 分と更に短縮され従来の分析と比較して 94% の分析時間短縮と 92% の溶媒使用量の削減を実現しましたルーチン分析検証時はブランク ( 移動相溶媒 )1 回 -スタンダード 3 回 -サンプル 20 回注入を1 つのサンプルセットとしましたこのサンプルセットを繰り返し分析し 3000 回注入を実施しましたまたシステム適合性を確認するためルーチン分析の間に定期的にスタンダードの 6 回注入を実施しあわせてシステム圧のモニターも実施しましたその結果 3000 回注入後でも保持時間以外の JP のシステム適合性要件に適合しており ( 表 2) システム圧も若干の上昇は見られましたが分析を通して安定していました ( 図 3) psi J P 要件注入開始 3000 回注入時保持時間 ( 分 ) 約 8 分分離度相対標準偏差 ( 面積 ) 2.0% 図 3 ルーチン分析時のシステム圧モニター表 2 クラリスロマイシンルーチン分析検証時のシステム適合性試験結果 ( スタンダード 6 回繰り返し測定 )

5 ACQUITY カラムカリキュレーターを用いクラリスロマイシン錠の JP 定量法を粒子径 5 μm の分析法から 2.5 μm 1.7 μm の分析法へと問題なく移管することができました 2.5 μm カラムでは 73% の分析時間短縮と45% の溶媒使用量の削減を実現し従来のシステムを有効活用したシステムの効率化と 1 分析当たりのコストの削減が可能ですまた新技術であるシステムと粒子径 1.7 μm の専用カラムを用いることで 88% 分析時間の短縮と 1. 第十六改正日本薬局方クラリスロマイシン錠 ( 平成 23 年 3 月 24 日厚生労働省告示第 65 号 ) 2. Jones M.D., Alden P., Fountain K.J., Aubin A. Implementation of Methods Translation between Liquid Chromatography Instrumentation, Waters Application Note [2010], Part Number EN. 93% 使用溶媒量削減が可能であり究極のシステム効率化とコスト削減を実現することができますさらに Empower 3 を用いてシステム適合性要件およびシステム圧を経時的にモニターし各データの管理解析することで製剤試験の効率化とシステムの稼動状況の視覚化を図ることができますカラムを用いたルーチン分析では 3000 回以上の注入後も JP クラリスロマイシン錠定量法に規定されている保持時間以外のシステム適合性要件に適合しておりルーチン QC 分析における分析法の頑健性も実証することができましたウォーターズのトータルソリューションである最新技術を用いた分析システム幅広いカラムケミストリーラインアップデータ管理ソフトウェアそして分析法移管ツールを活用することで簡便且つシームレスに JP 法記載の分析法をラボの状況に合わせて 2.5 μm もしくは 1.7 μm に移管しシステムの効率化コスト削減を図ることが可能です TEL FAX FTEL FAX Waters ACQUITY Alliance および Empower は Waters Corporation の登録商標です BEH Technology XBridge および The Science of What s Possible は Waters Corporation の商標ですその他すべての登録商標はそれぞれの所有者に帰属します 2013 Waters Corporation. Printed in Japan 年 1 月 MKT12178 PDF

すとき, モサプリドのピーク面積の相対標準偏差は 2.0% 以下である. * 表示量溶出規格規定時間溶出率 10mg/g 45 分 70% 以上 * モサプリドクエン酸塩無水物としてモサプリドクエン酸塩標準品 C 21 H 25 ClFN 3 O 3 C 6 H 8 O 7 :

すとき, モサプリドのピーク面積の相対標準偏差は 2.0% 以下である. * 表示量溶出規格規定時間溶出率 10mg/g 45 分 70% 以上 * モサプリドクエン酸塩無水物としてモサプリドクエン酸塩標準品 C 21 H 25 ClFN 3 O 3 C 6 H 8 O 7 : モサプリドクエン酸塩散 Mosapride Citrate Powder 溶出性 6.10 本品の表示量に従いモサプリドクエン酸塩無水物 (C 21 H 25 ClFN 3 O 3 C 6 H 8 O 7 ) 約 2.5mgに対応する量を精密に量り, 試験液に溶出試験第 2 液 900mLを用い, パドル法により, 毎分 50 回転で試験を行う. 溶出試験を開始し, 規定時間後, 溶出液 20mL