LC/MS/MS による類分析 日本ウォーターズ株式会社 15 Waters Corporation 1 対象化合物 - クロロ (-CPh) 4-クロロ (4-CPh),4- ジクロロ (,4-DPh),6- ジクロロ (,6-DPh),4,6- トリクロロ (,4,6-TPh) 15 Waters Corporation 1
サンプル調製 ( 検量線 標準液 ) 5 標準溶液添加 (,,4,,,5uL) 精製水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS 分析 15 Waters Corporation 3 サンプル調製 ( 水道水サンプル溶液 ) 5 標準溶液添加 (,4uL) 水道水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) L- アスコルビン酸 Na5mg (5mg/mL 5uL) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS 分析 15 Waters Corporation 4
LC 分析条件 LC 条件 LC システム : カラム : カラム温度 : 4 移動相 A: 移動相 B: ACQUITY UPLC H-ass ACQUITY UPLC HSS T3,.1 x mm, 1.8µm 水 メタノール 注入量 : µl(5 ul ループ ) 流速 : グラジエント :.45 ml/ Time() A B Curve. 8 Initial.33 6 4 6 3.33 6 4 6 1. 8 6 11. 8 11 分析時間 : 13 分 15 Waters Corporation 5 MS 分析条件 MS 条件 MS システム : イオン化モード : 分析モード : コロナ : Xevo TQ-S micro APCI negative SIR ソース温度 : 15 プローブ温度 : 脱溶媒ガス : コーンガス : SIR 1 ua(1.5 kv) 1 L/hr 15 L/hr Name モニターイオン コーン電圧 (V) 15 Waters Corporation 6 RT IonMode Phenol 9.75 68.19 APCI- -CPh 16.8 3 3.73 APCI- 4-CPh 16.8 46 4.59 APCI-,6-DCPh 16.8 56 5.9 APCI-,4-DCPh 16.8 5 7.3 APCI-,4,6-TCPh 194.8 6 8.86 APCI- 3
水道水添加 SIR クロマトグラム添加濃度.8( 最終溶液 4) Tap.8 16_1 7: SIR of 1 Channel AP- 8.87 194.8 (46-TCPh) 5.4e4,4,6-トリクロロ. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 1. 16_1 6: SIR of 1 Channel AP- 7.31 16.8 (4-DCPh) 7.7e4,4-ジクロロ. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 1. 16_1 5: SIR of 1 Channel AP- 5.9 16.8 (6-DCPh) 6.97e4,6-ジクロロ. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 1. 16_1 4: SIR of 1 Channel AP- 4.56 16.8 (4-CPh) 1.31e5 4-クロロ 3. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 1. 16_1 3: SIR of 1 Channel AP- 3.7 16.8 (-CPh) -クロロ 7.3e4 9. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 1. 16_1 : SIR of 1 Channel AP-.18 9.75 (Phenol) 9.7e4 18 Time. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 1. 15 Waters Corporation 7 SIR クロマトグラム ( 最終溶液 4) 16_119 16_119 16_119 16_119 Phenol -CPh 4-CPh 6-DCPh 16_119 4-DCPh 16_119 46-TCPh 15..5 5 3.5 4. 4.5 5. 1 5.5 6. 1 7. 7.5 8.5 9. 9.5 標準溶液.8 -クロロ標準溶液.8 4-クロロ標準溶液.8,6-ジクロロ標準溶液.8,4-ジクロロ標準溶液.8,4,6-トリクロロ標準溶液.8 16_1 Phenol 16_1 -CPh 16_1 4-CPh 16_1 6-DCPh 16_1 4-DCPh 16_1 46-TCPh 18..5 水道水.8 1 3.5 4. -クロロ水道水.8 3 4.5 5. 4-クロロ水道水.8 5.5 6. 15 Waters Corporation 8,6-ジクロロ水道水.8 7. 7.5,4-ジクロロ標準水道水.8 3 8.5 9. 9.5,4,6-トリクロロ水道水.8 4
検量線 Compound name: Phenol Correlation coefficient: r =.999616, r^ =.99933 Calibration curve: 98.757 * x + 954.66 Compound name: -CPh Correlation coefficient: r =.99911, r^ =.998 Calibration curve: 133.8 * x + -3.778 5 R^=.999. 1.. 3. 4. 5. 5 - クロロ R^=.998. 1.. 3. 4. 5. Compound name: 4-CPh Correlation coefficient: r =.99936, r^ =.99847 Calibration curve: 83.9 * x + -4.769 Compound name: 6-DCPh Correlation coefficient: r =.999469, r^ =.998938 Calibration curve: 1418.1 * x + -14.19 4- クロロ R^=.998. 1.. 3. 4. 5. 5,6- ジクロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5. Compound name: 4-DCPh Correlation coefficient: r =.99955, r^ =.9995 Calibration curve: 143.5 * x + -18.581 Compound name: 46-TCPh Correlation coefficient: r =.999595, r^ =.999191 Calibration curve: 98.66 * x + 16.967 5,4- ジクロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5. 4,4,6- トリクロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5. 15 Waters Corporation 9 妥当性評価結果 化合 A 物 検量線範囲 () R^ 基準値 *1/1 (ug/l=) 基準値 *1/1(u 基準値 *1/1 g/l=) (ug/l=) 最終溶液換算 測定濃度 1 日目 n=5 () 最終 () 溶液換算 真度 () 併行精度 RSD n=5 Phenol.4-1.999.8 4 4 3.718 93 4.8 -CPh.4-1.998.8 4 4 3.8854 97 5.4 4-CPh.4-1.998.8 4 4 3.95 98 4..5,6-DCPh.4-1.999.8 4 4 3.799 95 3.9,4-DCPh.4-1.999.8 4 4 3.7876 95 4.5,4,6-TCPh.4-1.999.8 4 4 4.468 11 7. 化合物 1 日目 n=5 日目 n= 3 日目 n= 4 日目 n= 5 日目 n= 室内精度 () () () () () RSD Phenol 3.718 3.3945 3.8 3.48 3.68 4.6 -CPh 3.8854 3.3835 3.8395 3.4965 3.8495 6.3 4-CPh 3.95 3.683 4.153 3.995 3.965 4.,6-DCPh 3.799 3.496 4.335 3.545 3.8675 6.,4-DCPh 3.7876 3.77 3.945 3.745 3.835.,4,6-TCPh 4.468 3.754 4.395 3.94 3.7475 3.8 15 Waters Corporation 1 5
LC/MS/MS による類分析 日本ウォーターズ株式会社 15 Waters Corporation 1 対象化合物 - クロロ (-CPh) 4-クロロ (4-CPh),4- ジクロロ (,4-DPh),6- ジクロロ (,6-DPh),4,6- トリクロロ (,4,6-TPh) 15 Waters Corporation 1
サンプル調製 ( 検量線 標準液 ) 5 標準溶液添加 (,,4,,,5uL) 精製水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS/MS 分析 15 Waters Corporation 3 サンプル調製 ( 水道水サンプル溶液 ) 5 標準溶液添加 (,4uL) 水道水 5mL(H にて ph=. に調製,(.1M-H 5uL)) 乾燥 (1 空気吸引 ) L- アスコルビン酸 Na5mg (5mg/mL 5uL) Oasis HLB Plus コンディショニング ( メタノール 5mL 精製水 5mL) バックフラッシュ溶出 ( メタノール ) ( 溶出液が 1mL となるまで ) 通液 (1mL/) 精製水にて 5mL に定容 洗浄 ( 精製水 5mL) LC/MS/MS 分析 15 Waters Corporation 4
LC 分析条件 LC 条件 LC システム : カラム : ACQUITY UPLC H-ass ACQUITY UPLC HSS T3,.1 x mm, 1.8µm カラム温度 : 4 移動相 A: 移動相 B: 水 メタノール 注入量 : µl(5 ul ループ ) 流速 : グラジエント : 分析時間 :.45 ml/ Time() A B Curve. 8 Initial.33 6 4 6 3.33 6 4 6 1. 8 6 11. 8 11 13 分 15 Waters Corporation 5 MS 分析条件 MS 条件 MS システム : イオン化モード : 分析モード : コロナ : Xevo TQ-S micro APCI negative SRM 1 ua(1.5 kv) ソース温度 : 15 プローブ温度 : 脱溶媒ガス : 1 L/hr コーンガス : 15 L/hr SRM Name プレカーサイオン プロダクトイオン コーン電圧コリシ ョンエネルキ ー (V) (ev) RT IonMode Phenol 9.75 64.7 68 17.19 APCI- -CPh 16.8 34.8 3 14 3.73 APCI- 4-CPh 16.8 34.8 46 16 4.59 APCI-,6-DCPh 16.8 34.8 56 17 5.9 APCI-,4-DCPh 16.8 14.65 5 14 7.3 APCI-,4,6-TCPh 194.8 34.8 6 8.86 APCI- 15 Waters Corporation 6 3
水道水添加 SRM クロマトグラム添加濃度.8( 最終溶液 4) Tap.8 16_1 13: MRM of 1 Channel AP- 8.88 194.8 > 34.8 (46-TCPh),4,6-トリクロロ 1.38e3 1.5..5 3. 3.5 4. 4.5 5. 5.5 6. 6.5 7. 7.5 8. 8.5 9. 9.5 16_1 1: MRM of 1 Channel AP- 7.31 16.8 > 14.65 (4-DCPh),4-ジクロロ 7.e3 1.5..5 3. 3.5 4. 4.5 5. 5.5 6. 6.5 7. 7.5 8. 8.5 9. 9.5 16_1 11: MRM of 1 Channel AP- 5.93 16.8 > 34.8 (6-DCPh),6-ジクロロ 1.95e3 1.5..5 3. 3.5 4. 4.5 5. 5.5 6. 6.5 7. 7.5 8. 8.5 9. 9.5 16_1 1: MRM of 1 Channel AP- 4.57 16.8 > 34.8 (4-CPh) 4-クロロ.73e3 1.5..5 3. 3.5 4. 4.5 5. 5.5 6. 6.5 7. 7.5 8. 8.5 9. 9.5 16_1 9: MRM of 1 Channel AP- 3.7 16.8 > 34.8 (-CPh) -クロロ 1.6e3 1.5..5 3. 3.5 4. 4.5 5. 5.5 6. 6.5 7. 7.5 8. 8.5 9. 9.5 16_1 8: MRM of 1 Channel AP-.18 9.75 > 64.7 (Phenol) 1.6e3 1 Time 1.5..5 3. 3.5 4. 4.5 5. 5.5 6. 6.5 7. 7.5 8. 8.5 9. 9.5 Corporation 15 Waters 7 SRM クロマトグラム ( 最終溶液 4) 16_119 16_119 16_119 16_119 Phenol -CPh 4-CPh 6-DCPh 16_119 4-DCPh 16_119 46-TCPh 1.79 9.4 1..5 3.5 4. 4.5 5. 5.5 6. 7. 7.5 8.5 9. 標準溶液.8 -クロロ標準溶液.8 4-クロロ標準溶液.8,6-ジクロロ標準溶液.8,4-ジクロロ標準溶液.8,4,6-トリクロロ標準溶液.8 16_1 Phenol 16_1 -CPh 16_1 4-CPh 16_1 6-DCPh 16_1 4-DCPh 16_1 46-TCPh 15 1.91..5 水道水.8 3.5 4. -クロロ水道水.8 4.5 5. 4-クロロ水道水.8 5.5 6.,6-ジクロロ水道水.8,4-ジクロロ標準水道水.8,4,6-トリクロロ水道水.8 15 Waters Corporation 8 7. 7.5 8.5 9. 9.13 4
検量線 Compound name: Phenol Correlation coefficient: r =.999471, r^ =.99894 Calibration curve: 15.8863 * x + 14.56 Compound name: -CPh Correlation coefficient: r =.999544, r^ =.99988 Calibration curve: 3.3718 * x + -4.387 5 R^=.999. 1.. 3. 4. 5. - クロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5. Compound name: 4-CPh Correlation coefficient: r =.99943, r^ =.99887 Calibration curve: 61.793 * x + -11.1141 Compound name: 6-DCPh Correlation coefficient: r =.999486, r^ =.99897 Calibration curve: 4.1444 * x + -9.514 5 4- クロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5.,6- ジクロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5. Compound name: 4-DCPh Correlation coefficient: r =.999584, r^ =.999169 Calibration curve: 139.36 * x + -16. Compound name: 46-TCPh Correlation coefficient: r =.999744, r^ =.999487 Calibration curve: 9.739 * x + -4.9353 5,4- ジクロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5.,4,6- トリクロロ R^=.999. 1.. 3. 4. 5. 15 Waters Corporation 9 妥当性評価結果 化合物 検量線範囲 () R^ 基準値 *1/1 (ug/l=) 基準値 *1/1 (ug/l=) 基準値 *1/1(u g/l=) 最終溶液換算 測定濃度 1 日目 n=5 () 最終 () 溶液換算 真度 () 併行精度 RSD n=5 Phenol.4-1.999.8 4 4 3.9113 98.8 -CPh.4-1.999.8 4 4 3.861 97 1.8 4-CPh.4-1.999.8 4 4 3.867 97 4..5,6-DCPh.4-1.999.8 4 4 3.8417 96 4.3,4-DCPh.4-1.999.8 4 4 3.77 93 4.,4,6-TCPh.4-1.999.8 4 4 4.1135 13 4.4 化合物 1 日目 n=5 () 日目 n= () 3 日目 n= () 4 日目 n= () 5 日目 n= () 室内精度 RSD Phenol 3.9113 3.683 3.71 3.79 3.5748 3.5 -CPh 3.861 3.689 3.9669 3.578 3.875 4.9 4-CPh 3.867 3.78 3.9833 3.733 3.97.6,6-DCPh 3.8417 3.4639 3.9798 3.543 3.8685 6.,4-DCPh 3.77 3.7366 3.851 3.748 3.7964 1.1,4,6-TCPh 4.1135 3.8665 3.99 3.998 3.967.4 15 Waters Corporation 1 5