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- さみ つつの
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1 平成 年度戦略的基盤技術高度化支援事業 全血を用いたヒト代謝系抗酸化能測定キットの開発 研究開発成果等報告書 平成 25 年 2 月 委託者 : 九州経済産業局 委託先 : 株式会社同仁化学研究所
2 目次ページ第 1 章研究開発の概要 研究開発の背景 研究目的及び目標 研究体制 成果概要 当該研究開発の連絡窓口.. 7 第 2 章 本論 2-1 技術の説明 開発項目 1 測定方法の確認 精度向上 開発項目 2 ラジカル種と抗酸化能の相関関係解析 開発項目 3 食品摂取によるラジカル変化 開発項目 4 商用受託分析実験 26 第 3 章総括 別紙別紙 1 開発キットについて 30 別紙 2 用語の説明.. 31 備考 1. 認定年度と認定番号平成 22 年度認定事業 ( 平成 九州第 26 号 ) 平成 23 年度認定事業 ( 平成 九州第 190 号 ) 平成 23 年度認定事業 ( 平成 九州第 6 号 ) 特定研究開発等計画認定番号九州 テーマと目的 全血を用いたヒト代謝系抗酸化能測定キットの開発 3. 実施期間 平成 22 年 9 月 1 日から平成 25 年 2 月 14 日まで 1
3 第 1 章 研究開発の概要 平成 22 年度および平成 23 年度の実施により 全血の抗酸化能を評価する工程を確立するこ とができた この工程確立においては サンプルの取り方 保存 輸送方法など 生体から採取 する段階から測定までの全てを管理する必要があるということが分かった 但し 個人の全血の 抗酸化能の日間差はさほど大きくないと考えられるデータもある 従って 食事 飲酒 喫煙な ど 消化器系および呼吸器系からの外部物質の取り込みを制限することにより その人の全血の 抗酸化能を把握できるものと考えられる また ストレスの掛かり方が全血の抗酸化能に反映す る可能性もあり ストレスもコントロールする必要があるようなデータも出ている また 全血 が高い抗酸化能を示す人と低い人では 発酵食品摂取によって 抗酸化能の亢進の仕方に差があ る事がわかり 評価に当たっては 抗酸化能の低い実験動物を使用する必要があると判断された マウスにおいて抗酸化能の低い動物を作り出すために ストレス負荷試験を行い どのようなス トレスが抗酸化能を低下させるかを調査した その結果 通常のストレス負荷では全血の抗酸化 能の低下を誘導することができなかった 一晩絶食させることにより 抗酸化能が低下すること が分かったため この条件を使用し 食品摂取の効果を調べた また 動物種の差がどう反映す るかを調べるためブタを使用した 平成 22 年度 23 年度に行ったウサギとヒトを含めた動物実 験の結果を総括すると 食品摂取の全血抗酸化能に及ぼす効果は動物種によって異なり一様ではないということである これは 各動物の代謝の違いを反映しているのかもしれないし 摂取時 のストレスの掛かり方の違いも関係しているかもしれない 生体という極めて複雑なシステムで の評価のため これが一概にそれぞれの動物種でその傾向があると結論づけられた訳ではない 今後の更なるデータの蓄積が求められる 本事業の目的の一つである 抗酸化活性の高い発酵食品の改良については 当初 3 か月熟成後 1 か月加熱加速熟成した味噌 (3+1 カ月味噌 ) が 抗酸化活性が高く 且つ人への摂取によ って 全血の抗酸化能が亢進することが確認できたが 醤油麹を用いて調製した味噌については 摂取による抗酸化能亢進は逆の方向になった 今のところ 抗酸化能を亢進させる発酵食品の改良には 直接繋がっていないが 醤油の持つ 抗酸化活性をそれぞれの分画ごとに測定することにより どの分画部分に抗酸化能の高い成分が 入っているかを確認することができた これは 抗酸化能を持つ分子の確定に繋がると考えられ サプリメントの効果のある食品となる可能性がある 原料や酵母 発酵工程を細かく検討するこ とにより 新たな機能を持った発酵食品が調製できると考えられ 抗酸化能測定方法は 食品分 析の手法となっていくかもしれない 但し 生体の抗酸化能が健康に重要な因子であることが明 らかになる必要がある 1-1 研究開発の背景 研究目的及び目標 近年 病気の予防的観点 アンチエイジングの観点から抗酸化能のある機能性食品へ消費者の 関心が高い 米国では国立老化研究所の指針に基づいてそれぞれの食品成分の抗酸化力を数値化 2
4 し 各食材やサプリメントに表示されてきている しかしながら この方法は食品の含有成分だ けを対象としたもので 実際に生体内で抗酸化活性があるかどうかの判断には至っていない 日 本の食文化の一つである発酵食品は従来法によって抗酸化値を規定できる食品ではなく 発酵食 品の抗酸化機能は正当に評価されにくい 摂取した後の生体内での代謝的抗酸化能を測定するこ とにより 極めて多くの成分の混合状態にある食品が持つ本来の総合的な抗酸化活性が評価でき ると考えられ そのための手法の開発が必要である 全血を用いて代謝系での抗酸化活性を測定するには 幾つかの大きな課題がある 一つは 血 液に含まれる着色成分や微量金属 タンパク質などが測定に影響を与えること もう一つは水系 でラジカルを捕捉し測定に耐えるほど長時間安定なアダクトを形成する試薬がなかったことで ある これらの課題を克服するために 新規試薬を用いより安定なアダクトを形成する方法を確 立する必要がある 味噌自体の消費量は年々低下傾向にあるため 抗酸化能を謳い機能性食品としての位置付けを 明確にすることによって 味噌の消費量を上向かせることができると考えられる また 新たな 発酵プロセスや素材を使用することにより 代謝系で抗酸化能が更に高い発酵食品を作り出すことができる 抗酸化能の変化を測定することは 食材の抗酸化機能を見るに留まらず 各種疾病 の指標や投薬による治療効果の検証にも使用できると考えられる 本事業の目的は ヒト全血を用いて生体内の抗酸化能を測定できるキットを開発することであ り この事業によって製品化を行うことができた しかし 生体内の抗酸化能が個人毎に違いが あるのか あるとすればどの程度の違いか また どの程度の時間変化 日間変化があるのか 食事との相関はあるか その違いや変化は 人が健やかに人生を送る上でどのような意味を持つ のかなど 抗酸化が生体に及ぼす効果は明確でなく 本キットを使って疫学的に調査することで 何らかの相関が見えてくる可能性がある 人の平均寿命には地域差があり これが食事や習慣に 起因するものであれば どのような因子が関与するかを分析する手段となりうる また 抗酸化 機能のレベルを向上させることが疾病の発症を抑制できるとのことになれば 継続的に測定する ニーズが生まれる可能性がある また 昨年 米国農務省 (USDA) の栄養データラボ (NDL) は 食品の抗酸化能の指標としてきた活性酸素吸収能力値 (ORAC 値 ) データベースを彼らのウェブサイトから取り下げた その理由は 人の健康状態を把握するための臨床試験結果と食品に含まれる ORAC 値で表示さ れる抗酸化活性は相関しないという結果が得られたためである 今のところ 抗酸化能を持つ食 品中の成分が直接体内で抗酸化性を示すという証拠もなく また 抗酸化活性が健康にどう効果 があるのかということも分かっていない状況がある 従って 抗酸化活性と健康の相関があるの かどうかを知る事が重要となり 開発された測定法を用いて相関研究が加速すれば その結果が 本事業の最も重要な成果となると考えられる 3
5 1-2 研究体制 研究組織 1-3 成果概要 1 測定方法の確認 精度向上 1-1 ラジカルの安定化本項目で目的としていた Diphenyl-PMPO(DPhPMPO) を使って形成させたスピンアダクトを混合有機溶媒を使って抽出し安定化させて ESR で測定する方法を確立した 商用ベースでの測定法としてキット化 マニュアル化するために 採血から測定までのプロセスを精査しその影響を調べ 測定者間差を含めて測定値の標準偏差を 3% 以内に収めることができた 試薬キットとして製品化するに当たり コンポーネントである t-buooh(t- ブチルヒドロペルオキシド ) 水溶液が不安定であることが分かった 容器と空隙容量 保管温度などを検討した結果 安定化できる条件を見出し キットの製品化の目途を立てることができた キットは 個別研究者への展開 データ蓄積 論文化を経て販売へ移行する 1-2 試薬合成 更に安定なスピンアダクトを形成させるためのプローブ開発を検討したが DPhPMPO よりも優れ た機能を付加することはできなかったため DPhPMPO の安定化を優先した 4
6 主要コンポーネントである DPhPMPO のロット間差を見た その結果 ESR ブランク値の 変動もなく フェントン反応によるシグナル強度にも差がみられなかった 合成工程を確実 に行うことで データの再現性の高い試薬が調製できることを確認した 1-3 発酵食品の抗酸化能の in vitro in vivo 実験発酵食品の抗酸化能を in vitro で評価し 純搾り 醤油の抗酸化活性が高いことを見出し 醤油麹を使った 醤油味噌 として のぼる 2 号 のぼる 3 号 を調製した その結果 通常の味噌よりも in vitro での抗酸化活性が高くなることが分かった のぼる 2 号 味噌について発酵熟成過程での成分変動の分析を行い 食品分析で一般的に使用される ORAC 法を用いて それぞれの抗酸化能を測定した その結果 ORAC 値は通常の味噌の 1.8 倍を示し そのものの抗酸化活性は高いと考えられる 抗酸化活性は 1 カ月の加熱熟成で 1.7 倍 9 カ月間の加熱熟成によって 1.8 倍となっており 1 カ月の加熱熟成で抗酸化能が十分に亢進することが分かった 抗酸化能亢進は醤油麹の効果である可能性が示唆された 実験動物を使って発酵食品の摂取効果を評価し ヒト治験を行うこととし ウサギを使用して 血液の抗酸化能の変動を調べた その結果 ウサギは塩分に対する耐性が低いこと 草食性であり発酵食品の抗酸化能データをヒト用に代替することは難しいと考えた そのためマウス ブタを用いることにした マウスを絶食させることで血中の抗酸化能が低下することが分かったため 絶食マウスを用いて食品摂取効果を見た ウサギ マウスおよびヒト治験で得られたデータと比較する目的で 3 種類の食品摂取による分析を行い 動物種による効果の違いを把握することができた 食品摂取による血液の抗酸化能に及ぼす影響は動物種間で同じではない事が示された 目的とした 発酵食品の抗酸化能が直接ヒト全血の抗酸化能を亢進するという結果は見えておらず 最終的な結論は 開発したキットを使った今後の研究に委ねることになる 1-4 実験内容の検証本測定法による全血および血漿の抗酸化能が定量的に測定できることを確認した 血液サンプルをバッファーで希釈したサンプルは 希釈率と高い相関があり また 10% 程度の血液量の差を認識することができた 社内ボランティアとして個人の全血の抗酸化能の日々の変動を観察したところ I0/I-1 表記で 2 倍程度の変動があることが分かった (I: サンプル添加していないラジカル強度 I: サンプル添加したラジカル強度 ) 個人の全血の抗酸化能のこの変動が普通に見られるものなのかは分からないが 今後のデータの積上げにより明らかになっていくものと考えている 5
7 2 ラジカル種と抗酸化能の相関関係解析 2-1 in vitro in vivo でのラジカル種の分子種解析平成 23 年度のウサギおよびヒトの血中ラジカル種の差異 変動解析 (SIEVE) による分子種解析の結果 ESR シグナルと連動する分子が見つかったが 分子構造の同定までには至っていない 但し 定量性のある分子も 再現性よく出てくる分子ではなく 個体間でも同じ分子が検出されてこないという課題があった 今回 さらにマウスおよびブタの血液分析を行ったが 動物種間で共通に検出される分子種は見出されていない 抗酸化能が高かった純搾りの分画成分の分析を行った その結果 純搾りの成分として 6 種類の分子を検出することができた 血液サンプルの LC/MS 分析データにその 6 種類の分子質量で検索をかけた しかしながら 6 種類の分子とも 純搾り摂取マウスの血液サンプルからは検出されなかった 消化および代謝の過程において 分子が分解されていることが予想され そのままでは検出されてこないと考えられた 従って 抗酸化能の発現を促す食品中の分子種を同定するには 単純に ESR のデータと分子量で相関する分子を見るだけでは全く不十分であり MS/MS 分析や 生体内の代謝機構の中で どのような分子に変化するかのシュミレーション技術を取り入れた分析が必要であると考えている 2-2 血中ラジカル量の変動確認平成 22 年のヒト治験でのサンプルをはじめとして 実験動物としてウサギ マウス ブタを使った食品摂取実験で得られた血液サンプル 3000 種類を LC/MS 分析したデータを蓄積した 継続して差異 変動解析ソフト (SIEVE) を用いて ESR データとの対比を手作業で行っている 数十万種類の分子それぞれについて確認作業を行うのは現実的でなく 上記で述べたようにシュミレーションを取り入れた分析手法が必要になってくる このデータは将来の解析技術との組み合わせにおいて貴重なものとなると考えられる 3 食品摂取によるラジカル変化 3-1 発酵食品摂取後の血液分析被験者に発酵食品として 3+1 カ月味噌 のぼる 3 号 と 純搾り 醤油 ブルガリアヨーグルト を摂取してもらい 全血の抗酸化能の変動を調べた その結果 純搾り 醤油と 3+1 カ月味噌 は被験者の初期抗酸化能値が低いグループではわずかながら摂取後に抗酸化能の亢進が見られ 初期抗酸化能値が高いグループでは変化がなかった ヨーグルト では初期抗酸化能の値に関わらず 僅かに抗酸化能の亢進が見られた 一方 のぼる 3 号 味噌摂取後 全ての被験者の全血の抗酸化能が大きく低下するデータが得られた 思惑とは異なる結果であるが 治験者全員の抗酸化能の変動が採血時間毎でも同じ傾向を示したのは初めてである 通常 抗酸化能の変動は個体間差があると考えていただけに の 6
8 ぼる 3 号 摂取実験での全血サンプルが どうしてシンクロナイズしたのかは不明であるし 興味深い結果である ヒトが持つ何らかの共通の生体機能が のぼる 3 号 摂取によって働いたことが示唆される このような のぼる 3 号 の摂取効果はブタやマウスでは見られない 4 商用受託分析 4-1 検体種別毎の測定方法確立本事業の根幹である全血サンプルの測定方法について詳細な検討を行った結果 採血直後からの温度管理がデータの再現性を得る上で最も重要であることが分かった 採血直後に測定した数値と 特定の条件の下 輸送された同一サンプルを用いて測定した数値とは高い一致を見た 4-2 検体処理方法の事例検証多数の検体を一度に処理し それをまとめて ESR で測定することを想定し DPhPMPO と一般的に用いられる DMPO(5,5-Dimethyl-1-pyrroline N-oxide) のスピンアダクトの安定性を評価した その結果 スピンアダクト形成後に乾燥し固体状態とした DPhPMPO は 140 日以上安定であるという結果となった 一方 DMPO のスピンアダクトは乾燥工程に耐えなかったため すぐに失活した 以上のことから DPhPMPO のスピンアダクトは固体状態で長期に保管できるため ESR がない施設でも本キットを使って ESR 用サンプルとして調製し 受託測定機関にて測定可能である 1-4 当該研究開発の連絡窓口 氏名 : 志賀匡宣 ( しがまさのぶ ) 所属 : 株式会社同仁化学研究所試薬開発本部電話 : ファクス : shiga@dojindo.co.jp 7
9 第 2 章本論 2-1 技術の説明 本委託事業の根幹となる測定技術について説明する ESR( 電子スピン共鳴 ) 装置を使ったラジカル分析は サンプルに含まれる妨害物質の影響を受けにくいため 食品や生体成分の分析に多く用いられている 図 1 の ESR スペクトル例に示すようにサンプルに含まれるラジカル量をシグナル幅として検出できるため 内部標準に用いられている二価マンガンのシグナル幅 (Mn) からサンプルに含まれるラジカル量を決定できる 図 1 ESR スペクトル例 図 2 ESR 装置 ( 日本電子社製 JES-FA100) ラジカルは高反応性の酸化性物質であり 生体内においては老化やガンなどの疾病の原因物質の一つと考えられている そのため 抗酸化能のある食品やサプリメントは 老化を抑える効果やガンなどの疾病にかかりにくくする効果が期待できると考えられている したがって 発生したラジカルを消去する生体の能力が高いほど老化の進行が遅くなり健康体でいられる可能性がある 生体の抗酸化能は ラ 8
10 ジカル消去能で評価することができると考えられるため 図 3 に示すように ラジカル発生系を組込んで サンプル添加によって減少するシグナル量から抗酸化能を評価するシステムを構築した t-buooh はヘモグロビン触媒により各種ラジカルを発生する そのラジカルを生体サンプル中の抗酸化性物質が消費し 消費されなかったラジカルは ESR プローブである DPhPMPO と反応してスピンアダクトを形成する 有機相へ抽出される安定なスピンアダクトは ESR で検出される シグナル強度が小さくなれば t-buooh 由来のラジカルと反応する抗酸化性物質があることになり 減少量が抗酸化性物質の量とみなすことができる ( 図 4) 図 3 試料中の抗酸化物質の測定原理 図 4 サンプル中の抗酸化能と ESR シグナルの関係 9
11 抗酸化能力が高い状態と低い状態での ESR 測定値への影響を下の図で示す 抗酸化性物質が多く 存在している場合 発生したラジカルは抗酸化物質により捕捉され 結果的に DPhPMPO と反応し抽 出されるスピンアダクトの量は少なくなる 逆に 抗酸化性物質が少ない場合は 発生したラジカルの抗酸化性物質による消費量は少なく 多くのラジカルは DPhPMPO と反応し抽出されるため スピンアダクトの量は多くなる 従って スピンアダクトの量を測定することにより サンプル中の有機ラジカルと反応する抗酸化性物質の絶対量を知ることができる 10
12 2-2 開発項目 1 測定方法の確認 精度向上 開発項目 1-1 ラジカルの安定化 DPhPMPO とそのスピンアダクトの分子構造を図 5 に示す O P H 3 C O - + N RO. O P H 3 C O. N OR 図 5 スピンアダクトの分子構造 DPhPMPO を使って形成させたスピンアダクトを混合有機溶媒を使って抽出し安定化させて ESR で 測定する方法を確立した 抽出されるスピンアダクトの量や安定性は抽出溶媒によって大きく変わる シ グナル強度や有機溶媒の取り扱いやすさなどを勘案し クロロホルム / メタノール (C/M) 混合溶媒を選 択した その後 サンプルとの反応条件や 溶媒抽出条件 遠心分離条件などを細かく検討し 比較的安定なスピンアダクトの形成と 各種サンプルでの再現性の高いデータ解析を行うことが できる手法を開発することができた 図 6 全血サンプル測定におけるヒト間差ヒト全血をにしくまもと病院で処理したサンプルと規定された条件で搬送し同仁化学で処理したサンプルで比較 データは一致 その手法をもとに 商用ベースでの測定法 としてキット化 マニュアル化するために 採血から測定までのプロセスを徹底的に調 査しその影響を調べた その結果 採血後の 血液サンプルの取扱方法や輸送容器内の温 度のバラツキを抑え サンプル調製を工程ど おり行うことで 測定者間差を含めて測定値 の標準偏差を 3% 以内に収めることができた ( 図 6) 試薬キットとして製品化するに当たり 各 コンポーネントの保存安定性を調査した 各 コンポーネントのうち t-buooh(t- ブチ ルヒドロペルオキシド ) 水溶液が不安定であ ることが分かった そのため t-buooh 水 溶液用の容器と空隙容量 保管温度などを検討した結果 安定化できる条件を見出し キットの 製品化の目途を立てることができた 本事業完了後 個別研究者への展開 データ蓄積 論文化 を経て販売へ進む 11
13 2 1 2 試薬合成 2 2 図 7 に示す合成ルートで 各種誘導体の合成を検討した その結果 1 種類の化合物を合成できたが 機能と合成難易度 原価等を勘案して キットに組み込むには DPhPMPO が最も良いと判断した Cl P R1 R2 R1 R5 R5 R3 R1 R2 R2 R3 R3 R4 R4 R1 図7 Diphenyl R3 R4 - R5 R5 R4 N R2 O N+ P R3 R1 R5 R5 R4 R1 O H P HN R2 O R1 R2 R2 R3 R3 R4 R1 O P R2 R5 R5 R3 R4 R4 型スピントラップ剤の合成スキーム 次に 主要コンポーネントである DPhPMPO のロット間差を見るために 新たに 1 ロット ロ ット 3 の合成を行い 前ロット ロット 2 との比較を行った それぞれの DPhPMPO によ る試験分析値 ラジカル測定値の変動を調べた 最も重要なブランク値の変動もなく フェント ン反応によるシグナル強度にも差がみられなかった フェントン反応によるスペクトルを図 8 に示す 合成工程を確実に行うことで データの再現性の高い試薬が調製できることを確認した 図 8 ロット 3 のフェントン反応のシグナル 12
14 発酵食品の抗酸化能の測定 : in vitro 発酵食品として 株式会社山内本店から提供を受けた醤油 熟成期間の異なる味噌 原料が異なる味噌を評価 また 代表的な抗酸化活性を持つアヤムラサキ ( 芋 ) 抗酸化能がある飲料水などを用いて in vitro で抗酸化活性を評価した その結果 株式会社山内本店製の 純搾り 醤油の抗酸化活性が極めて高く アヤムラサキよりも高い抗酸化活性を示した ( 図 9) Hb/t-BuOOH + その他試料 醤油醤油アヤムラサキアヤムラサキミルミル発酵飲料水 S I / 0 I 試料 (ml ml/ml ml) 図 9 純搾り 醤油とその他の抗酸化活性のある食品との比較 I0: サンプルを含まない ESR シグナル強度 I: サンプルを含む ESR シグナル強度傾きが大きいほど抗酸化活性が高い 図 10 に食品の抗酸化活性を比較したデータを示す 3 カ月合味噌追加熟成 は 3+1 カ月味噌 のことである 3+1 カ月味噌 は第一回目ヒト治験に用いた 図 10 各種食品の抗酸化活性の比較 (DPPH 法 ) 13
15 DPPH 法による活性比較から醤油の抗酸化活性が飛びぬけて高いことが分かる 醤油の抗酸化活性が高い理由として使用している麹が関係している可能性が考えられたため 醤油麹を使って味噌を調製することにした 一般に醤油麹はタンパクの分解活性が強く 液状化するため 調製は難しいと考えられた 図 11 に醤油味噌調製のフローを示す この工程で のぼる 2 号 のぼる 3 号 を調製し のぼる 3 号 を平成 24 年のヒト治験での摂取実験に用いた しょうゆみそ作成作成フロー 麹盛込み作業 味噌用の大豆大豆を採取 ビニール袋内袋内で攪拌 小型ミンチミンチ機で粉砕 醤油用酵母 (6.5g) ) + 小麦粉 (6kg kg) ) + 味噌用の大豆 (20 20kg kg) 室蓋に敷く ( 盛込み ) 醤油室に室蓋室蓋を置く 麹手入れ れ 温度管理作業 手入れ 麹を桶に移す ( 仕込み ) 手で攪拌攪拌する 図 11 醤油味噌 の製造フロー 水 ( 麹の重さにさに対して 30% 加える ) + 塩 ( 濃度が 13% になるように加える ) 麹出麹 仕込仕込み作業桶をモロミをモロミ倉に移してして熟成 のぼる 2 号 については 更に加熱熟成させ その構成成分および ORAC 値がどう変 化するかを調べた Table Nutrition contents of Miso samples Sample Aging periods (months) water (w/w%) Ash (w/w%) Protein (w/w%) Lipid (w/w%) Carbon hydrate (w/w%) Energy (k cal) Sodium (mg%) Noboru (0.2) (0.1) (0.0) (0.2) (0.5) (0.0) (0.1) (92.0) (0.5) (0.1) (0.3) (91.9) Barley-Miso (0.1) (0.1) (0.1) (234.0) Carbohydrate content calculated by subtraction of other contents from one hundred. Atwater constant, 4, 9, and 4 for protein, lipid, carbohydrate were used for energy calculation. Difference of duplicate experiments was shown in parentheses. 表 1 のぼる 2 号 調製味噌の成分表 14
16 表 2 味噌サンプルのORAC 値サンプル熟成期間 ( 月 ) ORAC 値 (umol TE / 100 g) のぼる 2 号 麦味噌 正確に 4 g を図り測定した ORAC 値は Wet 味噌重量で表示した のぼる 2 号 は 熟成期間によら ず暗赤色に着色しており 酵素分 解による糖及びアミノ酸の生成 そ して メイラード反応は 通常の麦味 噌より進行していたと思われる また 熟成によって生成するアミノ酸と高 い相関を示すホルモール態窒素に ついても のぼる 2 号 味噌の値は 通常の麦味噌の 1.4~1.5 倍となっ ていた なお 熟成 8 9 カ月の の ぼる 2 号 味噌のホルモール態窒素 の値が熟成 1 カ月の のぼる 2 号 味噌より若干高い値を示したが その差は大きくなかった 味噌試料の ORAC 値について のぼる 2 号 味噌は通常の麦味噌の 1.7~1.8 倍の値を示しており 通常の味噌とくらべ in vitro での抗酸化活性は高いことが示された 発酵食品の抗酸化能の測定 : in vivo 発酵食品や抗酸化活性があると考えられている食品を実験動物を使って投与した 実験動物を使う目的は 測定の n 数を増やすことと 発酵食品摂取の動物種による違いを見るためである 平成 23 年はウサギを使用し 平成 24 年はマウスおよびブタを用いた ウサギへの投与実験は 単回投与と連続投与による発酵食品の血液の抗酸化能の変化を測定した ウサギの課題は食塩濃度の高い発酵食品に対して耐性が低いということと 草食性動物であるために 代謝が雑食性動物と異なる可能性があり そのままヒト代替として評価ができるかどうかの判断が困難であるということである また ウサギの血液の抗酸化能は正常であり 発酵食品の摂取効果を判定するには 抗酸化能が低下した実験動物を使う必要があると判断した そのため マウスに対しては ストレスを与えて抗酸化能を低下させたマウスの調製を試みた マウスに対するストレス負荷実験の結果 図 12 に示すように 500 ug/kg の Fe-NTA 腹腔内投与において生体内抗酸化能の変動が確認された 0.5 ~5 ug/kg 領域の Fe-NTA 量ではコントロールと差が見られなかった しかしながら Fe-NTA の 図 12 Fe-NTA(500 ug/kg) 投与及び強制水泳による生体内ラジカル変動 15
17 大量投与では目的とした抗酸化能の低下 ( ラジカル量の上昇 ) ではなく 抗酸化能を亢進させる結果となった 閉所ストレス 強制水泳によるストレス負荷実験においては行動観察 解剖所見共にコントロールマウスと差は見られず ESR による生体内抗酸化能にも大きな変化は確認されていない これらの結果から今回検討したストレス負荷実験では マウスの生体内抗酸化活性の低下を有意に誘導することはできていない マウスへの発酵食品投与実験 ウサギを絶食下に置いても全血の抗酸化能は変化なかったが マウスは絶食により全血の抗酸化活性が低下することが分かったため 以降の実験には 一夜絶食したマウスを用いることにした マウス投与実験で使用したサンプルを以下に示す 醤油 ( 純絞り ) 新規発酵味噌 ( のぼる 3 号 ) Sephadex G25 を用いた純搾り醤油分画成分高分子フラクション, 中分子フラクション, 低分子フラクション Sephadex G50 を用いた醤油分画成分高分子フラクション, 中分子フラクション, 低分子フラクション NaCl( 対象物質 ) 水 ( 対象物質 ) 図 13 マウス生体内抗酸化活性の亢進が確認されたサンプルの変動推移 マウス血液サンプルを用いた ESR 測定の結果 図 13 に示すように 純絞り のぼる 3 号 Sephadex による分画醤油を投与することにより マウスの生体内抗酸化能亢進を確認することができたと同時に 最適なサンプル投与量が存在する可能性が示唆された 同じ純絞りであっても 投与量により生体内抗酸化活性の亢進 低下の両方の作用が確認された Sephadex G25 及び G50 を用いて 純絞り を高分子 中分子 低分子フラクションに分画し投与実験に用いた フラクションの基準は MS データ及び回収物の色味により概算で設定した in vivo in vitro ともに抗酸化活性の高い 純絞り を分画することで高活性フラクションと低活性のフラクションに分離することができた これにより 発酵食品に含有される抗酸化成分の探索 同定範囲を限定することが可能となり より抗酸化活性の高い発酵食品を製造するための重要なデータとなる また 抗酸化成分の同定 精製が可能となれば発酵食品由来の機能性食品開発などが可能になると考えられる 16
18 図 14 SephadexG50 を用いた醤油分画成分による生体内抗酸化活性への影響 図 15 純絞り 投与量による生体内抗酸化活性への影響 動物種による発酵食品摂取変動 : ブタ 雑食性であるブタを用いることで草食性であるウサギのもう一つの対照実験とすることを目的とし 実験動物の食性による相違を確認するために採血量の関係でマウスで不可能であった同一個体からの経時的な連続採血を実施した ブタ ( 食用雑種 )n=3 に対して発酵食品を投与し 発酵食品投与前後 ( 分 ) 採血を行った W.B. はヘパリンナトリウム (10 mg/ml)10 µl 入のマイクロチューブに入れ転倒混和後 保存し 同仁化学へ運搬した 採血を実施したブタについては 2 週間のブランク期間を開けた上で次のサンプルを投与した 血液分析法は マウスと同一である ブタ投与実験で使用したサンプルを以下に示す 醤油 ( 純絞り ) 新規発酵味噌 ( のぼる 3 号 ) 3% 食塩水 ( 対象物質 ) ブタ投与実験での対象物質として使用した 3% 食塩水はそれぞれのブタで変動はあるものの 全血の抗酸化活性の向上 低下は観察されていない これをベースに のぼる 3 号 投与および 純搾り 投与実験における全血の抗酸化能の変動を比較すると のぼる 3 号 摂取ではわずかに抗酸化能の亢進が観察されるが 純搾り では 3% 食塩水と有意な差は見られない ( 図 16 17) 純搾り は ウサギやヒト投与実験で効果が観察されており ( 平成 23 年度成果報告書参照 ) またマウスでは 純搾り の摂取量によって効果が変動するデータがでていることから ブタに最適な 純搾り 摂取量ではない可能性がある 17
19 120% ブタ投与実験のぼる 3 号 120% ブタ投与実験純絞り醤油 115% Pig 1 Pig 2 Pig 3 115% Pig 1 Pig 2 Pig 3 110% 110% (%) 105% 値対 100% 相する 95% 対に90% 前与 85% 投 80% サンプル投与後の経過時間 (min) (%) 105% 値対 100% 相する 95% 対に90% 前与 85% 投 80% サンプル投与後の経過時間 (min) 図 16 のぼる 3 号投与データ 図 17 純搾り投与データ 実験動物として今回はマウスを集中的に使用した まず 全血の抗酸化能低下モデルマウスの作成を検討したが Fe-NTA 腹腔内投与実験では 逆に抗酸化能が亢進する結果となった ウェブ情報では Fe-NTA 投与により抗酸化能が低下し そのマウスを使って緑茶の摂取効果を判断している 今回 Fe-NTA 投与が全血で評価した際に 逆に振れた理由は定かではないが Fe-NTA により発生するラジカルによって 生体反応として血中の抗酸化能が急激に上昇した可能性がある 測定してみれば分かる事であるが ラジカル消去分子として SOD(Super oxide dismutase) 活性が高くなっていることは容易に想像がつく また LPS 投与は全く変動がないという結果になっており LPS により炎症を惹起しても全血の抗酸化活性には反映されないという結果になった 炎症が起きていないとは考えにくく 炎症が起きれば SOD 活性も高くなると予想され これまでの常識とは矛盾する 今回は 一夜食物摂取を断ったマウスは 全血の抗酸化活性が低下することが分かったため 絶食マウスをモデルマウスとして用いたが 一般的に予想されるストレス負荷方法では 血液の抗酸化能に影響を与えなかった この結果から 全血の抗酸化活性は通常の刺激やストレスで変動するものではなく 食事のコントロールによって変動するものと考えられた 但し 食事が唯一のコントロール因子という訳ではない 絶食マウスの実験から 純搾り の Shephadex G50 分画成分 ( 高分子量領域 中分子量領域 低分子量領域の三つに分画 ) のうち 中分子量領域の分画成分のマウスへの投与効果が高いことが分かった 中分子量領域にある分子種解析については 2-3 開発項目 2 ラジカル種の分析で述べる また 全血の抗酸化能を向上させるのに適当な摂取量があることが分かった 適当な摂取量は個人レベルでも変動する可能性もあり 固定した数値とはならないかもしれない 中分子量領域にある分子の分離 投与実験を繰り返し 可能性のある分子の絞り込み および構造解析を行い 分子種を特定できれば 抗酸化能を亢進させるための成分として 機能性食品に組み込まれる可能性もある また そのような機能性食品を用いて 健康と疾病との関連付けができると 新たな指標となり得る 18
20 2-3 2 ラジカル種と抗酸化能の相関関係解析 血中ラジカルの分子種解析 当初 ESR シグナル強度の変化とサンプルに含まれる成分量の変化 ( 増減 ) が関連する分子を検出するために LC/MS データを差異 変動解析ソフト (SIEVE) を使って解析した結果 相関ある分子が見出されたが 動物個体間で検出される分子ではなく 確実に相関する分子であるとの確証は得られていない 従って 抗酸化能を示す発酵食品中の分子は 直接血中で抗酸化活性を示すという極めて単純化したモデルを考えて 以下の実験を行った 1) 発酵食品抽出物 (Sephadex G50 分画成分 / 中分子量分画 :G50 Mid) の分析 2)in vitro 測定で得られた ESR 試料の分析 3)in vivo 測定で得られた ESR 試料の分析 1) の実験で得られたデータの一つを図 18 に示す 分析の流れを次に示す 1 各フラクションの分析結果より トータルイオンクロマトグラフィー ( 以下 TIC) で検出される特徴的なピークを選択する 2 上記 1で選択した特徴的な TIC スペクトルを構成する MS スペクトルより検出されている分子種を確認する 3 上記 2で確認された MS スペクトルについて 未精製の醤油と各フラクションの解析結果を比較することで確認された分子種が醤油由来であることを確認する ここでは 分画醤油成分の中で in vitro in vivo 実験において最も抗酸化活性の高かった Sephadex G50 を用いた分画醤油中分子フラクション ( 以後 G50 Mid) を解析例として挙げる G50 Mid のネガティブで検出した TIC(TIC(-)) において クロマトグラフの滞留時間 (RT) 2.2 min 付近に特有のピークが検出された 次に RT: 2.2 min の MS スペクトルにおいて 主なピークとして検出される分子質量 (m/z)=801 及び m/z=1048 に着目し 未分画純絞り由来の成分であるかを確認した それを 2 3と行い G50 Mid において特徴的な成分である m/z=801, 1046, 249, 657, 793 は純搾り由来の成分であることが確認された 次に それらの分子が 1)in vitro サンプル および 2)in vivo サンプル分析で検出されるかをそれぞれの分子質量毎に調べた その結果 どの質量分子も検出できなかった 19
21 a) b) c) d) 図 18 Sephadex G50 を用いた C/M 抽出物の TIC 及び RT:2.2min における MS スペクトル a) ポジティブシグナル検出の TIC(TIC(+)) b) ネガティブシグナル検出の TIC(TIC(-)) c) チャート b) の 2.2 分のピークのポジティブシグナルの MS チャート d) チャート b) の 2.2 分のピークのネガティブシグナルの MS チャート 開発項目 2-2 血中ラジカル量の変動確認 測定サンプル 血液試料のデータ収集を行い 約 3000 サンプル分の分析データを保存した 対象は ウサギ マウス ブタ ヒトの全血 (WB) および血漿 (Plasma) 洗浄赤血球 (WRC) である 表 3 に 摂取させた試料例とサンプル数を示す 単回摂取サンプルと連続投与サンプルがあり Day 表示してあるのは 連続投与時の血液サンプル採取日である 20
22 表 3 LC/MS 用サンプル WB sample Plasma sample WRC sample _Tan-TokHon _Tan-HonJou _Ren-DatuJunShi <Day <Day <Day <Day _Ren_SyoMiso <Day <Day <Day Tan-AyaMur Tan-JunshiboriGeneki _Ren-NaCl_H2O <Day <Day _Kumadai <Kansensho 15 <Kensa café Tan-X3Noboru1go Tan-X100_Noboru1go _Tan-5%NaCl _Tan-H2O _Tan-Ayamurasaki-5mL_kg _Tan-222mg-Moromi _Tan-111mg-Moromi _Tan-555mg-mL_KikkomanGenen _Tan-1000mg-2mL-kg_KikkomanGenen _Tan-333mg-mL-kg_2.9%Genen _Tan-1000mg-2mL-kg_2.9%Genen _Tan-ml-kg_BulgariaYogurt
23 _Tan-3ml-kg_BulgariaYogurt _Tan-3mL-kg_Milk Tan-3mL-kg_shisodrink _nishikumachiken _Tan-3mL-kg_datsuenJunshibori _Ren_Yogurt <Day <Day <Day <Day <Day _Ren_Kenyo <Day <Day <Day <Day <Day _Tan-Ryokucha _Tan-maccha _Tan-Uroncha _Tan-puarucha Total 考察 サンプル数が多いことに加えて 差異 変動解析ソフトがあるとはいえ 多くの部分では手作業での解析であって効率が良くない 現在 全血. 血漿等のデータの取り込みが終わった段階であり これまでのような発酵食品に含まれる分子種や ESR 相関による検出から 分子質量による網羅的解析にシフトしていくことになる 22
24 2-4 3 食品摂取によるラジカル変化 発酵食品摂取後の血液分析発酵食品のヒトへの摂取効果を見るために ヒト治験センターであるにしくまもと病院で各 10 名のボランティアを選別し 純搾り 醤油 3+1 カ月味噌 のぼる 3 号 味噌の投与実験を行った 治験センターでの発酵食品の摂取と採血時間を図 19 に示す 3+1 カ月味噌 は通常の発酵熟成工程を 3 カ月行った後に 1 カ月加温熟成させた味噌である 図 19 にしくまもと病院での採血及び分画処理法 採血された血液はサンプル処理方法に従って処理し 同仁化学まで搬送した その後 下記の方法で ESRサンプルとしESRを測定した 2mL-Tube DPhPMPO 血液サンプル t-buooh 室温にて反応 遠心分離 (500 x g 10 分 ) ESR 測定 23
25 それぞれの結果を図に示す in vivo ヒト投与試験 ( 3+1ヶ月味噌 ) in vivo ヒト投与試験 ( 純搾り醤油 ) 6.00 n) n MṂ dḋ 5.00 k/2 n k a e 4.00 ( Pea 度強 3.00 対相 R S E 2.00 y = -0.21x R 2 = y = x R 2 = 投与後の経過時間 (h) 0.65 y = x R 2 = n) n MṂ dḋ 0.55 k/2 n k a e 0.50 ( Pea 度 0.45 強対相 0.40 R S E 0.35 y = x R 2 = 投与後の経過時間 (h) 図 カ月味噌 摂取による初期抗酸化能高値群と低値群の変動平均 図 21 純搾り 醤油摂取による初期抗酸化能高値群と低値群の変動平均 図 22 のぼる 3 号 味噌摂取被験者の初期抗酸化能高値群と低値群の変動平均 図 23 のぼる 3 号 味噌摂取による被験者の RI の変動 24
26 図 24 ブルガリアヨーグルト 摂取被験者の初期抗酸化能高値群と低値群の変動平均 図 25 ブルガリアヨーグルト 摂取による被験者の RI の変動 ヒト治験の結果から 3+1 カ月味噌 ( 図 20) と 純搾り ( 図 21) の摂取後の抗酸化能の変動パターンは似通っており 初期抗酸化能低値群は摂取によって抗酸化能が亢進 高値群は変化ないという結果であった 一方 ブルガリアヨーグルト 摂取は初期抗酸化能高値 低値群ともに僅かに亢進した ( 図 24 25) ところが のぼる 3 号 摂取群は 全ての被験者の全血の抗酸化能は同じパターンで波打ちながら低下する動きとなった ( 図 23) このようなパターンは動物実験でも観察されておらず 極めてユニークなものである また 抗酸化活性の亢進が確認された 純絞り と異なり 投与時の被験者の反応が悪く 匂いや味に対するストレスによる抗酸化能の低下になったとも考えられる 動物 ヒト投与実験から発酵食品投与による生体内抗酸化活性の変動を捉えること可能になったことで 亢進 抑制の両面から生体抗酸化に対する有効成分を確認することができる 成分による最適濃度が異なるため 血中抗酸化能低下方向へ動いた のぼる 3 号 投与実験結果も生体内抗酸化状態の劇的な変化の例として興味深い結果である ラジカルを直接測定することで 差が確認できる事実は製薬 機能性食品開発への一助に成り得る 25
27 2-5 開発項目 4 商用受託分析実験 開発項目 4-1 検体種別毎の測定方法確立 全血を送るに当たっては サンプル取扱の条件も一定にすることが データの信頼性を高めることになる 従って 採血直後からの血液サンプルの取扱方法を決定することを目的として実験を行った ヒト治験前スクリーニングヒト治験に際して 全血の初期抗酸化能が高い群と低い群に分けるため 事前に血液分析を行った その際に にしくまもと病院での採血後から同仁化学研究所での分析に至る工程が及ぼす影響を調べた 採血は三日間行い 全血を一定の条件で同仁化学研究所まで運び サンプルの抗酸化能を測定した その結果 採血日によって全血の抗酸化能が変動しており 個人差と考えにくく おそらく にしくまもと病院での採血から同仁化学研究所に届いて測定するまでの 輸送条件が関与しているものと推察された 従って ヒト治験サンプルを輸送するに当たり 管理を徹底する必要がある 但し 同日採血されたサンプル間の比較は可能である 本来の目的であるヒト治験に際して全血の初期抗酸化能高値群と低値群の分割は出来なかったため 全員を対象とし 当日の体調によって被験者とするかどうかを判断することにした 温度管理 図 26 温度管理したヒト治験被験者の W.B. の抗酸化能の値 26
28 29 日 30 日採取の二群での抗酸化能の日間差はほとんど見られず 条件を一定に保つ限りにおいては 全血の抗酸化能は変化しないものと考えられる 検体種別での測定方法については 全血を対象とする限り 採血直後からの工程管理が重要で あり 工程はキットのマニュアルに従うことで ばらつきの少ないデータを得ることができる状態にある その他のサンプルとして 組織の抗酸化能も考えられるが まだ 現時点では対象とは考えていない 全血との相関あるいは全血では見えない生体の抗酸化能の評価という点では 興味のあるサンプルである 但し ヒトから数十 mg の組織を取って抗酸化能を測定することは現実性の乏しい話であり 動物実験で相関が出てくれば 全血だけが測定の対象となる 開発項目 4-2 検体処理方法の事例検証 キットの in vitro 評価開発中のキットを評価するに当たり in vitro で xanthine oxidase 系 NADPH-P450 oxidoreductase 系 hemoglobin/ t-buooh 系 好中球 /LPS 系など一般的な酵素を用いたラジカル産生系を W.B. に付加した場合の測定値の変動 これに superoxide dismutase や catalase などのラジカル消去剤 酵素を加えた場合の W.B. 変動について実験を行った その結果 産生系 消去系共に十分に評価可能であることが確認された サンプル調製した ESR 測定用資料の安定性評価 ESR がない場合を想定して 調製後のサンプルの安定性を調べた まず 以下の工程でサンプルを調製した ヒト W.B. 1.1 ml t-buooh DPhPMPO C/M 抽出 Na2SO4 乾燥 11 本に分注 窒素ガスフローで有機溶媒除去 冷凍保存 (-30 ) 保存したサンプルを一定時間 ( 期間 ) ごとに取り出して C/M( クロロホルム / メタノール混合溶媒 ) 0.25 ml で溶解し ESR で測定した バラツキを抑えるために標準サンプルとして 27
29 Tempol( 安定ラジカル化合物 ) を用いた 本反応における新しいスピントラップ剤の安定性を一般的によく使われているラジカル捕捉剤である DMPO と比較検討したところ 図 27 に示すように明らかに DPhPMPO の安定性が高いことが証明された 図 27 乾固したスピンアダクトの安定性評価 動物実験では 緑膿菌肺炎マウスで血中及び肺洗浄液中で明らかに酸化ストレス状態が更新していることが確認された 実際のヒトでは 健常人に抗酸化活性を持つサプリメントや経腸栄養剤を飲ませたときの全血中の抗酸化活性の変化や 慢性気道感染症患者における全血中の抗酸化能の変化を検討したところ 十分に計測可能であることが判明し 今後のヒトでの 発酵食品を用いた健常人及び病態での検討を行う補足的データが得られた 以上の結果から 開発検討したキットは全血のラジカル測定において 実際のヒトでの測定系で用いることができる可能性が高いと示唆された また 測定のテクニカルな問題点についても解決されており 今後の発酵食品を用いた研究への還元が期待される 28
30 第三章総括 本事業の目的は ヒトの全血の抗酸化能を測定するためのキットを完成させることと ヒトの抗酸化能を亢進させるための発酵食品を調製することであった この事業を行っていく過程で 発酵食品の抗酸化能は 醤油が最も高く 味噌は醤油と比べて半分以下ということが分かった 従って 味噌の抗酸化能を亢進させるには 醤油麹を使って味噌を作ればよいのではという発想の下 醤油味噌 を調製した 醤油味噌 は のぼる 3 号 という名称でヒト投与実験に用いた その結果 のぼる 3 号 のヒト投与実験では 全ての被験者の全血の抗酸化能を低下させるというものであった ところが マウスやブタでは 全血の抗酸化能はわずかに更新するという結果を示した これらのデータの再現性を確認する必要があるが 再現性があると仮定して ここから言えることは 1) 発酵食品でも何らかの原因で抗酸化能を低下させることがある 2) 動物種間で摂取効果は 大きく異なる ということであり そのような挙動を取る理由として ヒトに対してのみストレスを負荷させる要因があった 若しくは のぼる 3 号 の調製過程で生じる化合物 ( 単体 複合体 ) が摂取によってヒト代謝系を刺激し全血の抗酸化能を低下させた と考えられる 今回の のぼる 3 号 の結果は 目的とした ヒト生体の抗酸化能を亢進させる 発酵食品を開発することからすると 逆のデータとなっており 抗酸化能を亢進させる発酵食品の開発には至っていない 但し 発酵熟成工程を変えることにより 抗酸化能に影響を与える発酵食品を調製することは可能である 単純に発酵食品の抗酸化活性を亢進させればよいということではないため のぼる 3 号 の成分を分離し 抗酸化能を低下させる物質を見つけることが出来れば 次の活動が見えてくるものと思われる ヒト全血の抗酸化能を測定するためのキットの開発は コンポーネントの保存安定性データの 継続的確認を行うことを除き終了した この生体内抗酸化能測定に興味を持ち 且つ ESR 装置を 所有している研究者への外部評価 並びに データの蓄積を行いながら 株式会社同仁グローカル経 由で販売を拡大していく 以上 29
31 別紙 1 開発キットについて キット名称 i-strap-w.b. コンポーネント 4 種類 キットサイズ 10 サンプル用 30 サンプル用 100 サンプル用 図 48 それぞれのキットの写真 販売予定価格 上 100 サンプル用 500,000 左下 30 サンプル用 200,000 右下 10 サンプル用 80,000 30
32 別紙 2 用語の説明 抗酸化能 抗酸化活性酸化に対する防御機構として働く能力 酵素である生体内では SOD( スーパーオキサイドディスムターゼ )) や 還元型グルタチオンなどが分子として代表的なものである 初期抗酸化能食品等の摂取前の抗酸化能の値 SOD( スーパーオキサイドディスムターゼ ) スーパーオキサイドを消去する酵素で スーパーオキサイドを過酸化水素と酸素に分解する 生じた過酸化水素はカタラーゼにより水と酸素に分解される ラジカル不対電子を持つ極めて活性の高い分子種 その強い活性のため 生体内でダメージを与える化合物であるヒドロキシラジカルが有名である アダクト スピンアダクトラジカルトラップ剤などを用いて安定化したラジカル分子 ORAC 法 Oxygen Radical Absorbance Capacity( 活性酸素吸収能力 ) の略 活性酸素種により分解される蛍光物質の蛍光強度減少量を Trolox との相対強度比で表示し それぞれの検体の抗酸化力とする方法 単位は μ モル Trolox 当量 /g で示される Trolox 化学名は 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl-chroman-2-carboxylic acid で 抗酸化活性を持ち ORAC 法で抗酸化能を評価する際の標準物質として使用される DPPH 法 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl を用いてサンプルの抗酸化能を調べる方法 DPPH は 517 nm に吸収を持つ安定なラジカルで 抗酸化性化合物と反応すると吸収が消失する その消失量から抗酸化活性を測定できる 31
33 フェントン反応鉄触媒によって過酸化水素からヒドロキシラジカル ヒドロペルオキシドラジカルが発生する反応 ESR(Electron Spin Resonance) 電子スピン共鳴法に基づくラジカル種 ラジカル量を分析する装置 MS/MS 分析タンデム質量分析法で 分子構造解析に用いられる 差異 変動解析ソフト (SIEVE) 何らかの変化を加える前後でのシグナルの差 変化を解析するためのソフト スピントラップ剤 ラジカルトラップ剤 極めて不安定なラジカルを安定化する際に使用される化合物 一般的に電子スピン共鳴測定装置 (ESR) でラジカルを分析する際に使用する ヘパリンナトリウム血液凝固を抑える薬剤で 採血の際に用いられる リポポリサッカライド LPS 脂質や多糖からなるグラム陰性菌由来の高分子で 動物細胞に対して炎症等の生理現象を引き起こす LC/MS 高速液体クロマトグラフィー (HPLC) と質量分析装置 (MS) を繋ぎ一体化した装置で 液体 クロマトグラフィーで混合物として存在する分子種を分離し その後 質量分析装置で分子構造を解析するために使用される HPLC は担体が充填された管の中を多くの成分を含むサンプルが流れていく際に 担体との分配や吸着度合いの違いによって分離し検出する方法 LC/MS の場合は 質量分析装置が検出装置になる HPLC 高速液体クロマトグラフ (High Performance Liquid Chromatography) の略で 混合物の分離分析や 化合物の純度検定に用いられる ホルモール態窒素 (FAN) 32
34 アミノ酸を構成する窒素のことで 水溶性低分子ペプチドに含まれる窒素量であり 値が高いと旨味が多いとされる メイラード反応生成物 Maillard reaction 還元糖とタンパクやペプチドなどのアミノ酸化合物との縮合反応で 蛍光性化合物や重合物を精製する 食品の褐色化を引き起こす 33
ⅱ カフェイン カテキン混合溶液投与実験方法 1 マウスを茶抽出液 2g 3g 4g 相当分の3つの実験群と対照群にわける 各群のマウスは 6 匹ずつとし 合計 24 匹を使用 2 実験前 8 時間絶食させる 3 各マウスの血糖値の初期値を計測する 4 それぞれ茶抽出液 2g 3g 4g 分のカフェ
第 26 回山崎賞 7 マウスにおける茶と血糖値変化の関係第 4 報 カフェイン カテキン混合溶液投与実験 静岡県立清水東高等学校理数科ネズミ班 2 年横道萌井鍋寛伸加藤夕利奈水野春花望月琴美 1. 実験の動機 目的血糖値の変化は私たちの健康と密接な関わりあいを持っている 近年では 糖の過剰摂取による慢性的な高血糖による糖尿病が社会問題になっている また 低血糖は目眩や昏睡を引き起こす 3 年前の先輩たちは血糖値の変化に着目し
アントシアニン
肝機能改善効果を有する 紫サツマイモジュースの開発 1. 紫サツマイモ について ( アントシアニンの構造等 ). 紫サツマイモ アントシアニンの体内吸収性 3. 紫サツマイモ の有効性とメカニズム アントシアニン アヤムラサキ について 商品特性 : 1. 紫サツマイモ アヤムラサキ の搾汁を 100% 使用したサツマイモ搾汁飲料. 着色料 甘味料不使用 3. 食物繊維 0.4g (15mLあたり)
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スライド 1
Detection of bound phenolic acids: prevention by ascorbic acid and ethylenediaminetetraacetic acid of degradation of phenolic acids during alkaline hydrolysis ( 結合フェノール酸の検出 : アルカリ加水分解中のアスコルビン酸と EDTA によるフェノール酸の劣化防止
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第２章マウスを用いた動物モデルに関する研究
. ホルムアルデヒドおよびトルエン吸入曝露によるマウスのくしゃみ様症状の定量 およびトルエン代謝物の測定 研究協力者 : 欅田尚樹 嵐谷奎一 ( 産業医科大学産業保健学部 ) (1) 研究要旨ホルムアルデヒド曝露により特異的にくしゃみの増加が観察されたが トルエン曝露でくしゃみの誘発はなかった トルエンの曝露指標として 尿中代謝産物である馬尿酸を測定した 曝露直後には高く翌日には正常レベルに戻っており
PowerPoint プレゼンテーション
酵素 : タンパク質の触媒 タンパク質 Protein 酵素 Enzyme 触媒 Catalyst 触媒 Cataylst: 特定の化学反応の反応速度を速める物質 自身は反応の前後で変化しない 酵素 Enzyme: タンパク質の触媒 触媒作用を持つタンパク質 第 3 回 : タンパク質はアミノ酸からなるポリペプチドである 第 4 回 : タンパク質は様々な立体構造を持つ 第 5 回 : タンパク質の立体構造と酵素活性の関係
テイカ製薬株式会社 社内資料
テイカ製薬株式会社社内資料 アレルギー性結膜炎治療剤トラニラスト点眼液.5% TS TRANILAST Ophthalmic Solution.5% TS 生物学的同等性に関する資料 発売元 : 興和株式会社 製造販売元 : テイカ製薬株式会社 9 年 月作成 TSTR5BE9 ラット及びモルモットアレルギー性結膜炎モデルにおける生物学的同等性試験 Ⅰ. 試験の目的トラニラスト点眼液.5% TS および標準製剤の生物学的同等性をラット受動感作アレルギー性結膜炎モデル及びモルモット能動感作アレルギー性結膜炎モデルを用い薬力学的に検討した
DNA/RNA調製法 実験ガイド
DNA/RNA 調製法実験ガイド PCR の鋳型となる DNA を調製するにはいくつかの方法があり 検体の種類や実験目的に応じて適切な方法を選択します この文書では これらの方法について実際の操作方法を具体的に解説します また RNA 調製の際の注意事項や RNA 調製用のキット等をご紹介します - 目次 - 1 実験に必要なもの 2 コロニーからの DNA 調製 3 増菌培養液からの DNA 調製
様式第 19 別紙ロ 整理番号 SG150145 活動番号 002 科学研究実践活動のまとめ 1. タイトル 高知県産ゆずを化学する ゆずに含まれるビタミン のヨウ素滴定 2. 背景 目的高知県には, ゆずや文旦, ポンカンなど様々な柑橘系の果物がたくさんある それらには私たちの生活には欠かせない様々な栄養素が含まれている その中でもビタミン ( アスコルビン酸 ) は, 多くの柑橘系果物に含まれていて,
医薬品タンパク質は 安全性の面からヒト型が常識です ではなぜ 肌につける化粧品用コラーゲンは ヒト型でなくても良いのでしょうか? アレルギーは皮膚から 最近の学説では 皮膚から侵入したアレルゲンが 食物アレルギー アトピー性皮膚炎 喘息 アレルギー性鼻炎などのアレルギー症状を引き起こすきっかけになる
化粧品用コラーゲンの原料 現在は 魚由来が中心 かつては ウシの皮膚由来がほとんど BSE 等病原体混入の危険 人に感染する病原体をもたない アレルギーの問題は未解決 ( むしろ問題は大きくなったかもしれない ) アレルギーを引き起こす可能性 医薬品タンパク質は 安全性の面からヒト型が常識です ではなぜ 肌につける化粧品用コラーゲンは ヒト型でなくても良いのでしょうか? アレルギーは皮膚から 最近の学説では
ータについては Table 3 に示した 両製剤とも投与後血漿中ロスバスタチン濃度が上昇し 試験製剤で 4.7±.7 時間 標準製剤で 4.6±1. 時間に Tmaxに達した また Cmaxは試験製剤で 6.3±3.13 標準製剤で 6.8±2.49 であった AUCt は試験製剤で 62.24±2
ロスバスタチン錠 mg TCK の生物学的同等性試験 バイオアベイラビリティの比較 辰巳化学株式会社 はじめにロスバスタチンは HMG-CoA 還元酵素を競合的に阻害することにより HMG-CoA のメバロン酸への変更を減少させ コレステロール生合成における早期の律速段階を抑制する高コレステロール血症治療剤である 今回 ロスバスタチン錠 mg TCK とクレストール 錠 mg の生物学的同等性を検討するため
Microsoft Word - Ⅲ-11. VE-1 修正後 3.14.doc
平成 18 年度厚生労働科学研究費補助金 ( 循環器疾患等生活習慣病対策総合研究事業 ) 日本人の食事摂取基準 ( 栄養所要量 ) の策定に関する研究 主任研究者柴田克己滋賀県立大学教授 Ⅲ. 分担研究者の報告書 11. 高 α- トコフェロールあるいは高 γ- トコフェロール摂取に伴うビタミン E の 血中濃度変化と運動トレーニングの影響 分担研究者森口覚 山口県立大学教授 研究要旨ビタミン E
31608 要旨 ルミノール発光 3513 後藤唯花 3612 熊﨑なつみ 3617 新野彩乃 3619 鈴木梨那 私たちは ルミノール反応で起こる化学発光が強い光で長時間続く条件について興味をもち 研究を行った まず触媒の濃度に着目し 1~9% の値で実験を行ったところ触媒濃度が低いほど強い光で長
31608 要旨 ルミノール発光 3513 後藤唯花 3612 熊﨑なつみ 3617 新野彩乃 3619 鈴木梨那 私たちは ルミノール反応で起こる化学発光が強い光で長時間続く条件について興味をもち 研究を行った まず触媒の濃度に着目し 1~9% の値で実験を行ったところ触媒濃度が低いほど強い光で長時間発光した 次にルミノール溶液の液温に着目し 0 ~60 にて実験を行ったところ 温度が低いほど強く発光した
あった AUCtはで ± ng hr/ml で ± ng hr/ml であった 2. バイオアベイラビリティの比較およびの薬物動態パラメータにおける分散分析の結果を Table 4 に示した また 得られた AUCtおよび Cmaxについてとの対数値
モンテルカストチュアブル錠 5mg TCK の生物学的同等性試験 ( 口中溶解後 水なし投与 ) バイオアベイラビリティの比較 辰巳化学株式会社 はじめにモンテルカストナトリウムは アレルギーのメディエーターの 1 つであるロイコトリエン (LT) の受容体の内 cyslt1 受容体を遮断する抗アレルギー薬である 今回 モンテルカストチュアブル錠 5mg TCK とキプレス チュアブル錠 5mg の生物学的同等性を検討するため
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[ 博士論文概要 ] 平成 25 年度 金多賢 筑波大学大学院人間総合科学研究科 感性認知脳科学専攻 1. 背景と目的映像メディアは, 情報伝達における効果的なメディアの一つでありながら, 容易に感情喚起が可能な媒体である. 誰でも簡単に映像を配信できるメディア社会への変化にともない, 見る人の状態が配慮されていない映像が氾濫することで見る人の不快な感情を生起させる問題が生じている. したがって,
目次 はじめに例 1) Superoxide の検出およびSuperoxide dismutaseによるsuperoxide 消去活性例 2) 過酸化水素の検出およびCatalaseによる過酸化水素消去活性例 3) OHラジカルのおよびクロロゲン酸による OHラジカル消去活性 1 頁 2 頁 3 頁
化学発光を用いた活性酸素 / 抗酸化能例 目次 はじめに例 1) Superoxide の検出およびSuperoxide dismutaseによるsuperoxide 消去活性例 2) 過酸化水素の検出およびCatalaseによる過酸化水素消去活性例 3) OHラジカルのおよびクロロゲン酸による OHラジカル消去活性 1 頁 2 頁 3 頁 4 頁 化学発光を用いた活性酸素 / 抗酸化能 活性酸素の功罪
大学院博士課程共通科目ベーシックプログラム
平成 30 年度医科学専攻共通科目 共通基礎科目実習 ( 旧コア実習 ) 概要 1 ). 大学院生が所属する教育研究分野における実習により単位認定可能な実習項目 ( コア実習項目 ) 1. 組換え DNA 技術実習 2. 生体物質の調製と解析実習 3. 薬理学実習 4. ウイルス学実習 5. 免疫学実習 6. 顕微鏡試料作成法実習 7. ゲノム医学実習 8. 共焦点レーザー顕微鏡実習 2 ). 実習を担当する教育研究分野においてのみ単位認定可能な実習項目
フォルハルト法 NH SCN の標準液または KSCN の標準液を用い,Ag または Hg を直接沈殿滴定する方法 および Cl, Br, I, CN, 試料溶液に Fe SCN, S 2 を指示薬として加える 例 : Cl の逆滴定による定量 などを逆滴定する方法をいう Fe を加えた試料液に硝酸
沈殿滴定とモール法 沈殿滴定沈殿とは溶液に試薬を加えたり加熱や冷却をしたとき, 溶液から不溶性固体が分離する現象, またはその不溶性固体を沈殿という 不溶性固体は, 液底に沈んでいいても微粒子 ( コロイド ) として液中を浮遊していても沈殿と呼ばれる 沈殿滴定とは沈殿が生成あるいは消失する反応を利用した滴定のことをいう 沈殿が生成し始めた点, 沈殿の生成が完了した点, または沈殿が消失した点が滴定の終点となる
資料４－４ 木酢液の検討状況について
資料 4-4 木酢液の検討状況について 木酢液の薬効 薬害 安全性等に係る検討に関し 第 6 回及び第 8 回合同 会合において 以下のとおり整理された 安全性 薬効 薬害に係る試験の実施 ( 論点 ) 第 6 回合同会合において検討した結果 変異原性試験 ( 復帰突然変異原性試験 ) の結果について指摘があった また 1) 木酢液 に含まれるホルムアルデヒドについては IARC( 国際ガン研究機関
3. 安全性本治験において治験薬が投与された 48 例中 1 例 (14 件 ) に有害事象が認められた いずれの有害事象も治験薬との関連性は あり と判定されたが いずれも軽度 で処置の必要はなく 追跡検査で回復を確認した また 死亡 その他の重篤な有害事象が認められなか ったことから 安全性に問
フェキソフェナジン塩酸塩錠 6mg TCK の生物学的同等性試験 バイオアベイラビリティの比較 辰巳化学株式会社 はじめにフェキソフェナジン塩酸塩は 第二世代抗ヒスタミン薬の一つであり 抗原抗体反応に伴って起こる肥満細胞からのヒスタミンなどのケミカルメディエーターの遊離を抑制すると共に ヒスタミンの H1 作用に拮抗することにより アレルギー症状を緩和する 今回 フェキソフェナジン塩酸塩錠 6mg
<4D F736F F D AC95AA955C814590AC95AA926C82CC82BD82DF82CC92E897CA E897CA96408C9F93A EF2E646F6378>
日本食品標準成分表の成分値策定における食物繊維定量法の選定に関する提言 1. 背景文部科学省所管の日本食品標準成分表 ( 以下, 食品成分表 ) および消費者庁所管の栄養表示基準 ( 以下, 栄養表示 ) にはそれぞれ 食物繊維 の項目があるが, 採用されている定量法に違いがみられる すなわち, 食品成分表では,AOAC Method 991.43 をベースにした方法が藻類以外の食品の水溶性食物繊維
<4D F736F F D B82C982C282A282C482512E646F63>
サンプル条件および固定化分子の選択 Biacoreの実験ではセンサーチップに固定化する分子をリガンド それに対して結合を測定する分子をアナライトと呼びます いずれの分子をリガンドとし アナライトとするかは 実験系を構築する上で重要です 以下にサンプルに適したリガンド アナライトの設計方法やサンプルの必要条件などをご紹介します アナライト リガンド センサーチップ (1) タンパク質リガンドとしてもアナライトとしても用いることができます
2015 年 11 月 5 日 乳酸菌発酵果汁飲料の継続摂取がアトピー性皮膚炎症状を改善 株式会社ヤクルト本社 ( 社長根岸孝成 ) では アトピー性皮膚炎患者を対象に 乳酸菌 ラクトバチルスプランタルム YIT 0132 ( 以下 乳酸菌 LP0132) を含む発酵果汁飲料 ( 以下 乳酸菌発酵果
2015 年 11 月 5 日 乳酸菌発酵果汁飲料の継続摂取がアトピー性皮膚炎症状を改善 株式会社ヤクルト本社 ( 社長根岸孝成 ) では アトピー性皮膚炎患者を対象に 乳酸菌 ラクトバチルスプランタルム YIT 0132 ( 以下 乳酸菌 LP0132) を含む発酵果汁飲料 ( 以下 乳酸菌発酵果汁飲料 ) の飲用試験を実施した結果 アトピー性皮膚炎症状を改善する効果が確認されました なお 本研究成果は
14551 フェノール ( チアゾール誘導体法 ) 測定範囲 : 0.10~2.50 mg/l C 6H 5OH 結果は mmol/l 単位でも表示できます 1. 試料の ph が ph 2~11 であるかチェックします 必要な場合 水酸化ナトリウム水溶液または硫酸を 1 滴ずつ加えて ph を調整
14551 フェノール ( チアゾール誘導体法 ) 0.10~2.50 mg/l C 6H 5OH 結果は mmol/l 単位でも表示できます 2. ピペットで 10 ml の試料を反応セルに取り ねじぶたで閉じて攪拌します 3. グレーのミクロスプーンで 1 回分の試薬 Ph-1K を加えて ねじぶたでセルを閉じます 4. セルをよく振とうして 固体物を溶かします 5. 緑のミクロスプーンで 1
すとき, モサプリドのピーク面積の相対標準偏差は 2.0% 以下である. * 表示量 溶出規格 規定時間 溶出率 10mg/g 45 分 70% 以上 * モサプリドクエン酸塩無水物として モサプリドクエン酸塩標準品 C 21 H 25 ClFN 3 O 3 C 6 H 8 O 7 :
モサプリドクエン酸塩散 Mosapride Citrate Powder 溶出性 6.10 本品の表示量に従いモサプリドクエン酸塩無水物 (C 21 H 25 ClFN 3 O 3 C 6 H 8 O 7 ) 約 2.5mgに対応する量を精密に量り, 試験液に溶出試験第 2 液 900mLを用い, パドル法により, 毎分 50 回転で試験を行う. 溶出試験を開始し, 規定時間後, 溶出液 20mL
ISOSPIN Blood & Plasma DNA
血液 血清 血しょうからの DNA 抽出キット ISOSPIN Blood & Plasma DNA マニュアル ( 第 2 版 ) Code No. 312-08131 NIPPON GENE CO., LTD. I 製品説明 ISOSPIN Blood & Plasma DNA( アイソスピンブラッド & プラズマ DNA) は 血液 血清 血しょうから DNAを抽出するためのキットです 本キットは
血球数算定 ( 血算 ) NTT 東日本関東病院臨床検査部 栗原正博
血球数算定 ( 血算 ) NTT 東日本関東病院臨床検査部 栗原正博 実施方法 配布試料 K-1 K-2 単一ヒト新鮮血液試料 (ACD EDTA-2K 加血液 ) 測定項目 ヘモグロビン濃度 (Hgb) 赤血球数 (RBC) 白血球数 (WBC) 血小板数 (PLT) 平均赤血球容積 (MCV) 白血球 5 分類 参考調査 ( 好中球 リンパ球 単球 好酸球 好塩基球 ) 試料作製方法 1ACD
血糖値 (mg/dl) 血中インスリン濃度 (μu/ml) パラチノースガイドブック Ver.4. また 2 型糖尿病のボランティア 1 名を対象として 健康なボランティアの場合と同様の試験が行われています その結果 図 5 に示すように 摂取後 6 分までの血糖値および摂取後 9 分までのインスリ
血糖値 (mg/dl) 血中インスリン濃度 (μu/ml) パラチノースガイドブック Ver.4. 7. 摂取後の血糖値変化 パラチノースは小腸のイソマルターゼにより グルコースとフルクトースに分解され消化吸収されます この酵素反応はゆっくり進むため パラチノースの消化吸収速度は遅く スクロースの約 1/5 とされています 18) パラチノースは摂取した際の血液中へのグルコースの流入が穏やかであり
Microsoft PowerPoint 説明資料（きのこを活用してGABA富化素材を作る）林産試験場
きのこを活用して GABA 富化素材を作る 説明内容 はじめに きのこと GABA のこと 本技術の開発と技術内容 GABA に着目した理由 きのこのGABA 生産能素材の機能性評価素材生産プロセスの効率化 本技術の活用 素材の多様化 用途企業等への期待 課題 展開 施設栽培により生産されているきのこ GABA( ギャバ ) の機能性 血圧上昇抑制精神安定成長ホルモン分泌促進その他記憶学習促進体重低減血中の中性脂肪低減
グルコースは膵 β 細胞内に糖輸送担体を介して取り込まれて代謝され A T P が産生される その結果 A T P 感受性 K チャンネルの閉鎖 細胞膜の脱分極 電位依存性 Caチャンネルの開口 細胞内 Ca 2+ 濃度の上昇が起こり インスリンが分泌される これをインスリン分泌の惹起経路と呼ぶ イ
薬効薬理 1. 作用機序 アナグリプチンはジペプチジルペプチダーゼ -4(DPP-4) の競合的かつ可逆的な選択的阻害剤である インクレチンであるグルカゴン様ペプチド-1(GL P-1) 及びグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド (GI P) は グルコース依存的なインスリン分泌促進作用やグルカゴン分泌抑制作用等 ( 主にGLP-1の作用 ) を有するが 24) DPP-4により分解されて活性を失う
がんを見つけて破壊するナノ粒子を開発 ~ 試薬を混合するだけでナノ粒子の中空化とハイブリッド化を同時に達成 ~ 名古屋大学未来材料 システム研究所 ( 所長 : 興戸正純 ) の林幸壱朗 ( はやしこういちろう ) 助教 丸橋卓磨 ( まるはしたくま ) 大学院生 余語利信 ( よごとしのぶ ) 教
がんを見つけて破壊するナノ粒子を開発 ~ 試薬を混合するだけでナノ粒子の中空化とハイブリッド化を同時に達成 ~ 名古屋大学未来材料 システム研究所 ( 所長 : 興戸正純 ) の林幸壱朗 ( はやしこういちろう ) 助教 丸橋卓磨 ( まるはしたくま ) 大学院生 余語利信 ( よごとしのぶ ) 教授らの研究グループは がんを見つけて破壊するナノ粒子について 二種類の試薬をアンモニア水に混合するだけで合成できる新たな方法を開発しました
<4D F736F F D20322E CA48B8690AC89CA5B90B688E38CA E525D>
PRESS RELEASE(2017/07/18) 九州大学広報室 819-0395 福岡市西区元岡 744 TEL:092-802-2130 FAX:092-802-2139 MAIL:koho@jimu.kyushu-u.ac.jp URL:http://www.kyushu-u.ac.jp 造血幹細胞の過剰鉄が血液産生を阻害する仕組みを解明 骨髄異形成症候群の新たな治療法開発に期待 - 九州大学生体防御医学研究所の中山敬一主幹教授
pdf エンドトキシン試験法
00-0909.pdf.0 エンドトキシン試験法 3 5 6 7 9 0 3 5 6 7 9 0 3 5 6 7 9 30 3 3 33 3 35 36 37 3 39 0 3 5 6 次のように改める. 本試験法は, 三薬局方での調和合意に基づき規定した試験法である. エンドトキシン試験法は, カブトガニ (Limulus polyphemus 又は Tachypleus tridentatus)
フェロセンは酸化還元メディエータとして広く知られている物質であり ビニルフェロセン (VFc) はビニル基を持ち付加重合によりポリマーを得られるフェロセン誘導体である 共重合体としてハイドロゲルかつ水不溶性ポリマーを形成する2-ヒドロキシエチルメタクリレート (HEMA) を用いた 序論で述べたよう
Synthesis of high Performance Polymeric Mediators and Evaluation of Biosensors based on them ( 高機能ポリマーメディエータを基盤としたバイオセンサー ) 氏名氷室蓉子 1. 緒言酵素は基質の酸化還元 脱水素反応などを触媒するが これらの反応は同時に電子授受反応でもある 酵素固定化型アンペロメトリックバイオセンサーは
化学 1( 応用生物 生命健康科 現代教育学部 ) ( 解答番号 1 ~ 29 ) Ⅰ 化学結合に関する ⑴~⑶ の文章を読み, 下の問い ( 問 1~5) に答えよ ⑴ 塩化ナトリウム中では, ナトリウムイオン Na + と塩化物イオン Cl - が静電気的な引力で結び ついている このような陽イ
化学 1( 応用生物 生命健康科 現代教育学部 ) ( 解答番号 1 ~ 29 ) Ⅰ 化学結合に関する ⑴~⑶ の文章を読み, 下の問い ( 問 1~5) に答えよ ⑴ 塩化ナトリウム中では, ナトリウムイオン Na + と塩化物イオン Cl - が静電気的な引力で結び ついている このような陽イオンと陰イオンの静電気的な引力による結合を 1 1 という ⑵ 2 個の水素原子は, それぞれ1 個の価電子を出し合い,
オクノベル錠 150 mg オクノベル錠 300 mg オクノベル内用懸濁液 6% 2.1 第 2 部目次 ノーベルファーマ株式会社
オクノベル錠 150 mg オクノベル錠 300 mg オクノベル内用懸濁液 6% 2.1 第 2 部目次 ノーベルファーマ株式会社 Page 2 2.1 CTD の目次 ( 第 2 部から第 5 部 ) 第 2 部 :CTD の概要 ( サマリー ) 2.1 CTD の目次 ( 第 2 部から第 5 部 ) 2.2 諸言 2.3 品質に関する概括資料 2.3.I 諸言 2.3.S 原薬 ( オクスカルバゼピン,
Microsoft Word - タンパク質溶液内酵素消化 Thermo
タンパク質の溶液内酵素溶液内酵素消化 ( 質量分析用サンプル調製 ) 質量分析計によるタンパク質解析においては 一般的にタンパク質を還元 アルキル化した後にトリプシン等で酵素消化して得られた消化ペプチドサンプルが用いられます 本資料ではこのサンプル調製について 専用キットを用いて行う方法 各種試薬や酵素を用いて行う方法 また関連情報として タンパク質の定量法についてご紹介しています 内容 1 培養細胞の酵素消化
Gen とるくん™（酵母用）High Recovery
研究用 Gen とるくん ( 酵母用 ) High Recovery 説明書 v201510da Gen とるくん ( 酵母用 )High Recovery は 細胞壁分解酵素による酵母菌体処理と塩析による DNA 精製の組み合わせにより 効率良く酵母ゲノム DNA を抽出 精製するためのキットです 本キットを用いた酵母ゲノム DNA 調製操作は 遠心による酵母菌体の回収 GenTLE Yeast
CERT化学2013前期_問題
[1] から [6] のうち 5 問を選んで解答用紙に解答せよ. いずれも 20 点の配点である.5 問を超えて解答した場合, 正答していれば成績評価に加算する. 有効数字を適切に処理せよ. 断りのない限り大気圧は 1013 hpa とする. 0 C = 273 K,1 cal = 4.184 J,1 atm = 1013 hpa = 760 mmhg, 重力加速度は 9.806 m s 2, 気体
しょうゆの食塩分測定方法 ( モール法 ) 手順書 1. 適用範囲 この手順書は 日本農林規格に定めるしょうゆに適用する 2. 測定方法の概要 試料に水を加え 指示薬としてクロム酸カリウム溶液を加え 0.02 mol/l 硝酸銀溶液で滴定し 滴定終点までに消費した硝酸銀溶液の量から塩化ナトリウム含有
しょうゆの食塩分測定方法 ( モール法 ) 手順書 1. 適用範囲 この手順書は 日本農林規格に定めるしょうゆに適用する 2. 測定方法の概要 試料に水を加え 指示薬としてクロム酸カリウム溶液を加え 0.02 mol/l 硝酸銀溶液で滴定し 滴定終点までに消費した硝酸銀溶液の量から塩化ナトリウム含有量を算出する 3. 注意事項 (a) クロム酸カリウムを取り扱う際には 皮膚に付けたり粉塵を吸入しないようゴーグル型保護メガネ
プロトコール集 ( 研究用試薬 ) < 目次 > 免疫組織染色手順 ( 前処理なし ) p2 免疫組織染色手順 ( マイクロウェーブ前処理 ) p3 免疫組織染色手順 ( オートクレーブ前処理 ) p4 免疫組織染色手順 ( トリプシン前処理 ) p5 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理 ) p6 免疫
< 目次 > 免疫組織染色手順 ( 前処理なし ) p2 免疫組織染色手順 ( マイクロウェーブ前処理 ) p3 免疫組織染色手順 ( オートクレーブ前処理 ) p4 免疫組織染色手順 ( トリプシン前処理 ) p5 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理 ) p6 免疫組織染色手順 ( ギ酸処理後 マイクロウェーブまたはオートクレーブ処理 )p7 抗原ペプチドによる抗体吸収試験 p8 ウエスタン ブロッティング
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清涼飲料水及びサプリメント中のミネラル濃度の分析について 山本浩嗣萩原彩子白田忠雄山本和則岡崎忠 1. はじめに近年, 健康志向が高まる中で, 多くの種類の清涼飲料水及びサプリメントが摂取されるようになった これらの多くは健康増進法に基づく食品の栄養成分表示のみでミネラル量についてはナトリウム量の表示が義務付けられているのみである 一方カリウム, リンなどはミネラルウォーターやスポーツドリンク, 野菜ジュースなどその商品の特徴として強調される製品以外には含有量について表示されることは少ない状況である
生物学に関する実験例 - 生化学 / 医療に関する実験例 ラジオアッセイ法によるホルモン測定 [ 目的 ] 本実習では, 放射免疫測定 (Radioimmunoassay,RIA) 法による血中インスリンとイムノラジオメトリックアッセイ ( 免疫放射定測定 Immunoradiometric ass
![生物学に関する実験例 - 生化学 / 医療に関する実験例 ラジオアッセイ法によるホルモン測定 [ 目的 ] 本実習では, 放射免疫測定 (Radioimmunoassay,RIA) 法による血中インスリンとイムノラジオメトリックアッセイ ( 免疫放射定測定 Immunoradiometric ass](/thumbs/104/163903931.jpg "生物学に関する実験例 - 生化学 / 医療に関する実験例 ラジオアッセイ法によるホルモン測定 [ 目的 ] 本実習では, 放射免疫測定 (Radioimmunoassay,RIA) 法による血中インスリンとイムノラジオメトリックアッセイ ( 免疫放射定測定 Immunoradiometric ass")
生物学に関する実験例 - 生化学 / 医療に関する実験例 ラジオアッセイ法によるホルモン測定 [ 目的 ] 本実習では, 放射免疫測定 (Radioimmunoassay,RIA) 法による血中インスリンとイムノラジオメトリックアッセイ ( 免疫放射定測定 Immunoradiometric assay, IRMA) 法による血清中のレニンを定量を通して 今日用いられている種々のインビトロ検査法の原理並びに両者の違い等を理解する
平成14年度研究報告
平成 14 年度研究報告 研究テーマ 多嚢胞性卵巣発症に関する遺伝性素因の解析 - PCO の解析 - 北海道大学大学院医学研究科 助手菅原照夫 現所属 : 北海道大学大学院医学研究科 医学部連携研究センター サマリー 多嚢胞性卵巣 (PCO) は生殖可能年齢の婦人の 5 10% に発症する内分泌疾患である 臨床症状は 月経不順 多毛 肥満 排卵障害が主な特徴であり 難治性の不妊症の主な原因である
参考 9 大量出血や急速出血に対する対処 2) 投与方法 (1) 使用血液 3) 使用上の注意 (1) 溶血の防止 参考 9 大量出血や急速出血に対する対処 参考 11 慢性貧血患者における代償反応 2) 投与方法 (1) 使用血液 3) 使用上の注意 (1) 溶血の防止 赤血球液 RBC 赤血球液
参考 血液製剤の使用指針 ( 新旧対照表 ) 平成 28 年 6 月一部改正 目次 項目新旧赤血球液赤血球濃厚液 [ 要約 ] 赤血球液の適正使用 使用指針 3) 周術期の輸血 (2) 術中投与 投与量 使用上の注意点 はじめに Ⅰ 血液製剤の使用の在り方 3. 製剤ごとの使用指針の考え方 1) 赤血球液と全血の投与について 3) 新鮮凍結血漿の投与について 4) アルブミン製剤の投与について 5)
■リアルタイムPCR実践編
リアルタイム PCR 実践編 - SYBR Green I によるリアルタイム RT-PCR - 1. プライマー設計 (1)Perfect Real Time サポートシステムを利用し 設計済みのものを購入する ヒト マウス ラットの RefSeq 配列の大部分については Perfect Real Time サポートシステムが利用できます 目的の遺伝子を検索して購入してください (2) カスタム設計サービスを利用する
実験手順 1 試料の精秤 2 定容試料を 5%HPO3 酸で1ml に定容し 試料溶液とする この時 アスコルビン酸濃度は1~4mg/1ml の範囲がよい 3 酸化試験管を試料の (a) 総ビタミン C 定量用 (b)daa( 酸化型ビタミン C) 定量用 (d) 空試験用の3 本 (c) 各標準液
31218 アスコルビナーゼの活性について 355 市川史弥 3511 金子蒼平 361 大竹美保 3616 加藤颯 要旨酵素であるアスコルビナーゼはビタミン C( 以下 VC) に対してどんな効果があるかを調べるために アスコルビナーゼを含む野菜の1つであるキュウリを使用し 条件を変えて VC 溶液の VC 量の変化をヒドラジン法を用いて測定した その結果 アスコルビナーゼは還元型 VC を酸化型
(Microsoft Word - \230a\225\266IChO46-Preparatory_Q36_\211\374\202Q_.doc)
問題 36. 鉄 (Ⅲ) イオンとサリチルサリチル酸の錯形成 (20140304 修正 : ピンク色の部分 ) 1. 序論この簡単な実験では 水溶液中での鉄 (Ⅲ) イオンとサリチル酸の錯形成を検討する その錯体の実験式が求められ その安定度定数を見積もることができる 鉄 (Ⅲ) イオンとサリチル酸 H 2 Sal からなる安定な錯体はいくつか知られている それらの構造と組成はpHにより異なる 酸性溶液では紫色の錯体が生成する
負荷試験 検体採取 患者の検査前準備 検体採取のタイミング 記号 添加物 ( キャップ色等 ) 採取材料 採取量 測定材料 F 凝固促進剤 + 血清分離剤 ( 青 細 ) 血液 3 ml 血清 H 凝固促進剤 + 血清分離剤 ( ピンク ) 血液 6 ml 血清 検体ラベル ( 単項目オーダー時 )
1081000 8. その他の検体検査 >> 8A. 負荷試験 機能検査 >> 負荷試験 parathyroid hormone intact 連絡先 : 3495 基本情報 4C025 PTH-I(PTH-INTACT) 分析物 JLAC10 診療報酬 識別材料 023 血清 測定法 052 化学 生物発光イムノアッセイ (CLEIA) 結果識別 第 2 章 特掲診療料 D287 内分泌負荷試験
Microsoft PowerPoint - 新技術説明会配付資料rev提出版（後藤）修正.pp
食品の抗アレルギー活性評価に利用できる マウスモデルの紹介 農研機構食品総合研究所 食品機能研究領域主任研究員 後藤真生 農研機構 は独立行政法人農業 食品産業技術総合研究機構のコミュニケーションネームです 国民の 1/3 はアレルギー症状を自覚している 1 アレルギー症状なし (59.1%) 皮膚 呼吸器 目鼻いずれかのアレルギー症状あり (35.9%) 医療機関に入院 通院中 (58.2%) (
Microsoft Word - basic_15.doc
分析の原理 15 電位差測定装置の原理と応用 概要 電位差測定法は 溶液内の目的成分の濃度 ( 活量 ) を作用電極と参照電極の起電力差から測定し 溶液中のイオン濃度や酸化還元電位の測定に利用されています また 滴定と組み合わせて当量点の決定を電極電位変化より行う電位差滴定法もあり 電気化学測定法の一つとして古くから研究 応用されています 本編では 電位差測定装置の原理を解説し その応用装置である
豚丹毒 ( アジュバント加 ) 不活化ワクチン ( シード ) 平成 23 年 2 月 8 日 ( 告示第 358 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した豚丹毒菌の培養菌液を不活化し アルミニウムゲルアジュバントを添加したワクチンである 2 製法 2.1 製造用株 名称豚丹
豚丹毒 ( アジュバント加 ) 不活化ワクチン ( シード ) 平成 23 年 2 月 8 日 ( 告示第 358 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した豚丹毒菌の培養菌液を不活化し アルミニウムゲルアジュバントを添加したワクチンである 2 製法 2.1 製造用株 2.1.1 名称豚丹毒菌多摩 96 株 ( 血清型 2 型 ) 又はこれと同等と認められた株 2.1.2 性状感受性豚に接種すると
氏名垣田浩孝 ( 論文内容の要旨 ) 糖質は生物科学的にも産業的にも重要な物質群であり 簡便かつ高感度な分析法の開発が求められている 代表的な糖質分析手段として高速液体クロマトグラフィー (HPLC) が用いられているが 多くの糖質に発色団や発蛍光団が無いため 示差屈折計による検出が一般的である し
Development and Application of Micr TitleCarbohydrates by High-performance L with Postcolumn Derivatization( Abs Author(s) Kakita, Hirotaka Citation Kyoto University ( 京都大学 ) Issue Date 2009-03-23 URL
プロトコル 細胞 増殖 / 毒性酸化ストレス分子生物学細胞内蛍光プローブ細胞染色ミトコンドリア関連試薬細菌研究用試薬膜タンパク質可溶化剤ラベル化剤二価性試薬イオン電極 その他 機能性有機材料 酵素 (POD,ALP) を標識したい 利用製品 < 少量抗体 (10μg) 標識用 > Ab-10 Rap
増殖 / 毒性酸化ストレス分子生物学内蛍光プローブ染色ミトコンドリア関連試薬細菌研究用試薬膜タンパク質可溶化剤ラベル化剤二価性試薬イオン電極 機能性有機材料 酵素 (PD,ALP) を標識したい 利用製品 < 少量抗体 (0μg) 標識用 > Ab-0 Rapid Peroxidase Labeling Kit < 抗体 タンパク質 (0-00μg) 標識用 > Peroxidase Labeling
資料４－３ 木酢液の検討状況について
資料 -3 木酢液の論点整理 < これまでの合同会合の審議における論点 > 木酢液には 高濃度のホルムアルデヒドが含まれる可能性がある ( 実際に 3,ppm のホルムアルデヒドが検出されたサンプルがあった ) ホルムアルデヒドを含む物質の安全性については慎重に審議するべきであり ホルムアルデヒド低減化のための木酢液の製造方法等を検討する必要がある 今回関係団体からホルムアルデヒドを低減化するための木酢液の製造方法が提案されているが
<4D F736F F D2089BB8A778AEE E631358D E5F89BB8AD28CB3>
第 15 講 酸化と還元 酸化 還元とは切ったリンゴをそのまま放置すると, 時間が経つにつれて断面が変色します これはリンゴの断面が酸化した現象を示しています ピカピカの10 円玉も, しばらくすると黒く, くすんでいきます これも酸化です この10 円玉を水素ガスのなかに入れると, 元のきれいな10 円玉に戻ります これが還元です 1 酸化還元の定義 2 酸化数とは? 3 酸化剤 還元剤についての理解
Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST
ytotoxicity L ssay Kit-WST はじめに 本説明書は ytotoxicity L ssay Kit-WST を用いた抗体依存性細胞傷害測定用 (ntibody-dependent cellmediated cytotoxicity: ) です 本製品のキット内容や Working Solution の調製方法に関して 製品添付の取扱い説明書も合わせてご覧ください 正確な測定のために
B. モル濃度 速度定数と化学反応の速さ 1.1 段階反応 ( 単純反応 ): + I HI を例に H ヨウ化水素 HI が生成する速さ は,H と I のモル濃度をそれぞれ [ ], [ I ] [ H ] [ I ] に比例することが, 実験により, わかっている したがって, 比例定数を k
![B. モル濃度 速度定数と化学反応の速さ 1.1 段階反応 ( 単純反応 ): + I HI を例に H ヨウ化水素 HI が生成する速さ は,H と I のモル濃度をそれぞれ [ ], [ I ] [ H ] [ I ] に比例することが, 実験により, わかっている したがって, 比例定数を k](/thumbs/81/83835231.jpg "B. モル濃度 速度定数と化学反応の速さ 1.1 段階反応 ( 単純反応 ): + I HI を例に H ヨウ化水素 HI が生成する速さ は,H と I のモル濃度をそれぞれ [ ], [ I ] [ H ] [ I ] に比例することが, 実験により, わかっている したがって, 比例定数を k")
反応速度 触媒 速度定数 反応次数について. 化学反応の速さの表し方 速さとは単位時間あたりの変化の大きさである 大きさの値は 0 以上ですから, 速さは 0 以上の値をとる 化学反応の速さは単位時間あたりの物質のモル濃度変化の大きさで表すのが一般的 たとえば, a + bb c (, B, は物質, a, b, c は係数 ) という反応において,, B, それぞれの反応の速さを, B, とし,
(3) 摂取する上での注意事項 ( 該当するものがあれば記載 ) 機能性関与成分と医薬品との相互作用に関する情報を国立健康 栄養研究所 健康食品 有効性 安全性データベース 城西大学食品 医薬品相互作用データベース CiNii Articles で検索しました その結果 検索した範囲内では 相互作用
販売しようとする機能性表示食品の科学的根拠等に関する基本情報 ( 一般消費者向け ) 商品名蹴脂粒食品の区分 加工食品 ( サプリメント形状 その他 ) 生鮮食品機能性関与成分名キトグルカン ( エノキタケ抽出物 ) 表示しようとする機能性本品はキトグルカン ( エノキタケ抽出物 ) を配合しており 体脂肪 ( 内臓脂肪 ) を減少させる働きがあります 体脂肪が気になる方 肥満気味の方に適しています
参考1中酪(H23.11)
- 1- 参考 1 - 2- - 3- - 4- - 5- - 6- - 7- - 8- 別添 1 牛乳の比重増加要因の解析 国立大学法人帯広畜産大学畜産フィールド科学センター准教授木田克弥 背景 乳および乳製品の成分規格等に関する省令 ( 乳等省令 ) において 生乳の比重は 1.28-1.34 に規定されている 一方 乳牛の遺伝的改良 ( 乳量および乳成分率の向上 ) に成果として 昨今の生乳の比重は増加傾向にあり
例 2: 組成 Aを有するピアノ線用 Fe 系合金 ピアノ線用 という記載がピアノ線に用いるのに特に適した 高張力を付与するための微細層状組織を有するという意味に解釈される場合がある このような場合は 審査官は 請求項に係る発明を このような組織を有する Fe 系合金 と認定する したがって 組成
食品の用途発明に関する審査基準該当部分 審査基準第 III 部第 2 章新規性 進歩性 第 4 節特定の表現を有する請求項等についての取扱い 3. 物の用途を用いてその物を特定しようとする記載 ( 用途限定 ) がある場合 3.1 請求項に係る発明の認定 請求項中に ~ 用 といった 物の用途を用いてその物を特定しようとする記載 ( 用途限定 ) がある場合は 審査官は 明細書及び図面の記載並びに出願時の技術常識を考慮して
JAJP
自動前処理によるオリーブオイル中の脂肪酸メチルエステル (FAME) の測定 アプリケーションノート 食品テスト 著者 Ramon Hernandez and Pablo Castillo Lab de Microbiologia de Andaluza Instrumentatcion in Spain Enrique Longueira and Jose Pineda Laboratorio Químico
< F2D816995BD90AC E30398C8E303493FA88EA959489FC90B3>
別添 1 医薬品 GLPチェックリスト ( 共通事項 ) [1] 職員 組織目的 試験施設が適切にして十分な人材を有しており また医薬品 GLPに沿った試験が行われるように組織されているか 1 試験施設全体の組織とGLP 適用試験の組織との関係 2 試験施設全体の組織と信頼性保証部門の組織との関係 3 運営管理者の氏名 職名 履歴及び運営管理者の試験施設に対する把握状況 4 試験責任者 信頼性保証部門責任者及び資料保存施設管理責任者等の指定の方法は適切か
生理学 １章 生理学の基礎 1-1. 細胞の主要な構成成分はどれか １ タンパク質 ２ ビタミン ３ 無機塩類 ４ ＡＴＰ 第５回 按マ指 (1279) 1-2. 細胞膜の構成成分はどれか １ 無機りん酸 ２ リボ核酸 ３ りん脂質 ４ 乳酸 第６回 鍼灸 (1734) E L 1-3. 細胞膜につ
の基礎 1-1. 細胞の主要な構成成分はどれか １ タンパク質 ２ ビタミン ３ 無機塩類 ４ ＡＴＰ 第５回 (1279) 1-2. 細胞膜の構成成分はどれか １ 無機りん酸 ２ リボ核酸 ３ りん脂質 ４ 乳酸 第６回 (1734) 1-3. 細胞膜について正しい記述はどれか １ 糖脂質分子が規則正しく配列している ２ イオンに対して選択的な透過性をもつ ３ タンパク質分子の二重層膜からなる ４
ン (LVFX) 耐性で シタフロキサシン (STFX) 耐性は1% 以下です また セフカペン (CFPN) およびセフジニル (CFDN) 耐性は 約 6% と耐性率は低い結果でした K. pneumoniae については 全ての薬剤に耐性はほとんどありませんが 腸球菌に対して 第 3 世代セフ
2012 年 12 月 5 日放送 尿路感染症 産業医科大学泌尿器科学教授松本哲朗はじめに感染症の分野では 抗菌薬に対する耐性菌の話題が大きな問題点であり 耐性菌を増やさないための感染制御と適正な抗菌薬の使用が必要です 抗菌薬は 使用すれば必ず耐性菌が出現し 増加していきます 新規抗菌薬の開発と耐性菌の増加は 永遠に続く いたちごっこ でしょう しかし 近年 抗菌薬の開発は世界的に鈍化していますので
Microsoft PowerPoint - 多核NMRへの応用_提出版.pptx
多核 NMR の応用 ~ 19 F NMRを用いた定量分析 ~ 第 1 回定量 NMRクラブ (2012/12/4) 産業技術総合研究所計測標準研究部門有機分析科バイオディカル標準研究室山﨑太一 1 定量 19 FNMR 法の開発目的 フッ素化合物は生化学におけるスクリーニングや材料科学におけるポリマー分析等幅広く用いられている 分子構造解析や酵素活性等の速度論解析に使用 19 FNMR を用いた高精度な定量法開発は重要!
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ニューカッスル病 マレック病 ( ニューカッスル病ウイルス由来 F 蛋白遺伝子導入マレック病ウイルス 1 型 ) 凍結生ワクチン 平成 22 年 8 月 12 日 ( 告示第 2288 号 ) 新規追加 ニューカッスル病ウイルスのF 蛋白をコードする遺伝子を弱毒マレック病ウイルス (1 型 ) に挿入して得られた組換え体ウイルスを培養細胞で増殖させて得た感染細胞浮遊液を凍結したワクチンである 1 小分製品の試験
表 1. HPLC/MS/MS MRM パラメータ 表 2. GC/MS/MS MRM パラメータ 表 1 に HPLC/MS/MS 法による MRM パラメータを示します 1 化合物に対し 定量用のトランジション 確認用のトランジションとコーン電圧を設定しています 表 2 には GC/MS/MS
ACQUITY UPLC TM /MS/MS と GC/MS/MS によるベビーフード中の残留農薬の分析 No. 720007 20001436J 概要 EU の Baby Food Directive 2003/13/EC 1) では ベビーフード中の使用が禁止されている残留農薬について明示しています その濃度が 0.003mg/kg を超えているのか あるいは 0.004-0.008mg/kg
宗像市国保医療課 御中
平成 20 年度 特定保健指導 積極的支援 アクアドームプログラム報告書 1 1. はじめに 標準的な健診 保健指導プログラム ( 確 定版 ) ( 平成 19 年 4 月厚生労働省健康 局 ) に 医療制度改革大綱 ( 平成 17 年 12 月 1 日政府 与党医療改革協議会 ) を踏まえ 生活習慣病予防の徹底 を図るため 平成 20 年 4 月から 高齢者の医療の確保に関する法律により 医療保険者に対して
５７巻Ｓ‐Ａ（総会号）／ＮＫＲＰ‐０２（会長あいさつ）
β β β β β β β β β β シンポジウム 1 創薬物語 科学者としての喜びの瞬間 4 レボフロキサシンに至る創薬研究 よりよい薬を求めて 第一三共株式会社 研究開発本部 研究開発企画部 早川勇夫 レボフロキサシン クラビット 1 は 1993 年上市された世界初の光学活性のニューキノロン系抗菌薬 以 下 ニューキノロンと略 である 1 は 1985 年に上市されたラセミ体のオフロキサシン
保健機能食品制度 特定保健用食品 には その摂取により当該保健の目的が期待できる旨の表示をすることができる 栄養機能食品 には 栄養成分の機能の表示をすることができる 食品 医薬品 健康食品 栄養機能食品 栄養成分の機能の表示ができる ( 例 ) カルシウムは骨や歯の形成に 特別用途食品 特定保健用
資料 1 食品の機能性表示に関する制度 平成 25 年 4 月 4 日 消費者庁 保健機能食品制度 特定保健用食品 には その摂取により当該保健の目的が期待できる旨の表示をすることができる 栄養機能食品 には 栄養成分の機能の表示をすることができる 食品 医薬品 健康食品 栄養機能食品 栄養成分の機能の表示ができる ( 例 ) カルシウムは骨や歯の形成に 特別用途食品 特定保健用食品 保健の機能の表示ができる
記載データ一覧 品目名 製造販売業者 BE 品質再評価 1 マグミット錠 250mg 協和化学工業 2 酸化マグネシウム錠 250mg TX みらいファーマ 3 酸化マグネシウム錠 250mg モチダ 持田製薬販売 # 4 酸化マグネシウム錠 250mg マイラン マイラン製薬 # 5 酸化マグネシ
医療用医薬品最新品質情報集 ( ブルーブック ) 2017.7.7 初版 有効成分 酸化マグネシウム 品目名 ( 製造販売業者 ) 1 マグミット錠 250mg 協和化学工業 後発医薬品 2 酸化マグネシウム錠 250mg TX みらいファーマ 3 酸化マグネシウム錠 250mg モチダ 持田製薬販売 4 酸化マグネシウム錠 250mg マイラン マイラン製薬 5 酸化マグネシウム錠 250mg ケンエー
2. PQQ を利用する酵素 AAS 脱水素酵素 クローニングした遺伝子からタンパク質の一次構造を推測したところ AAS 脱水素酵素の前半部分 (N 末端側 ) にはアミノ酸を捕捉するための構造があり 後半部分 (C 末端側 ) には PQQ 結合配列 が 7 つ連続して存在していました ( 図 3
報道発表資料 2003 年 4 月 24 日 独立行政法人理化学研究所 半世紀ぶりの新種ビタミン PQQ( ピロロキノリンキノン ) 理化学研究所 ( 小林俊一理事長 ) は ピロロキノリンキノンと呼ばれる物質が新種のビタミンとして機能していることを世界で初めて解明しました 理研脳科学総合研究センター ( 甘利俊一センター長 ) 精神疾患動態研究チーム ( 加藤忠史チームリーダー ) の笠原和起基礎科学特別研究員らによる成果です
日本標準商品分類番号 カリジノゲナーゼの血管新生抑制作用 カリジノゲナーゼは強力な血管拡張物質であるキニンを遊離することにより 高血圧や末梢循環障害の治療に広く用いられてきた 最近では 糖尿病モデルラットにおいて増加する眼内液中 VEGF 濃度を低下させることにより 血管透過性を抑制す
日本標準商品分類番号 872491 カリジノゲナーゼの血管新生抑制作用 カリジノゲナーゼは強力な血管拡張物質であるキニンを遊離することにより 高血圧や末梢循環障害の治療に広く用いられてきた 最近では 糖尿病モデルラットにおいて増加する眼内液中 VEGF 濃度を低下させることにより 血管透過性を抑制することが示されたが 血管新生に対するカリジノゲナーゼの影響を評価した報告はない そこで今回 網膜血管新生に対するカリジノゲナーゼの役割を同定するため
土壌含有量試験（簡易分析）
土壌中の重金属の 簡易 迅速分析法 標準作業手順書 * 技術名 : ストリッピング ボルタンメトリー法 ( 超音波による前処理 ) 使用可能な分析項目 : 砒素溶出量, 砒素含有量 実証試験者 : 北斗電工株式会社 株式会社フィールドテック * 本手順書は実証試験者が作成したものである なお 使用可能な技術及び分析項目等の記載部分を抜粋して掲載した 1. 適用範囲この標準作業手順書は 環告 18 号に対応する土壌溶出量試験
Problem P5
問題 P5 メンシュトキン反応 三級アミンとハロゲン化アルキルの間の求核置換反応はメンシュトキン反応として知られている この実験では DABCO(1,4 ジアザビシクロ [2.2.2] オクタン というアミンと臭化ベンジルの間の反応速度式を調べる N N Ph Br N N Br DABCO Ph DABCO 分子に含まれるもう片方の窒素も さらに他の臭化ベンジルと反応する可能性がある しかし この実験では
北陸RI研究会誌第４号
ESR ESR ESR in vitro in vivo ESR. ESR ESR Electron Spin Resonance ESR ESR spectroscopy ESR EPR Electron Paramagnetic Resonance. ESR ESR ESR ESR. ESR ESR 3 h h g H h g H ESR. triplet oxygen 3 O 2 superoxide
スライド 1
Lipocapsulater を用いた薬剤内包検討例 1 Lipocapsulater FD-S PE を用いた クルクミンのリポソーム内包化検討 2 Lipocapsulater FD-S PE を用いたクルクミンの内包化検討 クルクミン ウコンの黄色色素であり 抗炎症作用や抗酸化作用をもっており 健康食品としても利用されている脂溶性化合物 使用メーカー sigma-aldrich, C1386-10G
2.5 味噌分析方法総ホ リフェノール量は同様に抽出し, 沖 6) の方法により測定した イソフラホ ンは, 菊地 7) ら方法により前処理し江崎 8) らに従い, 内標準を添加しイソクラチィック HPLC 法で定量分 析した イソフラホ ン以外の抗酸化成分は,HIROTA 9) らの方法に準じ前処
重点研究 米味噌の抗酸化能を高める製造方法に関する研究 桐原広成 古口久美子 松本健一 Study on Manufacturing Technology of Rice Miso for Increase of Antioxidant Capacities Hironari KIRIHARA,Kumiko KOGUCHI and Kenichi MATSUMOTO 味噌製造工程について,ORAC
ポリソルベート 80
1/5 HIRANUMA APPLICATION DATA 水分データ シリーズデータ No 11 14/9/30 水分 1. 測定の概要 医薬品 逆滴定ポリソルベート 80 シリーズでは カールフィッシャー容量滴定法を採用しています 容量滴定法では 試料中の 水とカールフィッシャー試薬を反応させ 試薬中のヨウ素の消費量をもとに水分量を求めます H2O + I2 + SO2 + 3RN + CH3OH
培養細胞からの Total RNA 抽出の手順 接着細胞のプロトコル 1. プレート ( またはウエル ) より培地を除き PBSでの洗浄を行う 2. トリプシン処理を行い 全量を1.5ml 遠心チューブに移す スクレイパーを使って 細胞を掻き集める方法も有用です 3. 低速遠心 ( 例 300 g
Maxwell RSC simplyrna Cells / Tissue Kit ( カタログ番号 AS1340/AS1390) 簡易マニュアル 注意 : キットを受け取りましたら 1-Thioglycerolを取り出し キット箱は室温で保存してください 取り出した1-Thioglycerolは2~10 で保存してください ご用意いただくもの 細胞 組織の両方の場合で共通 ボルテックスミキサー ピペットマン
ルグリセロールと脂肪酸に分解され吸収される それらは腸上皮細胞に吸収されたのちに再び中性脂肪へと生合成されカイロミクロンとなる DGAT1 は腸管で脂質の再合成 吸収に関与していることから DGAT1 KO マウスで認められているフェノタイプが腸 DGAT1 欠如に由来していることが考えられる 実際
学位論文の内容の要旨 論文提出者氏名 津田直人 論文審査担当者 主査下門顕太郎副査吉田雅幸横関博雄 論文題目 Intestine-Targeted DGAT1 Inhibition Improves Obesity and Insulin Resistance without Skin Aberrations in Mice ( 論文内容の要旨 ) < 要旨 > Diacylglycerol O-acyltransferase
Title 揮発性肺がんマーカーの探索 ( Digest_ 要約 ) Author(s) 花井, 陽介 Citation Kyoto University ( 京都大学 ) Issue Date URL R
Title 揮発性肺がんマーカーの探索 ( Digest_ 要約 ) Author(s) 花井, 陽介 Citation Kyoto University ( 京都大学 ) Issue Date 2014-07-23 URL https://doi.org/10.14989/doctor.r12 Right 学位規則第 9 条第 2 項により要約公開 ; 許諾条件により要約は2015-05-01に公開
研究報告58巻通し.indd
25 高性能陰イオン分析カラム TSKgel SuperIC-Anion HR の特性とその応用 バイオサイエンス事業部開発部セパレーショングループ 佐藤真治多田芳光酒匂幸中谷茂 1. はじめにイオンクロマトグラフィー (IC) は 環境分析等の各種公定法に採用されている溶液試料中のイオン成分分析法であり 当社においてもハイスループット分析を特長とする高速イオンクロマトグラフィーシステム IC 2010
PEC News 2004_3....PDF00
2004 March 3 C O N T E N T S Petroleum Energy Center News 1 13 1 2 3 3 4 3 5 6 3 7 8 3 9 ロ 芳香環の水素化 通常の縮合多環芳香族の水素化には 図17 芳香環の水素化 水素化活性の強化 NiMo系あるいはNiW系触媒が有効であり これらの水素化活性を高めることでメチル 基による反応阻害を緩和し 4,6DMDBT等
Western BLoT Immuno Booster
研究用 Western BLoT Immuno Booster 説明書 v201211 Western BLoT Immuno Booster は 抗体の反応性を増強させる成分を含む溶液で 抗体の希釈液に用いるだけで 抗原抗体反応を促進します 本製品は ウェスタンブロット ELISA 等の各種イムノアッセイに対応しており 各アッセイにおいて数倍から数十倍の検出感度向上が期待できます 西洋ワサビペルオキシダーゼ
1. 測定原理 弱酸性溶液中で 遊離塩素はジエチル p フェニレンジアミンと反応して赤紫色の色素を形成し これを光学的に測定します 本法は EPA330.5 および US Standard Methods 4500-Cl₂ G EN ISO7393 に準拠しています 2. アプリケーション サンプル
00595 塩素 (DPD 法 ) 遊離塩素の測定 測定範囲 : 0.03~6.00mg/l Cl 2 結果は mmol/l 単位でも表示できます 2. ピペットで 5.0ml の試料を丸セルに取ります 3. 青のミクロスプーンで 1 回分の試薬 Cl 1 を加えて ねじぶたで閉じます 4. セルをよく振とうして 固体物を溶かします 5. 反応時間 :1 分間 6. 各セルをセルコンパートメントにセットし
ISOSPIN Plasmid
プラスミド DNA 抽出キット ISOSPIN Plasmid マニュアル ( 第 5 版 ) Code No. 318-07991 NIPPON GENE CO., LTD. I 製品説明 ISOSPIN Plasmid( アイソスピンプラスミド ) は スピンカラムを用いて簡単に大腸菌から高純度なプラスミド DNA を抽出できるキットです 本キットは カオトロピックイオン存在下で DNA がシリカへ吸着する原理を応用しており
Microsoft Word - todaypdf doc
2012 年 6 月 20 日放送 肺内抗菌薬濃度測定と感染症治療への応用肺内抗菌薬濃度測定と感染症治療への応用 北海道大学大学大学院大学院呼吸器内科学教授西村正治はじめにきょうは 気管支鏡下マイクロサンプリング法を用いた気道上皮被覆液中の薬物動態についてお話しします 薬物治療をする際に 血液中の PK/ PD 理論というのは大変重要です つまり 薬物を投与した場合に 体の中にどのように薬物が行きわたるかということを考える学問です
日本脳炎不活化ワクチン ( シード ) 平成 24 年 7 月 4 日 ( 告示第 1622 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した日本脳炎ウイルスを同規格に適合した株化細胞で増殖させて得たウイルス液を不活化したワクチンである 2 製法 2.1 製造用株 名称日本脳炎ウイル
日本脳炎不活化ワクチン ( シード ) 平成 24 年 7 月 4 日 ( 告示第 1622 号 ) 新規追加 1 定義シードロット規格に適合した日本脳炎ウイルスを同規格に適合した株化細胞で増殖させて得たウイルス液を不活化したワクチンである 2 製法 2.1 製造用株 2.1.1 名称日本脳炎ウイルス中山株薬検系又はこれと同等と認められた株 2.1.2 性状豚腎初代細胞で増殖し がちょう 鶏初生ひな及びはとの赤血球を凝集する
木村の理論化学小ネタ 熱化学方程式と反応熱の分類発熱反応と吸熱反応化学反応は, 反応の前後の物質のエネルギーが異なるため, エネルギーの出入りを伴い, それが, 熱 光 電気などのエネルギーの形で現れる とくに, 化学変化と熱エネルギーの関
熱化学方程式と反応熱の分類発熱反応と吸熱反応化学反応は, 反応の前後の物質のエネルギーが異なるため, エネルギーの出入りを伴い, それが, 熱 光 電気などのエネルギーの形で現れる とくに, 化学変化と熱エネルギーの関係を扱う化学の一部門を熱化学という 発熱反応反応前の物質のエネルギー 大ネルギ熱エネルギーー小エ反応後の物質のエネルギー 吸熱反応 反応後の物質のエネルギー 大ネルギー熱エネルギー小エ反応前の物質のエネルギー
図 B 細胞受容体を介した NF-κB 活性化モデル
60 秒でわかるプレスリリース 2007 年 12 月 17 日 独立行政法人理化学研究所 免疫の要 NF-κB の活性化シグナルを増幅する機構を発見 - リン酸化酵素 IKK が正のフィーッドバックを担当 - 身体に病原菌などの異物 ( 抗原 ) が侵入すると 誰にでも備わっている免疫システムが働いて 異物を認識し 排除するために さまざまな反応を起こします その一つに 免疫細胞である B 細胞が
パナテスト ラットβ2マイクログロブリン
研究用試薬 2014 年 4 月作成 EIA 法ラット β 2 マイクログロブリン測定キット PRH111 パナテスト A シリーズラット β 2- マイクロク ロフ リン 1. はじめに β 2 - マイクログロブリンは, 血液, 尿, および体液中に存在し, ヒトでは腎糸球体障害, 自己免疫疾患, 悪性腫瘍, 肝疾患などによって血中濃度が変化するといわれています. また,β 2 - マイクログロブリンの尿中濃度は,
Microsoft Word - 第14回定例会_平田様_final .doc
クロスオーバー実験のデザインと解析 - テレメトリー法によ る QT/QTc 試験の実データを用いた検討 - II. クロスオーバー実験の統計解析 4) 有意差検定と信頼区間方式の解析の比較 平田篤由 薬理統計グループ安全性薬理チーム 要約 : ヒトの QT/QTc 評価試験における判断基準は,QTc 間隔の 95% 信頼区間の上限が 10ms を越えるかどうかである. 一方, 非臨床試験のイヌを用いたテレメトリー
2009年度業績発表会（南陽）
高速イオンクロマトグラフィーによる ボイラ水中のイオン成分分析 のご紹介 東ソー株式会社 バイオサイエンス事業部 JASIS 217 新技術説明会 (217.9.8) rev.1 1. ボイラ水分析について ボイラ水の水質管理 ボイラ : 高圧蒸気の発生装置であり 工場, ビル, 病院など幅広い産業分野でユーティリティ源として利用されている 安全かつ効率的な運転には 日常の水質管理, ブロー管理が必須
Untitled
上原記念生命科学財団研究報告集, 25 (2011) 86. 線虫 C. elegans およびマウスをモデル動物とした体細胞レベルで生じる性差の解析 井上英樹 Key words: 性差, ストレス応答,DMRT 立命館大学生命科学部生命医科学科 緒言性差は雌雄の性に分かれた動物にみられ, 生殖能力の違いだけでなく形態, 行動などそれぞれの性の間でみられる様々な差異と定義される. 性差は, 形態や行動だけでなく疾患の発症リスクの男女差といった生理的なレベルの差異も含まれる.
Microsoft Word - 1 color Normalization Document _Agilent version_ .doc
color 実験の Normalization color 実験で得られた複数のアレイデータを相互比較するためには Normalization( 正規化 ) が必要です 2 つのサンプルを異なる色素でラベル化し 競合ハイブリダイゼーションさせる 2color 実験では 基本的に Dye Normalization( 色素補正 ) が適用されますが color 実験では データの特徴と実験の目的 (