ゲル剤 バイオ ラッドでは ゲル中のタンパク質を検出する剤を数多く取り扱っています 感度 操作性 再現性 定量性 電気泳動後のアプリケーションへの影響など サンプルと目的に応じて最適な剤は異なります 剤を選択する際に 下記の剤セレクションガイドをご参照ください 剤セレクションガイド 製品名 用途 プロセス数 所要時間目安 最高感度 事前調製 特徴 CBB Bio-Safe CBB G-250 ステイン タンパク質 ペプチド 3ステップ 1 2.5hour 8 28ng なし 淡青色 水だけで可能 ( 低分子の場合は固定が必要 ) CBB R-250 ステイン & デステインキット タンパク質 2ステップ 2.5hour 36 47ng なし 濃青色 一般的なCBB 剤 銀 Dodeca シルバーステインキット タンパク質 8ステップ 2hour 0.25 0.5ng 固定液増感試薬銀試薬発色試薬停止液 高感度 低バックグラウンド 粉末からの調製不要 質量分析 プロテインシークエンサーに使用可能 シルバーステインプラスキット タンパク質 DNA 4ステップ 1.5hour 0.6 1.2ng 固定液 液 停止液 4 ステップで簡単 低バックグラウンド 糖タンパク質は染まりません シルバーステインキット タンパク質 DNA 7ステップ 2hour 0.6 1.2ng 固定液酸化試薬銀試薬発色試薬停止液 広く使用されている銀 IEF ゲル 糖 糖タンパク質も可能 蛍光 Oriole 蛍光ゲルステインタンパク質 1ステップ 1.5hour 0.5 1ng なし 脱色いらずで簡単 (5Lキット希釈) 質量分析に使用可能 UV 励起可能 Flamingo ゲルステイン タンパク質 2ステップ 5hour 0.25 0.5ng 固定液 希釈 高感度 簡単 高い定量性 RUBY GELステイン タンパク質 3ステップ 4.5hour 1 10ng 固定液 脱色液 高感度 簡単 高い定量性 ネガティブ Zinc ステイン & デステインキット カッパーステイン & デステインキット 核酸 タンパク質 ペプチド タンパク質 ペプチド 3ステップ 15min 6 12ng 希釈 バンドは染まりません バックグラウンドが白色 3ステップ 10min 6 12ng 希釈 バンドは染まりません バックグラウンドが青色 エチジウムブロマイド溶液核酸 2 ステップ 1hour 50ng なし 一般的な DNA 236 電気泳動とブロッティング www.bio-rad.com
タンパク質は 電気泳動後にタンパク質を可視化するための最も簡単で迅速な方法です バイオ ラッドは感度 定量性 質量分析計対応に合わせた可視 蛍光剤を取り扱っています CBB クマシーブリリアントブルーは を行ったゲル中のタンパク質をするための最も一般的な方法です バイオ ラッドでは 用途に合わせて2 種類のCBB 剤を取り扱っています 1 2 3 4 5 6 7 8 See Also ゲル作成試薬 : P.191 EXQuestスポットカッター : P.319 画像解析 : P.306 Bio-Safe CBB G-250 ステイン クマシーブリリアントブルー G-250を用いたPAGEゲル中タンパク質のキットです から脱色まで酢酸やメタノールを使用しませんので CBB 特有の臭いもなく またゲルが収縮する心配もありません Ready-To-Useで事前調製の必要がなく そのままお使いいただけます Ready-To-Use すぐお使いいただけます CBB が約 1 時間 45 分で行えます Bio-Safe G-250ステインによるレーン1, 8:スタンダード (Low) レーン2, 3: ヒトトランスフェリンレーン4, 5: 魚肉タンパク質抽出液レーン6, 7: 大腸菌タンパク質抽出液 簡単な3ステップ 精製水以外の試薬は必要ありません ゲルが収縮しません 液中は毒性成分を含みません 検出感度は1バンドあたり最高 8 28ng 固定操作を加えることでペプチドゲルにもご使用いただけます 事前調製不要 50ml 1 時間 1 回 精製水による脱色 200ml 5 分 3 回 200ml 30 分 1 回 CBB R-250 ステイン & デステインキット 最も広く使用されているCBB R-250を用いたキットです 液も脱色液もすぐにお使いいただける溶液となっており 試薬調製の手間がかかりません Ready-To-Use すぐお使いいただけます 溶液ですから調製の手間がいりません 脱色液もセットになっています 検出感度は1バンドあたり最高 36 47ng 組成 CBB R-250 溶液 :0.1% CBB R-250, 40% メタノール, 10% 酢酸 CBB R-250 脱色溶液 :40% メタノール, 10% 酢酸 脱色 事前調製不要 30 60 分 1 回 事前調製不要数十分 数時間 数回 www.bio-rad.com 電気泳動とブロッティング 237
カタログ番号 品名 価格 保存 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 161-0786 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 1L 16,000 室温 161-0786B02 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 1L 2 30,000 室温 161-0787 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 5Lキューブ 55,000 室温 CBB R-250ステイン & デステインキット 161-0435JA CBB R-250 溶液キット 15,000 室温 構成内容 :CBB R-250 溶液 1L CBB R-250 脱色溶液 1L 2 本 161-0436 CBB R-250 溶液 1L 10,000 室温 161-0436B04 CBB R-250 溶液 1L 4 本 32,000 室温 161-0438 CBB R-250 脱色溶液 1L 7,500 室温 161-0438B04 CBB R-250 脱色溶液 1L 4 本 24,000 室温 CBB 粉末 161-0400 クマシーブルー R-250, 10g 9,500 室温 161-0406 クマシーブルー G-250, 10g 9,500 室温 シルバーステイン Dodeca シルバーステインキット Dodecaシルバーステインキットは Sinhaら (2001) により開発された方法に基づいた銀用キットです 本製品は Dodecaステイナー (P.225 参照 ) と併用することで非常に高い再現性で 複数枚のゲル上のタンパク質を高感度に同時検出することができます 低バックグラウンドで高感度検出が可能です (BSA : 0.25-0.5ng) 全て溶液状態で販売されており 試薬の調製が簡単です グルタルアルデヒドによるタンパク質の修飾を行わずにするため 質量分析用サンプルに使用することができます Dodecaステイナーと併用することで高い再現性で 複数枚のゲルを同時することも可能です ラージゲル 12 枚のプロトコール (Dodeca ステイナー使用時 ) シルバーステインプラスキット シルバーステインプラスキットはGottleib & Chavkoらの開発した方法に改良を加え アクリルアミドゲルだけでなくアガロースゲルでもお使いただけます 簡単な操作でタンパク質 DNA の高感度検出が可能です 3ステップ 1 時間の簡単操作 ngのタンパク質やdnaが検出可能 Dodecaシルバーステインによるマウス肝臓抽出液を 2 次元電気泳動により展開し アクリルアミドだけでなく アガロースゲルでも使用可能 固定増感洗浄 リンス 発色停止洗浄 40% エタノール 10% 酢酸溶液 10L 中で1 時間 オーバーナイト 10%SC 1%BRC 30% エタノール溶液 10L 中で30 分 10L 精製水にて10 分 3 回 2%SRC 溶液 10L 中で30 分 10L 精製水にて1 分 1 回 10%DBC 0.02%IDC 0.005%BRC 溶液 10L 中で10-30 分 5% 酢酸溶液 10L 中で10 分 10L 精製水にて10 分 検出感度は1バンドあたり最高 0.6 1.2ng 1キットでミニゲル40 枚 ラージゲル13 枚のが可能です 糖や糖タンパク質 IEFゲルには使用できません 質量分析用サンプルに使用可能 固定 メタノール / 酢酸と固定濃縮試薬を混合 200ml 20 分 1 回 200ml 10 分 2 回 シルバー懸濁試薬等を用時調製にて混合 100ml 20 分 1 回 停止 5% 酢酸 200ml 15 分 1 回 238 電気泳動とブロッティング www.bio-rad.com
シルバーステインキット シルバーステインキットは広く使用されているMerrilらの開発した方法に基づいた銀キットです シルバーステインキットではの難しいIEFゲルや糖 糖タンパク質も可能です アガロースゲルには使用できません 広く使用されている銀キットです ミニゲル1 枚のプロトコール 固定 1. 40% メタノール /10% 酢酸 200ml 30 分 1 回 2. 10% エタノール /5% 酢酸 200ml 15 分 2 回酸化事前に精製水で10 倍希釈 100ml 5 分 1 回 糖や糖タンパク質 IEFゲルもできます 200ml 5 分 2 回 検出感度は1バンドあたり最高 0.6 1.2ng 銀試薬 事前に精製水で 10 倍希釈 100ml 20 分 1 回 アガロースゲルには使用できません 100ml 1 分 1 回 1キットでミニゲル48 枚 ラージゲル24 枚のが可能です 発色 停止 粉末を事前に精製水に溶解 100ml 30 秒 1 回 100ml 5 分 2 回 5% 酢酸 仕様 キット 時間 可能なゲルの枚数 保存期間 保存温度 検出限界 Dodecaシルバーステイン 3 時間 ラージゲル12 枚 1 年 室温 0.25 0.5ng シルバーステインプラス 1.5 時間 ミニゲル40 枚 1 年 室温 0.6 1.2ng シルバーステイン 2 時間 ミニゲル48 枚 6ヶ月 4 0.6 1.2ng カタログ番号 品名 価格 保存 Dodecaシルバーステインキット 161-0480 Dodecaシルバーステインキットラージ 65,000 室温 (Dodecaステイナーラージで12 枚同時にする容量 ) 161-0481 Dodecaシルバーステインキットスモール 53,000 室温 (Dodecaステイナースモールで12 枚同時にする容量 ) 161-0472 Dodecaシルバーステインイメージディベロップ試薬 2.5ml 6,000 室温 161-0473 Dodecaシルバーステイン増感試薬 700ml 17,000 室温 161-0474 Dodecaシルバーステイン増感試薬 1L 24,000 室温 161-0475 Dodecaシルバーステインバックグランドリデューサー試薬 75ml 7,000 室温 161-0476 Dodecaシルバーステインバックグランドリデューサー試薬 125ml 10,000 室温 161-0477 Dodecaシルバーステイン銀濃縮試薬 140ml 14,000 室温 161-0478 Dodecaシルバーステイン銀濃縮試薬 200ml 17,000 室温 161-0479 Dodecaシルバーステインディベロップメントバッファー試薬 700ml 17,000 室温 161-0482 Dodecaシルバーステインディベロップメントバッファー試薬 1L 21,000 室温 シルバーステインプラスキット 161-0449 シルバーステインプラスキット 34,000 室温 構成内容 : 定着促進濃縮試薬 固定濃縮試薬 シルバー懸濁試薬 リダクション調製試薬 イメージデベロップ試薬 161-0448 シルバーステインプラス定着促進濃縮試薬 50g 8,000 室温 161-0461 シルバーステインプラス固定濃縮試薬 1000ml 13,000 室温 161-0462 シルバーステインプラス懸濁試薬 100ml 8,000 室温 161-0463 シルバーステインプラスリダクション調製試薬 100ml 8,000 室温 161-0464 シルバーステインプラスイメージディベロップ試薬 100ml 12,000 室温 シルバーステインキット * 161-0443 シルバーステインキット 38,000 4 構成内容 : オキシダイザーコンセントレート シルバーリージェントコンセントレート ディベロッパー 161-0444 オキシダイザーコンセントレート 480ml 18,000 4 161-0445 シルバーリージェントコンセントレート 480ml 15,000 4 161-0450 シルバーステインディベロッパー 115g 1 本 10,000 4 161-0450B04 シルバーステインディベロッパー 115g 4 本 33,000 4 * シルバーステインキットの保存可能期間は 6 ヶ月です www.bio-rad.com 電気泳動とブロッティング 239
See Also 画像解析 : P.306 ゲル作成試薬 : P.191 蛍光 Oriole 蛍光ゲルステイン Oriole 蛍光ゲルステインはUV 励起が可能な 後のゲルを簡単に高感度にができる蛍光剤です プロトコールは 90 分間のステップのみで 固定や洗浄 脱色の操作が不要です 時間は90 分 固定 洗浄 脱色操作不要 MSコンパチブル ナノグラムレベルの感度と低バックグランド Oriole 蛍光ゲルステインによる2Dゲルの大腸菌抽出タンパク質 (40μg) を11cm ReadyStripゲル (ph5-8) で分離後 8-16% グラジェントゲルで2 次元目の展開を行った 幅広いダイナミックレンジ (3オーダー) UV 励起が可能なイメージ解析装置 トランスイルミネーターで検出が可能です ( レーザー励起イメージ解析装置では検出できません ) Flamingoゲルステイン E. coli protein sample (10μg). RUBYゲルステイン E. coli protein sample (10μg). 50ml 90 分 ( 最大 ) Flamingo ゲルステイン Flaimingoゲルステインはゲル中のタンパク質検出用の蛍光剤です 高い検出感度と定量性 操作性を持ち 発現量の低いタンパク質の検出 同定 定量的データの解析を可能にします 検出感度は最高 0.25 0.5ng 蛍光レーザースキャナーでの検出に最適 2ステップのプロトコールで 簡単にすることができます 長時間しても 過されません 3オーダーの幅広いダイナミックレンジで 高い定量性が得られます 固定 * 検出 40% エタノール 10% 酢酸 2 時間 1 回 精製水で10 倍希釈 50ml 3 時間 1 回 レーザースキャナーまたはUV 付 CCDカメラで検出 Ex. peak=271/512nm Em. peak=535nm * 後 0.1%(w/v) Tween20 200ml で 10 分間脱色することで バックグラウンドを抑えることができます 後 質量分析のアプリケーションに使用可能 ランニングコストを抑えることができます 240 電気泳動とブロッティング www.bio-rad.com
RUBY ゲルステイン RUBYゲルステインはゲル中のタンパク質検出用の蛍光試薬です 高い操作性と高い定量性と併せ持っており 最高検出感度は銀と同等の1 10ngです 検出感度は最高 1 10ng Ready-To-Use そのままお使いいだだけます 長時間しても 過されません 3オーダーの幅広いダイナミックレンジで 高い定量性が得られます 後 質量分析のアプリケーションに使用可能 糖タンパク質 リポタンパク質なども検出可能 DNA RNAとは反応しません 固定洗浄停止 10% メタノール 7% 酢酸 30 分 1 回事前調製不要 50ml 3 時間 1 回 10% メタノール 7% 酢酸 30-60 分 1 回各種画像解析装置で検出可能 Ex. peak=300/480nm Em. peak=618nm カタログ番号品名容量価格保存 Oriole 蛍光ゲルステイン 161-0495 Oriole 蛍光ゲルステイン 200ml(1 ) 200ml 5,000 室温 161-0496 Oriole 蛍光ゲルステイン 1L(1 ) 1L 20,000 室温 161-0497 Oriole 蛍光ゲルステイン 5L キット 5L 80,000 室温 Flamingoゲルステイン 161-0490 10 Flamingoゲルステイン 20ml 200ml 7,000 4 161-0491 10 Flamingoゲルステイン 100ml 1L 23,000 4 161-0492 10 Flamingoゲルステイン 500ml 5L 99,000 4 RUBY GELステイン 170-3126 RUBY GELステイン 200ml 200ml 19,000 室温 170-3125 RUBY GELステイン 1L 1L 59,000 室温 170-3138 RUBY GELステイン 5Lキューブ 5L 240,000 室温 www.bio-rad.com 電気泳動とブロッティング 241
ネガティブ Zinc ステイン & デステインキット Zincステイン & デステインキットはFernandez-Patonらの方法に基づいた 用のネガティブキットです バックグラウンドは白色に染まりますが バンド部分は染まりません 短時間でCBB 以上の検出が可能です 脱色も簡単で ブロッティングやシークエンスを行う場合にお勧めします Zincステインによる ( 黒い紙の上で撮影しています ) バンドは染まらずバックが白色に染まります は2ステップ 10 分でバンドが確認できます 検出感度は1バンドあたり最高 6 12ng ゲル切り出しに最適 イミダゾール処理 事前に精製水にて10 倍希釈 50ml 10 分 1 回 15 分の脱色後 ブロッティングや溶出が可能 事前に精製水にて 10 倍希釈 50ml 30 60 秒 1 回 CBB より高感度 100 200ml 3 分 2 回 1キットでミニゲル25 枚のが可能です 脱色 事前に精製水にて 10 倍希釈 5 分 2 3 回 カッパーステイン & デステインキット カッパーステイン & デステインキットはLeeらの方法に基づいた 用のネガティブキットです バックグラウンドは青銅色に染まりますが バンド部分は染まらずに透明のまま残ります 簡単に脱色可能ですので ブロッティング前のバンドの確認やシークエンス等のためにバンドの切り出しを行う場合にお勧めします ( ミニプロティアンTGX Criterion TGX/XTゲルには対応していません ) カッパーステインによる ( 黒い紙の上で撮影しています ) バンドは染まらずバックが透明感のある青銅色に染まります は1ステップ 5 分でバンドが確認できます 100 200ml 15 秒 5 分 1 回 検出感度は1バンドあたり最高 6 12ng 事前に精製水にて 10 倍希釈 50ml 5 分 1 回 ゲル切り出しに最適 100 200ml 3 分 2 回 15 分の脱色後 ブロッティングや溶出が可能 CBB より高感度 脱色 事前に精製水にて 10 倍希釈 100ml 5 分 2 3 回 1キットでミニゲル25 枚のが可能です カタログ番号 品名 価格 保存 Zincステイン & デステインキット 161-0440 Zincステイン & デステインキット 22,000 室温 構成内容 :10 Zincステイン溶液 A 125ml 10 Zinc ステイン溶液 B 125ml 10 Zincデステイン溶液 125ml 161-0441 10 Zincステイン溶液 A 125ml 8,500 室温 161-0442 10 Zincステイン溶液 B 125ml 10,000 室温 161-0734 プレミックスバッファー 10 トリス / グリシン 1L(10 Zincデステイン溶液として使用 ) 7,500 室温 カッパーステイン & デステインキット 161-0470 カッパーステイン & デステインキット 23,000 室温 構成内容 :10 カッパーステイン溶液 125ml 10 カッパーデステイン溶液 125ml 161-0471 10 カッパーステイン溶液 125ml 18,000 室温 161-0734 プレミックスバッファー 10 トリス / グリシン 1L(10 カッパーデステイン溶液として使用 ) 7,500 室温 242 電気泳動とブロッティング www.bio-rad.com
核酸剤 核酸剤 エチジウムブロマイド溶液 DNAやRNAの検出に広く使用されているエチジウムブロマイドの剤です すぐにお使いいただける溶液タイプです 濃度 10mg/mlの溶液 10ml 入り DNA stained with ethidium bromide. カタログ番号 品名 価格 保存 161-0433 エチジウムブロマイド溶液 10mg/ml, 10ml 8,000 室温 www.bio-rad.com 電気泳動とブロッティング 243