第 4 回ひびき臨床微生物シンポジュウム June 24,27, 港ハウス 感受性検査を読む ( 同定検査結果確認やスクリーニング検査と捉えて ) ( 株 ) キューリン小林とも子
キューリン微生物検査課 塗抹鏡検グラム染色 分離培養検査血液 BTB, エッグーヨーク 報告書作成結果承認 同定検査 VITEK TSI,LIM クリスタル NF 薬剤感受性検査 MIC2 ディスク法
薬剤感受性結果 ( グラム陽性球菌 ) 菌名 Streptococcus sp. Streptococcus sp. (S. pneumoniae 以外 ) Enterococcus sp. E. faecalis 感受性検査でチェックする薬剤 アミノグリコシド系薬剤が感受性であれば 再同定 PCG に耐性を示せば純培養後 再測定感受性結果承認 VCM や TEIC に耐性を示せば 純培養後 再測定感受性結果承認 ABPC,IPM に耐性を示せば 純培養後 再測定直ちに村谷先生に連絡
E. coli K. pneumoniae E. cloacae C. freundii K. oxytoca S. marcescens E. aerogenes C. koseri P. vulgaris P. mirabilis P. rettgeri M. morganii H. alvei * 広域スペクトル 染色体上の βlactamase Class A * * * Class C 第三 四世代セファロスポリンおよび第三世代セファマイシンは 誘導型 Class Cβlactamase を有する菌種に対しても高い感受性率を有しているが ESBL を獲得することにより セファロスポリンは耐性となる Class Cβlactamase の産生量が多い場合には 第三世代セファロスポリン セファマイシンとも耐性となるが 第四世代セファロスポリンは比較的安定である
薬剤感受性感受性の結果より P. mirabilis 薬剤感受性試験で R 薬剤感受性試験で S 結果承認 インドールスウォーミング 2 つとも陽性 菌名変更 どちらか一方が陽性 再同定 再測定 2 つとも陰性 再同定 再測定
薬剤感受性結果 ( グラム陰性桿菌 ) 菌名 K. pneumoniae K. oxytoca F. odoratum S. maltophilia P. aeruginosa 嫌気性性菌 感受性検査で確認する薬剤 ABPC 第 2 世代セファロスポリンが >2μg/ml ABPCが感受性を示す MINOが耐性を示す MINOが耐性 カルバペネム系薬感受性 MINOが感受性を示すアミノ系グリコシド系薬剤が感受性である 以上のときは再同定を実施する
染色体上に誘導型の ClassCβlactamase を有している菌種の薬剤感受性検査での確認 菌名 C. freundii E. aerogenes E. cloacae S. marcescens M. morganii P. rettgeri 感受性検査で耐性となる薬剤 CEZ,CTMは >16μg/ml FMOX CEZ,CTM>16μg/ml FMOX CEZ,CTM>16μg/ml FMOX CEZ,CTM>16μg/ml FMOX CEZ,CTM>16μg/mlFMOX CEZ,CTM>16μg/ml FMOX 以上の結果を示しても結果承認
薬剤感受性検査からスクリーニングへ
使用した菌株の ESBL 型別株数 PCR Screening C2 C U2 U2&C2 U2&C SHV TEM Not Determine IMP1 NonESBL TEM: 11 Screening TEM TEM No. of strains 56 45 58 289 12 1 2 2 15 78 128 25 15 Cephalosporin と CVA との相乗作用あり C2: CTXM2 C: CTXM, 12, 15 U2: UOE2 SHV: SHV12 TEM: TEM6 Cephalosporin と CVA との相乗作用なし
スクリーニング薬剤による感度と特異度 (E. coli) CPDX >2 CPDX >8 CTX >2 >2 CTX >2 or >2 CPR >2 >2 or CPR >2 AZT >2 CTRX >2 CFPM >2 CTX >8 or >2 Sensitivity 99.8 98.7 96. 51.4 98.2 92.1 97.4 89.9 96. 85. 95.8 (%) ESBL Specificity 84.9 1 85.7 6 92.8 18 84.2 221 9.7 8 98.4 6 9.6 12 89.9 46 95.4 17 98.5 67 9.6 19 non* 78 72 1 41 4 6 4 46 18 5 42 non** IMP 1 1 ESBL 455, *Screening/nonESBL 78, **Screening/nonESBL 128, IMP
各種薬剤による ESBL 検出感度と特異度 (E. coli) CPDX >2 CFDN >2 CFIX >2 CFTM >2 CDTR >2 CFPN >2 CTM >2 CZOP >2 CCL >8 PIPC >8 PIPC>16 (%) ESBL Sensitivity 99.8 97.8 9.8 98.7 98.5 94.9 98.2 94.7 98.9 99.6 99.1 Specificity 84.9 84.9 84.1 89.4 87.5 86.1 91. 97.7 84.4 8. 86.4 1 1 28 6 7 2 8 24 5 2 4 non 78 76 77 5 61 67 41 7 76 65 45 non* 1 4 25 2 IMP ESBL 455, IMP, nonesbl 21
ESBL を検出するためには 望ましいスクリーニング薬剤 CPDX >2μg/ml (99.8%) CPDX >8μg/ml (98.7%) >2 または CTX >2μg/ml (98.2%) >2 または CPR >2μg/ml (97.4%) >2 または CTX >8μg/ml の感度は 95.8% CPDX の MIC がルチンで測定されていない場合 PIPC > 16μg/ml (99.1%) CCL > 8μg/ml (98.9%) CTM >2μg/ml (98.2%) CFTM >2μg/ml (98.7%) CDTR>2μg/ml (98.5%) CFDN>2μg/ml (97.8%)
E. coli, K. pneumoniae, P. mirabilis ESBL スクリーニング CTX/CVA CTX AZT CPDX CFDN CTRX FMOX CTM CMZ /CVA CZOP 128μg/ml FMOX CPDX 128μg/ml CPR CDTR CMZ CFPN CFIX CLSI 法 経口剤
ESBL 産生株のスクリーニング法 染色体上に誘導型 Class Cβlactamase を有していない菌種または 誘導されにくい菌種染色体上に広域 Class Aβlactamase を有していない菌種 E. coli, K. pneumoniae, P. mirabilis スクリーニング ( キューリンで実施 ) CPDX > 2 or 8 μg/ml, > 2 μg/ml, CTX > 2 μg/ml, CTRX > 2 μg/ml, AZT > 2 μg/ml, CCL > 8μg/ml, CTM >2μg/ml, CFDN>2μg/ml,CDTR>2μg/ml, CFTM >2μg/ml
ルチンの感受性測定 ( スクリーニング ) 微量液体希釈法 ( 栄研化学 ) ABPC PIPC CTM CPDX FMOX CPR IPM AMK GM MINO LVFX MIC (µg/ml ) >16 16 128 >16 >16 >16 16 >16 1 4 <.5 2 8 2 >16 8.5 黄色の薬剤 >2μg/ml で ESBL 確認試験 >4μg/ml で Class B および C 確認試験を追加 CTX/CVA /CVA CPR CPR で Class CESBL 確認可 AZT で Metalloβlactamase 推定可 CTX CPR/CVA AZT
E. coli K. pneumoniae E. cloacae C. freundii K. oxytoca S. marcescens E. aerogenes C. koseri P. vulgaris P. mirabilis P. rettgeri M. morganii H. alvei * 広域スペクトル 染色体上の βlactamase Class A * * * Class C 第三 四世代セファロスポリンおよび第三世代セファマイシンは 誘導型 Class Cβlactamase を有する菌種に対しても高い感受性率を有しているが ESBL を獲得することにより セファロスポリンは耐性となる Class Cβlactamase の産生量が多い場合には 第三世代セファロスポリン セファマイシンとも耐性となるが 第四世代セファロスポリンは比較的安定である
グラム陰性桿菌 菌名 C. freundii E. aerogenes E. cloacae S. marcescens M. morganii P. rettgeri 感受性検査で耐性となる薬剤 CEZ,CTMは >16μg/mlでFMOX>16μg/ml CEZ,CTM>16μg/mlでFMOX>16μg/ml CEZ,CTM>16μg/mlでFMOX>16μg/ml CEZ,CTM>16μg/mlでFMOX>16μg/ml CEZ,CTM>16μg/mlでFMOX>16μg/ml CEZ,CTM>16μg/mlでFMOX>16μg/ml 第 4 世代セファロスポリンは感受性を示す場合が多いが CPR が >8μg/ml であれば ESBL 確認試験を実施
CPR CVA CPR Enterobacter cloacae CTX CVA CTX CPDX CVA CPDX CVA Rel82 Rel944 Rel944 では CPR で明瞭に確認可 CVA CPDX CVA CPR CVA ESBL Rel82 2 2 2 2 1.6 Rel172 MIC (μg/ml) Rel944 128 128 >256 >256 8 1 SHV CTXM14 Rel172 64 64 >256 >256 4 4 non UOEH urology
Metalloβlactamase のスクリーニング E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, Providencia rettgeri, >16μg/ml Cephamycin の MIC が高い Pseudomonas Acinetobacter, Serratia marcescens など > 16μg/ml UOEH urology
IMP1 産生 Acinetobacter baumanii Rab294 CTX CVA CVA CTX あたかも CVA の添加により β lactamase が阻害され CTX および の阻止円が出現したように見える CVA に抗菌力があるため 阻止円が出現しているのである ESBL ではない CTX CVA TAZ SBT MIC >256 >256 8 4 4 βlactamase 阻害剤は Metalloβlactamase に安定であるため 抗菌力を有する CVA MPA IPM UOEH urology
御静聴ありがとうございました