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1 ORYZA OIL & FAT CHEMICAL CO., LTD. カカオエキス COCOA EXTRACT ダイエット 抗酸化素材 カカオエキス -P ( 粉末 食品用途 ) カカオエキス -WSP ( 水溶性粉末 食品用途 ) カカオエキス -PC ( 粉末 化粧品用途 ) カカオエキス -LC ( 液体 化粧品用途 ) ver. 2.2 HS

2 ダイエット食品素材 カカオエキス COCOA EXTRACT 1. はじめに カカオ (Theobroma cacao) の歴史は紀元前 4 年に遡り, 紀元前 2 年頃から古代メキシコを中心に栽培が始まったとされています 学名の一部である Theobroma( テオブロマ ) とはギリシャ語で 神様の食べ物 という意味で, 古代メキシコでは, 不老長寿の薬として王侯貴族の間で珍重されていました 当時は, カカオをすり潰しただけのものを食していましたが, これがスペインを経てヨーロッパ全土に広がり, 現在のように世界中の人々に親しまれているチョコレートやココアに変化をとげました カカオは赤道の南北緯 2 度以内, 年間平均気温 27 以上の高温 多湿な地方で栽培される熱帯植物で, 他の木と異なり幹に花が咲き果実 ( カカオポッド ) となります カカオポッドは 2cm ほどのラグビーボールのような形をしており, この中には白いパルプ質の果肉に包まれたカカオ豆 ( 種子 ) が 3~4 粒入っています ( 図 1) オリザ油化では, カカオ種子の抽出液を独自の製法で加工し, テオブロミンの含有量を 1%, ポリフェノールの含有量を 2% にまで高めることに成功しました そして, これらの含有成分についてダイエット機能を調べたところ, テオブロミンに脂肪蓄積抑制作用が, ポリフェノールに脂肪燃焼作用がそれぞれ確認されました またカカオエキスには, 脳内物質であるフェニルエチルアミン (PEA) が含まれていることを確認しています PEA は神経回路を経て, 快楽物質であるドーパミンの放出を促し, 活力の源となると同時に, 恋愛をした時のような幸福感をもたらします さらに 精神安定作用や血圧上昇抑制作用を有する γ- アミノ絡酸 ( ギャバ ) も含まれていることが明らかになりました テオブロミンとポリフェノール, 異なる作用機序を併せ持った W パワーのダイエット効果に, PEA の幸福感をもたらす作用, ギャバのリラックス効果をプラスした素材として, ダイエット, 美容食品への配合をおすすめします 図 1. カカオ果実とその断面図 1

3 2. カカオの機能性機能性およびおよび含有成分 国内には, 日本チョコレート ココア協会があり, 定期的にカカオやココアの 機能性に関する研究成果が報告されています 近年の報告では, 抗うつ作用, 冷え症改善作用, 歯周病予防作用, 動脈硬化予防ならびにヘリコバクタ ピロ リ菌に対する感染予防効果などがあり, これらの多くは, カカオに含まれるポ リフェノールの作用であると考えられています 当社においても, カカオハス クに含有されるポリフェ O CH ノールの単離精製を行い, 3 H N O CH N 3 これまでに図 2のポリフ H 3 C N N ェノール成分を単離同定 O N N O N N しています CH 3 CH 3 一方, カカオの主成分は, メチルキサンチン誘導体のテオブロミンです HO Theobromine COOH Caffeine OH テオブロミンは, 2 OH HO 時間以内に最大血中濃度 HO O Protocatechuic acid に達し, カフェインと同 OH OH 様アデノシンレセプター OH OH OH に作用します また, ホ OH HO HO O スフォジエステラーゼ阻 O 害にもとづくサイクリッ R 1 OH ク AMP の上昇を惹起し, R 2 OH OH その結果, 一般的な薬理 (+)-Catechin R 1 =OH, R 2 =H Procyanidin B-2 作用として知られる心拍 (-)-Epicatechin R 1 =H, R 2 =OH 数の増加, 血管拡張 ( 脳ポリフェノール 血管では収縮 ), 気管支拡 図 2. カカオエキスの含有成分 張および利尿作用を誘発します 一方, 同じメチルキサンチンであるカフェイ ンにみられる中枢興奮作用は, テオブロミンにはほとんどみられません むし ろ, 近年伝えられているココアの精神安定化作用にテオブロミンが一部関与し ているものと考えられています 1) 2, 3) さらに, テオブロミンには脂肪分解作用 があり, カフェインと同様に体 脂肪の分解作用が期待できます 1) Smit H. J., Gaffan E. A., Rogers P. J. Methylxanthines are the psycho-pharmacologically active constituents of chocolate. Psychopharmacol. 176, (24). 2) Fredholm B. B., Lindgren E. The effect of alkylxanthines and other phosphodiesterase inhibitors on adenosine-receptor mediated decrease in lipolysis and cyclic AMP accumulation in rat fat cells. Acta. Pharmacol. Toxicol. 54, (1984). 3) Hayashi S., Sakaguchi T. Studies on 3,7-dimethyl-1-(5-oxo-hexyl)-xanthine (BL 191). II. Effect of BL 191 on lipolysis in rat epididymal adipose tissue. Chem. Pharm. Bull. (Tokyo) 23, (1975). 2

4 3. カカオエキスのダイエットダイエット機能 (1) 体重増加抑制作用 カカオエキスから調製したテオブロミン分画 ( テオブロミン 32.%, ポリフェノール 12.1%), およびポリフェノール分画 ( テオブロミン 5.3%, ポリフェノール 53.6%) について, マウスの体重や体脂肪に及ぼす影響を調べました その結果, テオブロミン分画 (1%) に体重増加抑制作用が認められましたが, ポリフェノール分画には抑制作用が認められませんでした ( 図 3, 表 1) これに対 体重変化 (g) Control テオブロミン分画 1%+ ポリフェノール分画 1% 経過日数 ( 日 ) 体重変化 (g) Control テオブロミン分画.5% テオブロミン分画 1.% 経過日数 ( 日 ) 体重変化 (g) Control ポリフェノール分画.5% ポリフェノール分画 1.% 経過日数 ( 日 ) 図 3. カカオエキス分画のマウスの体重に及ぼす作用 (n=6) 3

5 し, 両者を 1% ずつ配合したグループでは, テオブロミン分画単独の場合と比較して明らかな体重増加抑制作用の増強が認められました この結果より, カカオハスクに含有されるポリフェノールには, テオブロミンの体重増加抑制作用を補助する働きがあるものと考えられます 表 1. カカオエキス分画のマウスの体重及び摂餌量に及ぼす作用 配合量 (%) 開始時体重 (g) 終了時体重 (g) 体重増加 (g) 摂餌量 (g) Control - 3.7± ±.9 5.1± テオブロミン分画.5 3.6± ±.8 4.9± ± ±.7 4.2± ポリフェノール分画.5 3.1±.4 35.±.9 4.9± ± ±.8 5.2± Control 29.1±.4 35.±.9 5.9± テオブロミン分画 + ポリフェノール分画平均値 ±S.E., n= ± ±.4 3.9± 実験方法 マウス (ddy, 雄, 5 週齡, 日本クレア社 ) を 4 日間予備飼育した後, 粉末飼料 (MF, オリエンタル酵母社 ) に混餌した各サンプルを 12~13 日間自由摂取させた 飼育期間中, 体重および摂餌量を経時的に測定した さらに, カカオエキス分画をマウスに 12 日間自由摂取させ, これに運動負荷を併用した際の体重増加に及ぼす作用を検討しました その結果, 図 4 に示すように, テオブロミン分画 (1%) 摂取と運動を併用した群に, 顕著な体重増加抑制がみられました 一方, ポリフェノール分画においても, 中盤以降緩和な体重増加抑制作用がみられました 運動負荷 (5 回転 /min,1min) 運動負荷 (5 回転 /min,1min)+ テオブロミン分画 1% 体重変化 (g) 運動負荷 (5 回転 /min,1min)+ ポリフェノール分画 1% 経過日数 ( 日 ) 図 4. カカオエキス分画の運動負荷マウスの体重に及ぼす作用 (n=6) 4

6 実験方法 マウス (ddy, 雄,5 週齢 ) に, カカオエキス分画 (1%) を混餌した飼料 (MF, オリエンタル酵母 ) を 12 日間自由摂取させた 運動負荷は, 回転ケージ (MK-77M, 室町機械 ) を用いて,1 分間の運動 (5 rpm/ 分 ) を 1 日 1 回行っ た (2) 脂肪蓄積阻害作用 カカオエキスから調製したテオブロミン分画 ( テオブロミン 32.%, ポリフェノール 12.1%), およびポリフェノール分画 ( テオブロミン 5.3%, ポリフェノール 53.6%) について, 分化誘導後の 3T3-L1 脂肪細胞における脂肪蓄積におよぼす影響を検討しました 脂肪蓄積の指標には, 細胞内のトリグリセリド含量およびグルコースがトリグリセリドに変換される際に働く律速酵素 グリセロール 3- リン酸デヒドロゲナーゼ (GPDH) 活性を測定しました その結果, テオブロミン分画を添加した細胞では, その形態にほとんど変化がみられませんでしたが, 濃度依存的なトリグリセリドの蓄積抑制作用が認められました ( 表 2, 図 5) このことより テオブロミン単独での評価も行ったところ, 有意差は認められませんでしたが, 濃度依存的なトリグリセリド蓄積抑制傾向がみられました 一方, ポリフェノール分画においては, トリグリセリド含量,GPDH 活性ともに変化が認められませんでした この結果より, カカオエキスの脂肪蓄積抑制成分は, テオブロミンであると考えられます Control テオブロミン分画 (1 µg/ ml) 図 5. テオブロミン分画共存下における分化誘導後の 3T3-L1 細胞写真 5

7 表 2. カカオエキス分画の 3T3-L1 脂肪細胞における脂肪蓄積および分化におよ ぼす作用 濃度 (μg/ml) トリグリセリド (μg/well) GPDH 活性 (Unit/well) Control 18±9.121±.11 テオブロミン分画 1 16±9.1± ±9.156± ±9.125± ±9.12± ±9*.117±.16 Control テオブロミン単独 ±14 161±6 146±13 144±17 146±18 未評価 Control - 116±9.118±.9 ポリフェノール分画 1 136±9.121± ±9.92± ±9.63± ±9.152± ±9.11±.33 平均値 ±S.E., n=4, *: p<.5 方法 3T3-L1 脂肪細胞 (5 1 4 cells/ml) を 24 穴プレートに播種 (5 μl) し, 1% 牛胎児血清を含む DMEM 培地 ( 高グルコース ) で 1 日培養後, インスリン (1 μg/ml), デキサメタゾン (.25 μm) およびイソブチルメチルキサンチン (.5 mm) を含む培地に交換して分化を誘導した 2 日後に, サンプルおよびインスリン (1 μg/ml) を含む培地に交換し,1 日おきに培地交換をしながら, 計 6 日間培養した 培養終了後, 細胞中のトリグリセリド濃度および GPDH 活性をそれぞれトリグリセリド E- テストワコー ( 和光純薬 ) および GPDH 活性測定キット ( プライマリーセル社 ) を用いて測定した 6

8 (3) 脂肪燃焼促進作用 脂肪蓄積の実験に用いたものと同じカカオエキス分画について, 分化誘導後のラット褐色脂肪細胞における脂肪蓄積と, 脂肪燃焼の指標になるチトクローム C オキシダーゼ活性に及ぼす作用を検討しました チトクローム C オキシダーゼは, ミトコンドリアの内膜に存在し, 電子伝達系においてコエンザイム Q1 とともに, エネルギー産生 ( 糖代謝, 脂肪燃焼 ) の最終段階, 言い換えれば細胞の呼吸に働く酵素です ( 図 6) 各種栄養素 ( 糖, 脂肪, タンパク質 ) は, 最終的に水と二酸化炭素に変わって消費されるわけですが, チトクローム C オキシダーゼは, クエン酸回路で生じた電子を使って, いわば栄養素を水に変換させる ( 栄養素代謝の最終段階 ) 酵素です 実験の結果, 次ページ図 7 に示すように, テオブロミン分画は, チトクローム C オキシダーゼ活性に影響を与えなかったのに対し, トリグリセリドの蓄積に対しては濃度依存的な抑制を示しました テオブロミン単独処理においても同様の活性が認められました 一方, ポリフェノール分画は, トリグリセリド含量には変化を与えませんでしたが, チトクローム C オキシダーゼ活性を上昇させることが明らかになりました この結果より, 褐色脂肪細胞において, テオブロミンは脂肪蓄積抑制を, ポリフェノールは脂肪燃焼を促進させることが判明しました 図 6. 電子伝達系におけるチトクローム C オキシダーゼの働きミトコンドリアの内膜には, 電子伝達系を司る 3 種の酵素 (NADH-Q オキシダーゼ, チトクローム C レダクターゼおよびチトクローム C オキシダーゼ ) が存在する 糖代謝のクエン酸回路や脂肪代謝の β- 酸化で生じた電子は, これら酵素の酸化還元を利用した受け渡しを経た後, 最終的に酸素を消費して水を作り出す 言い換えれば, チトクローム C オキシダーゼは, クエン酸回路や β- 酸化で生じたエネルギーを使って呼吸をし, 水と二酸化炭素としてエネルギーを消費している 方法 タカラバイオのラット褐色脂肪細胞培養キットを用いた 褐色脂肪細胞 (19 代目,4 1 4 cells/ml) を 24 穴プレートに播種 (5 μl) し,4 日間培養した 9% コンフルエンスの後, 分化を誘導し,2 日後に, サンプルを含む維持培地に交換し, さらに 6 日間培養した 培養終了後, 細胞中のトリグリセリド濃度およびチトクローム C オキシダーゼ活性 ( シグマ社キットを使用 ) を測定した 7

9 テオブロミン分画 テオブロミン分画 トリグリセリド (μg/well) テオブロミン分画テオブロミン単独 濃度 (μg/ml) チトクロム C オキシダーゼ活性 (Unit/mL) 濃度 (μg/ml) ポリフェノール分画 ポリフェノール分画 トリグリセリド (μg/well) 濃度 (μg/ml) チトクロム C オキシダーゼ活性 (Unit/mL) 濃度 (μg/ml) 図 7. カカオエキス分画の褐色脂肪細胞におけるトリグリセリド蓄積およびチトクローム C オキシダーゼ活性に及ぼす作用 ( 平均値 ±S.E., n=4) 以上の結果をまとめると, カカオエキスは, 弊社先行ダイエット素材である 生コーヒー豆エキス が弱い作用しか示さなかった脂肪細胞への脂肪蓄積を, 抑制する機能があることが分かりました この作用には, テオブロミンの関与が高いものと考えられます 一方, カカオエキスのポリフェノール成分は, 既存のダイエット素材がもたない脂肪燃焼促進機序を有し, 他の脂肪燃焼促進素材と組み合わせることで, 相乗的ダイエット機能が期待できます ( 図 8) 図 8. カカオエキスと他のダイエット素材のミトコンドリアでの作用点 8

10 (4) 脂肪吸収抑制作用 これまでの結果から, カカオエキスには脂肪細胞に対する脂肪蓄積抑制効果がみられ, テオブロミンやポリフェノールの関与が考えられました カカオエキス中にはカフェインも 5% 程度含まれており, すでに脂肪吸収抑制作用が確認されています そこで, マウスにオリーブ油を単回投与し, カカオエキスの脂肪吸収に及ぼす作用を調べた結果, カカオエキス ( テオブロミン 13.8%, ポリフェノール 23%, カフェイン 5%) をオリーブ油投与前に経口投与することにより, コントロールと比較して血中トリグリセリドの上昇抑制作用が認められました ( 図 9) また, カフェインをカカオエキス中の含有量に応じて経口投与し, 同様の評価を行ったところ, カフェインに強い血中トリグリセリド上昇抑制作用が認められました これらの結果より, カフェインは カカオエキスの脂肪吸収抑制作用の関与成分の一つであることが示唆されました A) B) A) カカオエキス B) カフェイン 血中トリグリセリド (Δmg/dL) コントロールカカオエキス 2 mg/kg カカオエキス 4 mg/kg オリーブ油負荷後の経過時間 (hr) 血中トリグリセリド ( mg/dl) コントロールカフェイン 1mg/kg カフェイン 2mg/kg * * オリーブ油負荷後の経過時間 (hr) 図 9. カカオエキスおよびカフェインのオリーブ油負荷マウスにおける血中トリグリセリド上昇に及ぼす作用 ( 平均値 ±S.E., *:P<.5) 実験方法 絶食 (2 時間 ) したマウス (ddy, 雄,6 週齢 ) から採血を行い,3 分後にカカオエキスまたはカフェインの 5w/v% アラビアガム懸濁液 (1 ml/kg) を経口投与した 1 時間後にオリーブ油 (5 ml/kg) を経口投与し, その後 2,4 および 6 時間目において採血を行った 得られた血液より血清を分離し, 血中のトリグリセリド濃度をトリグリセライド E- テストワコー ( 和光純薬 ) を用いて測定した 9

11 (5) 健常人男性を対象対象としたとした継続摂取試験 カカオエキスのヒトにおけるダイエット機能を評価するため, 弊社男性健常人を対象 (16 名,24~6 才 ) として, カカオエキス ( テオブロミン 21.2%, ポリフェノール 3.7%)1 mg を 4 週間自由摂取してもらい, 後に肥満指標と血液成分の測定を行いました その結果, 体重, 体脂肪率,BMI, 脂肪量, 肥満度, ウエストおよびヒップサイズに, と比較して減少傾向がみられました また, 体重, 肥満度については P<.1,BMI については P<.5 と有意な減少がみられました 一方, 血液成分については, 有意差は認められないものの, 血糖値およびトリグリセリド (TG) が減少傾向にありました 以上の結果より, カカオエキス 4 週間の摂取により, 緩やかな肥満指標の改善が観察されました この効果はカカオエキスの脂肪蓄積抑制作用および脂肪燃焼促進作用によるものと示唆されます 表 3. カカオエキス 4 週間後の検査値比較 体重 (kg) 66.2± ±9.4 p<.1 体脂肪率 (%) 2.± ±5.4 BMI (kg/m 2 ) 22.6± ±2.8 p<.5 インピーダンス (Ω) 481±63 488±65 脂肪量 (kg) 13.6± ±5.1 肥満度 (%) 2.8± ±12.6 p<.1 ウエスト (cm) 78.4± ±8.9 ヒップ (cm) 95.1± ±6.3 ウエスト / ヒップ比.82±.6.81±.5 腹部皮下脂肪厚 (mm) 13.7± ±6.5 クレアチニン (mg/dl).82±.11.8±.1 血糖値 (mg/dl) 82.8± ±15.5 トリグリセリド (mg/dl) 161.8± ±112.8 リン脂質 (mg/dl) 227.1± ±26.2 総コレステロール (mg/dl) 22.3± ±21.6 レプチン (ng/ml) 3.16± ±2.2 HDL-Cho (mg/dl) 58.6± ±14.3 各値は 16 名の平均値と標準偏差で示した 1

12 9 体重 3 体脂肪率 3 BMI (kg) 7 (%) 2 (kg/m 2 ) インピーダンス 25 脂肪量 3 肥満度 1 ウエスト (Ω) 5 (kg) (%) (cm) ヒップ 1. ウエスト / ヒップ比 3. 腹部皮下脂肪厚 (cm).8 (mm) (cm) 平均 図 1. カカオエキスの 4 週間後の肥満指標検査値比較 11

13 1.2 クレアチニン 12 血糖値 6 トリグリセリド (mg/dl).9.8 (mg/dl) (mg/dl) (mg/dl) リン脂質 (mg/dl) 総コレステロール (mg/dl) HDL- コレステロール レプチン 1 8 (ng/ml) 平均 図 11. カカオエキスの 4 週間後の血液検査値比較 12

14 4. カカオエキスの抗酸化活性 ヒトの生体内では, ストレスなどの刺激により活性酸素が発生します この活性酸素は酸化傷害を引き起こし, 細胞等を損傷し, 種々の生活習慣病や老化促進と密接に関係しています そこで, カカオエキスの抗酸化作用を, スーパーオキサイドジスムターゼ (SOD) 様活性および 1,1- ジフェニル 2- ピクリルヒドラジル (DPPH) ラジカル消去能を指標に評価しました その結果, カカオエキスは図 12 に示す濃度において, 濃度依存的に SOD 様活性および DPPH ラジカル消去能を示しました 1SOD 様活性 1 SOD 様活性 (%) 反応終濃度 (ppm) 2DPPH ラジカル消去能 1 DPPH 捕捉活性 (%) 反応終濃度 (ppm) 図 12. カカオエキスの抗酸化活性 13

15 5. カカオエキスの安定性 (1) 熱安定性 カカオエキス ( 賦形剤無添加品 ) の熱安定性を検討した結果, テオブロミンおよびポリフェノール含量は,1 及び 12,1 時間の加熱によっても変化がみられず, 通常の食品加工温度に対して安定であることが分かりました 熱安定性 含量 %( 初期値を 1% とした ) スタート テオブロミン 12 テオブロミン 1 ポリフェノール 12 ポリフェノール 1 1 時間後 図 13. カカオエキスの熱安定性 (2) ph 安定性 カカオエキス ( 賦形剤無添加品 ) を.5% 濃度になるように 3% エタノールに溶解させ,pH 調整し, 非遮光下, 室温で 1 日および 1 週間保存後, テオブロミンおよびポリフェノール含量を測定しました カカオエキス中のテオブロミンは, 酸性からアルカリ性まで幅広い ph 域で安定であることが分かりました ポリフェノールは酸性では安定であり, アルカリ性で 1 割程度の含量の減少が,1 週間保存後では中性からアルカリ性で 1~2.5 割の含量低下が確認されました ph 安定性 含量 %(ph 無調整初期値を 1% とした ) テオブロミン ポリフェノール 日目 1 週間後 図 14. カカオエキスの ph 安定性 14

16 (3) 液剤安定性 カカオエキス-WSP( 水溶性グレード ) について,.3% 水溶液 (ph3.5) を調製し, 室温 ( 非遮光下 ),25 ( 遮光 ),4 ( 遮光 ),5 ( 遮光 ) で 4 週間保存し, 沈澱, 濁り, 着色の有無を目視で確認しました カカオエキス-WSP の液剤安定性は酸性域において極めて高いことがわかりました 液剤安定性 (.3% 水溶液 ) 室温 ( 光照射 ) 25 ( 遮光 ) 4 ( 遮光 ) 5 ( 遮光 ) 沈殿濁り なしなしなしなし 着色なしなしなしなし 6. カカオエキス ( 賦形剤無添加品 ) の栄養成分 分析項目 結果 注 分析方法 水分 5.5 g/1g 常圧加熱乾燥法 タンパク質 73.8 g/1g 1 ケルダール法 脂質 1.7 g/1g 酸分解法 灰分 2.7 g/1g 直接灰化法 炭水化物 16.3 g/1g 2 エネルギー 376 kcal/1g 3 修正アトウォーター法 食物繊維. g/1 未満 プロスキー法 ナトリウム 23 mg/1g 原子吸光光度法 注 1) 窒素 タンパク質換算係数 :6.25 注 2) 栄養表示基準 ( 平成 15 年厚生省告示第 176 号 ) による 計算式 :1 ( 水分 + タンパク質 + 脂質 + 灰分 ) 注 3) 栄養表示基準 ( 平成 15 年厚生省告示第 176 号 ) による エネルギー換算係数 : タンパク質 4; 脂質 9; 糖質 4; 食物繊維 2 試験依頼先 : 株式会社エスアールエル 試験成績書発行年月日 : 平成 17 年 3 月 24 日 依頼番号 : 第 号 15

17 7. カカオエキスの安全性 (1) 残留農薬 食品衛生法 ( 厚生労働省 ) で残留基準値が定められた農薬について調査しま した 分析項目 結果 検出限界 方法 注 カプタホール 不検出.4 ppm GC-MS 1 クロロタロニル不検出.5 ppm GC-MS 1 ジクロルボス不検出.5 ppm GC-MS 1 デルタメトリン不検出.5 ppm GC-MS 1 ビオレスメトリン不検出.1 ppm GC-MS 1 ピレトリン不検出 1. ppm GC-MS 1 フェニトロチオン不検出.1 ppm GC-MS 1 アミトロール不検出.3 ppm LC-MSMS 1 ダミノジッド不検出.1 ppm LC-MSMS 1 2,4,5-T 不検出.1 ppm GC-MS 2 グリホサート不検出.2 ppm LC 2 シヘキサチン不検出.2 ppm GC 2 注 1) 試験依頼先 : 明治製菓株式会社試験成績書発行年月日 : 平成 17 年 4 月 11 日処理番号 : 注 2) 試験依頼先 : 株式会社キューサイ分析研究所試験成績書発行年月日 : 平成 17 年 3 月 31 日受付番号 : (2) 急性毒性 (LD LD 5 ) 体重 3 g 前後,5 週齢の ICR 系雄性マウスにカカオエキス 2 mg/kg の用量で経口投与し, 温度 23±2, 湿度 5±1%, 餌, 水自由摂取の条件下で 14 日間飼育しました その結果, 死亡例や体重推移の異常 ( 対照群との比較 ) は認められず, 試験終了後に行った剖検においても, 臓器の肉眼的異常は認められませんでした したがって, カカオエキスのマウスにおける LD 5 値は,2 mg/kg 以上です 8. カカオエキスの推奨摂取量 一日あたりカカオエキス -P として,1~25 mg の使用をおすすめします 16

18 9. カカオエキスの応用例 食品 利用分野訴求剤系 ダイエット食品美容食品 化粧品痩身用化粧品 1. 包装形態 1) 体重増加抑制 2) 脂肪蓄積抑制 3) 脂肪燃焼促進 4) 体脂肪減少 カカオエキス -P, カカオエキス -WSP( 粉末, 食品用途 ) カカオエキス -PC( 粉末, 化粧品用途 ) 5kg 内装 : アルミ袋外装 : ダンボール包装カカオエキス -LC( 液体, 化粧品用途 ) 5kg 内装 : キュービーテナー外装 : ダンボール包装 11. 保存方法 高温多湿を避け, 暗所に保管して下さい 12. 表示例 < 食品 > カカオエキス -P, カカオエキス -WSP 表示例 : カカオ抽出物カカオエキス < 化粧品 > カカオエキス -PC INCI 名 :Theobroma Cacao (Cocoa) Extract カカオエキス -LC INCI 名 :Butylene Glycol Water Theobroma Cacao (Cocoa) Extract 飲料 ( 清涼飲料水, ドリンク等 ), ハードおよびソフトカプセル, タブレット, キャンディー, チューインガム, グミ, クッキー, チョコレート, ウエハース, ゼリー等 化粧水, ローション, パック, ボディジェル等 17

19 製品規格書製品名 カカオエキス -P 食品 本品は, アオギリ科カカオ (Theobroma cacao LINN) の種子から含水エタノールで抽出して得られた粉末である 本品は定量するとき, テオブロミンを 1. % 以上, ポリフェノールを 2. % 以上含む 性状 茶色 ~ こげ茶色の粉末で, わずかに特有なにおいがある テオブロミン含量 1. % 以上 (HPLC) ポリフェノール含量 2. % 以上 ( 食品機能研究法記載 Folin-Denis 法 ) 乾燥減量 1. % 以下 ( 衛生試験法,1 g,15,2 時間 ) 純度試験 (1) 重金属 3 ppm 以下 ( 食品添加物公定書, 一般試験法, 重金属試験法 ) (2) ヒ素 1 ppm 以下 ( 食品衛生検査指針, ヒ素試験法 ) 一般生菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, 標準寒天培地 ) 真菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, ポテトデキストロース寒天培 地クロラムフェニコール添加 ) 大腸菌群陰性 ( 衛生試験法,BGLB 培地 ) 組成 成分 含有量 カカオ抽出物 1 % 18

20 製品規格書製品名 カカオエキス -WS WSP 食品 本品は, アオギリ科カカオ (Theobroma cacao LINN) の種子から含水エタノールで抽出して得られた粉末である 本品は水溶性である 性状 薄茶の粉末で, わずかに特有なにおいがある テオブロミン含量.1 % 以上 (HPLC) ポリフェノール含量.2 % 以上 ( 食品機能研究法記載 Folin-Denis 法 ) 乾燥減量 1. % 以下 ( 衛生試験法,1 g,15,2 時間 ) 純度試験 (1) 重金属 1 ppm 以下 ( 食品添加物公定書, 一般試験法, 重金属試験法 ) (2) ヒ素 1 ppm 以下 ( 食品衛生検査指針, ヒ素試験法 ) 一般生菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, 標準寒天培地 ) 真菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, ポテトデキストロース寒天培 地クロラムフェニコール添加 ) 大腸菌群陰性 ( 衛生試験法,BGLB 培地 ) 組成 成分 含有量 澱粉分解物 75 % カカオ抽出物 25 % 合計 1 % 19

21 製品規格書製品名 カカオエキス -PC 食品 本品は, アオギリ科カカオ (Theobroma cacao LINN) の種子から含水エタノールで抽出して得られた粉末である 本品は定量するとき, テオブロミンを 1. % 以上, ポリフェノールを 2. % 以上含む 性状 茶色 ~ こげ茶色の粉末で, わずかに特有なにおいがある テオブロミン含量 1. % 以上 (HPLC) ポリフェノール含量 2. % 以上 ( 食品機能研究法記載 Folin-Denis 法 ) 乾燥減量 1. % 以下 (1 g,15,2 時間 ) 純度試験 (1) 重金属 3 ppm 以下 ( 第 2 法 ) (2) ヒ素 1 ppm 以下 ( 第 3 法 ) 一般生菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, 標準寒天培地 ) 真菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, ポテトデキストロース寒天培 地クロラムフェニコール添加 ) 大腸菌群陰性 ( 衛生試験法,BGLB 培地 ) 組成 成分 含有量 カカオ抽出物 1 % この規格及び試験方法において, 別に規定するものの他は, 外原規通則及び一般試験法を準用するものとする 2

22 製品規格書製品名 カカオエキス -LC 化粧品 本品は, アオギリ科カカオ (Theobroma cacao LINN) の種子から含水 1,3- ブチレングリコール (BG) で抽出して得られた溶液である 性状 茶色の液で, わずかに特有なにおいがある 確認試験ポリフェノール類本品.5 ml を,2. ml の水に加え, フォーリンデニス試薬.2 ml と飽和炭酸ナトリウム溶液.4 ml を加えるとき, 液は青色を呈する 純度試験 (1) 重金属 1 ppm 以下 ( 第 2 法 ) (2) ヒ素 1 ppm 以下 ( 第 3 法 ) 一般生菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, 標準寒天培地 ) 真菌数 個 /g 以下 ( 衛生試験法, ポテトデキストロース寒天培地 クロラムフェニコール添加 ) 大腸菌群陰性 ( 衛生試験法,BGLB 培地 ) 組成 成分 含有量 BG 69 % 水 3 % カカオエキス 1 % 合計 1 % この規格及び試験方法において, 別に規定するものの他は, 外原規通則及び一般試験法を準用するものとする 21

23 /MS 品企画から OEM 生産までお気軽気軽に, ご相談相談くださいください オリザ油化は, 健康に役立つ機能性をもつ食品素材の開発をめざしています 多品種の機能性食品素材を生産し, 多くの食品情報を有しております お気軽にお問い合わせください 製造発売元 : オリザ油化株式会社 愛知県一宮市北方町沼田 1 番地 TEL(586) ( 代表 ) FAX(586) URL/ info@oryza.co.jp * 本書の無断複写及び, 流用は, 著作権法上の例外を除き, 禁じられています * 本カタログに記載された内容は, 都合により変更させていただくことがあります * 今回の改訂箇所 カカオエキス -PC グレードの追加 規格書変更 ( ハスク 種子 ) 制定日 25 年 4 月 11 日改定日 27 年 1 月 16 日

24 /MS ORYZA OIL & FAT CHEMICAL CO., LTD.

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