The Molecular Probes Handbook, 11th Edition 3, The Molecular Probes Handbook Flu

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1 Molecular Probes Molecular Probes

2 The Molecular Probes Handbook, 11th Edition 3, The Molecular Probes Handbook Fluorescence SpectraViewer Attune NxT Acoustic Focusing Cytometer Flow cytometry guide and protocols Fluorescence SpectraViewer DailyCalcs science calculator BioProbes Journal and Molecular Probes newsletter BioProbes Journal Molecular Probes Newsletter BioProbes Journal BioProbes JournalMolecular Probes Newsletter Molecular Molecular Probes

3 Molecular Probes Molecular Probes Molecular Probes 4 Molecular Probes Molecular Probes Dynabeads Molecular Probes 1

4 2 Molecular Probes Molecular Probes www. lifetechnologies.com/flow-sample TransFix TransFix FIX2 FIX2 FIX1 TransFix Cal-Lyse TM Whole Blood Lysing Solution Cal-Lyse TM GAS1 GAS1S1 Cal-Lyse TM High-Yield Lyse High-Yield Lyse HYL25 FIX & PERM FIX & PERM Cell Permeabilization Kit GAS3 GAS4Medium AMedium B 2 1 GAS1S1 GAS2S1 A TNF-α Pacific Blue fluorescence B TNF-α Pacific Blue fluorescence IFN γ PE-Cy 7 fluorescence CD4 Fluorescein fluorescence IFN γ PE-Cy 7 fluorescence CD4 Fluorescein fluorescence 1. FIX & PERM Cell Permeabilization Kit C57BL/6 2 A PMA 5 FITC CD4 MCD41 FIX & PERM Cell Permeabilization Kit GAS3 GAS4 PE-Cy 7 IFN- A18713Pacific Blue TM TNF- RM9128 Attune Acoustic Focusing Cytometer / 488 nm 53/3 nm FITC 64 nm PE-Cy 7 Pacific Blue TM 45 nm 45/4 nm (A) IFN- TNF- A PMA (B) TNF- IFN- CD4 + T TNF-α Pacific Blue fluorescence IFN γ PE-Cy 7 fluorescence

5 Dynabeads Dynabeads Dynabeads 2 depletion 3 Dynabeads 4 Dynabeads T B NK 1 2 Dynal MPC 3. Dynabeads 3 mrna/dna : Dynabeads Dynabeads Dynabeads Dynabeads , 1,25 5 1, 1,5 2, CD4 FITC CD4 FITC 4. CD4 + T Dynabeads Untouched TM Human CD4 T Cells Kit 2. Dynabeads Molecular Probes 3

6 4 Molecular Probes Dynabeads 5 Dynabeads T B NK : Dynabeads Dynabeads Dynabeads Dynabeads Dynabeads 計 数計 数 Dynabeads Dynabeads FlowComp FlowComp Mouse TM Mouse CD4 Kit CD4 Kit CD % 78.5% ヨウ化プロピジウム ヨウ化プロピジウム % CD4 + CD CD4 + T CD4 + T Dynabeads FlowComp TM Mouse CD4 Kit 78% 63% 97% 86% CD4 + 86%

7 TransFix NA NA Cal-Lyse TM Whole Blood Lysing Solution NA NA 2 ml FIX2 2 ml FIX2 1 ml FIX1 25 ml GAS1 1 ml GAS1S1 High-Yield Lyse NA NA 5 ml HYL25 FIX & PERM Cell Permeabilization Kit NA NA 5 GAS3 2 GAS4 Medium A NA NA 1 ml GAS1S1 Medium B NA NA 1 ml GAS2S1 Dynabeads Dynabeads FlowComp TM Human CD4 Kit T 3 ml 11361D N/A Dynabeads CD4 Positive Isolation Kit T 5 ml 11331D Dynabeads Untouched TM Human CD4 T Cells Kit T D Dynabeads FlowComp TM Human CD8 Kit T 3 ml 11362D Dynabeads CD8 Positive Isolation Kit T 5 ml 11333D Dynabeads Untouched TM Human CD8 T Cells Kit T D Dynabeads FlowComp TM Mouse CD4 Kit T 3 ml 11461D DETACHaBEAD Mouse CD4 Kit T 5 ml 1246D Dynabeads Untouched TM Mouse CD4 Cells Kit T 2 x 1 ml 11415D Dynabeads FlowComp TM Mouse CD8 Kit T D Dynabeads Untouched TM Mouse CD8 Cells Kit T 2 x 1 ml 11417D Dynabeads TEL FAX veritas@veritastk.co.jp URL Molecular Probes 5

8 6 Molecular Probes Molecular Probes Molecular Probes Flow Cytometry Sub-micron Particle Size Reference Kit Flow Cytometry Sub-micron Particle Size Reference Kit F Alexa Fluor 488 FITC 55 nm 515 nm AlignFlow TM Cytometry Alignment Beads AlignFlow TM Flow Cytometry Alignment Beads 6 AlignFlow TM AlignFlow TM nm UV A1652 A nm A165 A nm A1651 A µm 6. µm 2 Flow Cytometry Size Calibration Kit Molecular Probes Flow Cytometry Size Calibration Kit F FSC 7 粒子の数 緑色 橙色 赤色 蛍光強度 nm 3 AlignFlow TM 3 : Carleton Stewart, Rosewell Park Cancer Institute µm 2. µm 4. µm 4 6 FSC 6. µm 1 µm 15 µm Flow Cytometry Size Calibration Kit Flow Cytometry Size Calibration Kit F FSC FSC 488 nm Becton Dickinson FACScan

9 FSC Alexa Fluor 488 R- R- PE Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488 R-PE Cell Sorting Set-Up Beads Molecular Probes Cell Sorting Set-Up Beads C1656 C1657 C1658 C µm 1% 2 1 AbC TM Bead Kit ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit LIVE/ DEAD Fixable Dead Cell Stain Kit 2 AbC TM compensation bead kits 1 53/3 nm BP µm.2 µm.1 µm 側方散乱光 1 µm µm Relative intensity (%) 波長 (nm) 9. Alexa Fluor 488 R-PE 8. Flow Cytometry Sub-micron Particle Size Reference Kit Flow Cytometry Sub-micron Particle Size Reference Kit F Attune Acoustic Focusing Cytometer 488 nm 53/3 nm BP 5 Molecular Probes 7

10 8 Molecular Probes 1. AbC TM Total Antibody Compensation Bead Kit * A1513 A1497 AbC TM Anti-Mouse Bead Kit * A1344 AbC TM Anti-Rat/Hamster Bead Kit * A1389 ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain A1346 * AbC TM AbC TM Bead Kit (1) AbC TM Total Antibody Compensation Bead Kit A (2) AbC TM Anti-Mouse Bead Kit A (3) AbC TM Anti-Rat/Hamster Bead Kit A AbC TM AbC TM 6 µm 9 マウス IgG1 8 7 マウス IgG2a マウス IgG2b マウス IgG3 6 マウス IgGM PE fluorescence PE fluorescence ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain kit ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit A1346 LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Kit LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Kit 5 A B C D 1, ラット IgG1 ラット IgG2a ラット IgG2b ラット IgG2c ラット IgGM PE fluorescence 1. AbC TM Total Antibody Compensation Bead Kit (A) (B) (C) (D) PE 488 nm 574/26 nm Attune Acoustic Focusing Cytometer アルメニアンハムスター IgG シリアンハムスター IgG ウサギモノクローナル IgG ウサギポリクローナル IgG PE fluorescence

11 CD3-FITC fluorescence 11. AbCTM Anti-Mouse Bead Kit ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit ArC TM A ArC TM B 2 LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stains 2 12 ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit AbC TM Anti-Mouse Bead Kit LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Bright TM Absolute ing Beads AccuCheck ing Beads 2 2 A 25 B 25 C PE fluorescence FITC fluorescence CD56-PE fluorescence (A) AbC TM PE CD56 MHCD564 (B) AbC TM FITC CD3 MHCD314 (C) 2 PE CD56 FITC CD3 AbC TM Anti-Mouse Bead Kit A1344 A B C LIVE/DEAD Fixable Violet stain fluorescence LIVE/DEAD Fixable Green stain fluorescence LIVE/DEAD Fixable Red stain fluorescence LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Kit ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit (A) LIVE/DEAD Fixable Violet Dye L nm 45/5 nm (B) LIVE/DEAD Fixable Green Dye L nm 525/5 nm (C) LIVE/DEAD Fixable Far Red Dye L nm 66/2 nm Molecular Probes 9

12 1 Molecular Probes 2. Bright TM Absolute ing Beads / nm nm Bright TM Absolute 7 µm UV to 8 C3695 ing Beads AccuCheck ing Beads Bead A: 6.4 µm Bead B: 6.36 µm Bead A: 488 Bead B: 635 Bead A: Bead B: PCB1 Bright TM Absolute ing Beads AccuCheck ing Beads 2 / Bright TM Absolute ing Beads C3695 UV 635 nm AccuCheck ing Beads PCB nm 2 A B 2 AccuCheck ing Beads / 1, 1 AccuCheck ing Beads 2 7 µm Bright TM 1 5 死細胞 EthD-1 fluorescence カウントビーズ 生細胞 Calcein fluorescence 13. Bright TM Absolute ing Beads Jurkat LIVE/DEAD Viability/ Cytotoxicity Kit L3224 Bright TM Absolute ing Beads C nm 53/3 nm 1 EthD-1 61 nm 1 5

13 Ex/Em* AlignFlow TM Flow Cytometry Alignment Beads for UV Lasers, 2.5 µm AlignFlow TM Flow Cytometry Alignment Beads for UV Lasers, 6. µm UV 35 37/ ml A1652 A1655 AlignFlow TM Flow Cytometry Alignment Beads for Blue Lasers, 2.5 µm AlignFlow TM Flow Cytometry Alignment Beads for Blue Lasers, 6. µm AlignFlow TM Flow Cytometry Alignment Beads for Red Lasers, 2.5 µm AlignFlow TM Flow Cytometry Alignment Beads for Red Lasers, 6. µm 488/ ml 633/ ml A165 A1653 A1651 A1654 Flow Cytometry Size Calibration Kit Flow Cytometry Sub-micron Particle Size Reference Kit NA NA 1 F /515 1 F13839 Cell Sorting Set-Up Beads for UV Lasers UV /46 3 ml C1656 Cell Sorting Set-Up Beads for Blue Lasers 488/515 3 ml C1658 Cell Sorting Set-Up Beads for Green-Yellow Lasers / 532, 561/575 3 ml C1659 Cell Sorting Set-Up Beads for Red Lasers 633/68 3 ml C1657 AbC TM Total Antibody Compensation Bead Kit NA NA 1 A1497 AbC TM Anti-Mouse Bead Kit NA NA 1 A1344 AbC TM Anti-Rat/Hamster Bead Kit NA NA 1 A1389 ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit NA NA 1 A1346 N/A * Ex Em nm AccuCheck ing Beads / 488/ A 1 ml PCB1 Bright TM Absolute ing Beads UV UV to 635/385 to 8 5 ml C3695 Molecular Probes 11

14 12 Molecular Probes Qdot RUO ASR IVD 2, A 側方散乱光 B22 Pacific Orange TM Molecular Probes RUO/ASR/IVD CD Molecular Probes Molecular Probes 1975 Alexa Fluor Qdot Zenon Molecular Probes 3 Molecular Probes Alexa Fluor Pacific Blue TM Pacific Green TM Pacific Orange TM PE PerCP APC B C CD8 Alexa Fluor 7 MHCII Pacific Blue TM 前方散乱光 C B CD3 PerCP-Cy 5.5 CD4 Pacific Green TM CD11c PE-Cy 7 CD11b FITC 14. Attune NxT Acoustic Focusing Cytometer T 1 4 C57BL/6 FIX & PERM Cell Permeabilization Kit GAS3 GAS4 PE Foxp3 FSC/SSC A B22 B A B22 - CD CD3 T A CD4 CD8 CD3 + T 2 B CD4 + T Foxp3 CD25 IL-2R T B CD3 - CD11c + MHCII + C CD11b + CD8 + C CD25 APC CD8 Alexa Fluor 7 CD45.2 APC-Cy 7 Foxp3 PE

15 3. nm UV 45 nm 488 nm 532 nm 561 nm 633/635 nm Alexa Fluor Alexa Fluor Pacific Blue TM 455 Pacific Green TM 5 Pacific Orange TM 551 Alexa Fluor FITC 525 Qdot Qdot Qdot Qdot 8 8 PerCP 678 PerCP-Cy R- R-PE, PE 575 PE-Texas Red 615 PE-Alexa Fluor TRI-COLOR (TC, PE-Cy 5) 67 PE-Cy PE-Alexa Fluor PE-Cy APC 66 APC-Cy APC-Cy APC-Alexa Fluor Alexa Fluor Alexa Fluor APC-Alexa Fluor T 14 nm MHCII Pacific Blue TM dye 455 A1491 CD4 Pacific Green TM dye 5 C1127 B22 Pacific Orange TM dye 551 RM263 CD11b FITC 525 RM281 Foxp3 R-PE 575 N/A CD3 PerCP-Cy A14784 CD11c PE-Cy A15849 CD25 (IL-2R ) APC 66 N/A CD45.2 APC-Cy A18642 CD8 Alexa Fluor MCD829 * N/A Molecular Probes 13

16 14 Molecular Probes 蛍光シグナル Qdot 45 nm 488 nm Qdot R-PE Qdot UV Qdot 45 nm Qdot 15 5 Qdot flow-qdot A B 吸光係数 (cm 1 M 1 ) 5,, 4,, 3,, 2,, 2 1,, 波長 ( nm) Qdot Qdot Qdot Qdot Qdot Qdot Qdot Qdot 波長 ( nm) 15. Qdot (A) Qdot (B) Qdot A 5. Qdot * Qdot 65 Qdot 655 Qdot 75 Qdot 8 CD2 S5.5 Q1172 Q2214 Q22141 Q22142 CD3 S4.1 (AKA 7D6) Q154 Q112 Q22149 CD4 S3.5 Q18 Q17 Q16 CD4 RM4-5 Q192 Q22163 Q22164 Q22165 CD8 3B5 Q19 Q155 Q159 Q22157 CD1 MEM-78 Q1153 Q22135 Q22136 CD14 TüK4 Q113 Q156 Q22137 Q164 CD19 SJ25-C1 Q136 Q1179 Q22138 Q22139 CD19 6D5 Q2216 Q1379 Q22161 Q22162 CD27 CLB-27/1 Q165 Q166 CD38 HIT2 Q153 Q2215 Q22151 Q22152 CD45 H13 Q151 Q22154 Q162 Q1156 CD45R (B22) RA3-6B2 Q22166 Q1176 Q22167 Q22168 CD45RA MEM-56 Q147 Q169 Q22155 Q22156 HLADR II Tü36 Q152 Q22158 Q22159 Q163 IgG2a Q114 Q115 Q176 * 1 25

17 mcherry mcherry 6 mcherry mcherry 16 mcherry IgG2a mcherry mcherry 6. mcherry 16D7 / nm Pacific Blue TM dye 45/455 M11238 Alexa Fluor /519 M11239 Alexa Fluor /617 M1124 Alexa Fluor /668 M11241 Molecular Probes Alexa Fluor Qdot R- R-PE 1 µg 1 mg IgG SiteClick TM 1 µg IgG R-PE/Qdot Pacific Blue fluorescence 16. mcherry Pacific Blue TM mcherry M11238 U2-OS Attune Acoustic Focusing Cytometer 45 nm 522/31 nm 抗体 ポリクローナル抗体 モノクローナル抗体 組み換え抗体 β- ガラクトシダーゼ GalT(Y289L) UDP-GalNAz N 3 N 3 N 3 N 3 アジド活性化抗体 DIBO アルキン標識 SiteClick TM N SiteClick TM SiteClick TM 17 部位選択的に標識された抗体 17. SiteClick TM - N GlcNAc GlcNAc GalT Y289L GalNAz GlcNAc DIBO Alexa Fluor 488 DIBO alkyne Molecular Probes 15

18 16 Molecular Probes R-PE Qdot 7 SiteClick TM 18 SiteClick TM Zenon Zenon IgG1 IgG2a IgG2b IgG Molecular Probes Zenon 1 1% 1 1 Zenon Fab IgG Fc Zenon Fc Zenon Zenon 8 Zenon 7. SiteClick TM CD4 陽性細胞 (%) 初心者熟練研究者市販品 :R-PE SiteClick Qdot 65 SiteClick R-PE 18. SiteClick TM Qdot 65 Antibody Labeling Kit SiteClick TM R-PE Antibody Labeling Kit CD4 3 CD4 R-PE CD4 CD4 3 nm SiteClick TM R-PE Antibody Labeling Kit 578 S1467 SiteClick TM Qdot 525 Antibody Labeling Kit UV 525 S1449 SiteClick TM Qdot 565 Antibody Labeling Kit UV 565 S145 SiteClick TM Qdot 585 Antibody Labeling Kit UV 585 S1451 SiteClick TM Qdot 65 Antibody Labeling Kit UV 65 S1469 SiteClick TM Qdot 625 Antibody Labeling Kit UV 625 S1452 SiteClick TM Qdot 655 Antibody Labeling Kit UV 655 S1453 SiteClick TM Qdot 75 Antibody Labeling Kit UV 75 S1454 SiteClick TM Qdot 8 Antibody Labeling Kit UV 8 S1455

19 Ex/Em* IgG1 IgG2a IgG2b IgG IgG IgG 8. Zenon Alexa Fluor Alexa Fluor /442 Z25 Z251 Z252 Z253 Z254 Alexa Fluor 45 42/421 Z2513 Z25113 Z25213 Z25313 Alexa Fluor /519 Z252 Z2512 Z2522 Z2532 Z2562 Z2542 Alexa Fluor /573 Z254 Z2514 Z2534 Alexa Fluor /565 Z255 Z2515 Z2525 Z2535 Z2565 Alexa Fluor /63 Z256 Z2516 Z2536 Alexa Fluor /617 Z257 Z2517 Z2527 Z2537 Z2567 Z2547 Alexa Fluor /668 Z258 Z2518 Z2528 Z2538 Z2568 Z2548 Alexa Fluor /72 Z251 Z2511 Z2521 Alexa Fluor 7 696/719 Z2511 Pacific Blue TM 41/455 Z2541 Z25156 Pacific Green TM Z1123 Pacific Orange TM 4/551 Z25256 Z /518 Z2542 Z25342 XX NA Z2552 Z25152 Z25252 Z25352 Z25452 R-PE 496 /578 Z2555 Z25155 Z25255 Z25355 Z25455 R-PE-Alexa Fluor /63 Z252 R-PE-Alexa Fluor /668 Z2521 APC 65/66 Z2551 Z25151 Z25251 Z25351 Z25451 APC-zAlexa Fluor 75 65/775 Z2531 horseradish peroxidase; HRP NA Z2554 Z25154 Z25254 Z25354 * nm Alexa Fluor Zenon 5 1 Zenon 1µg Zenon nm 565 nm N/A Molecular Probes 17

20 18 Molecular Probes Molecular Probes Alexa Fluor Alexa Fluor 19 Qdot 2 9 IgG 9. Alexa Fluor 45 Pacific Blue TM Pacific Green TM Pacific Orange TM Alexa Fluor 488 PE Alexa Fluor 61 R-PE Alexa Fluor 647 R-PE APC Alexa Fluor 75 APC IgG A31553 P1993 P1124 A111 P852 A298 A299 A865 A216 IgG A31556 P1994 P31584 A118 P2771MP A2981 A2991 A1931 IgG A116 A1545 A154 S32351 S11222 S112 S32365 S11223 S866 S2982 S2992 S868 S32362* * S218 A 1 B 4 1 C 橙色蛍光 (CD4) 赤色蛍光 (CD3) 緑色蛍光 (CD8) 橙色蛍光 (CD4) 緑色蛍光 (CD8) 19. Alexa Fluor 61 R-Phycoerythrin Tandem Streptavidin Conjugate Alexa Fluor 488 R- 3 CD3 1% BSA PBSAlexa Fluor 61 R-Phycoerythrin Tandem Dye labeled Streptavidin S2982 Alexa Fluor 488 CD8 PE CD4 1% BSA/PBS Becton Dickinson FACScan 488 nm nm CD nm CD4>65 nm CD3 (A) CD4/CD8 (B) CD3/CD4 (C) CD3/CD 赤色蛍光 (CD3)

21 Molecular Probes RUO 製品紹介 結果まで約 1 秒 細胞カウントが楽しくなる ess Ⅱ FL ess Ⅱ 自動セルカウンター ess Ⅱ FL ess Ⅱ 自動セルカウンターは 細胞カウントを迅速かつ正確に行うことが可能です タッチスクリーンでの直観的な操作 約 1 秒の正確な細胞数のカウント オートフォーカス機能による実験誤差の最小化で手間を大幅に削減します 取得したイメージ画像データは画面上で見ることができ 計測が正確に行われているか確認して次の実験に進むことができ 安心です Molecular Probes 19

22 2 Molecular Probes Molecular Probes www. lifetechnologies.com/flow-cellviability LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Kits UV/45/488/633 7 LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Kit LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain ArC TM Amine Reactive Compensation Bead Kit A A B 未固定 固定処理後 生細胞 死細胞 LIVE/DEAD Fixable Aqua fluorescence 生細胞 死細胞 LIVE/DEAD Fixable Aqua fluorescence 2. LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stains Jurkat 2 LIVE/ DEAD Fixable Aqua Dead Cell Stain Kit L34957(A) (B) 3.7% 45 nm 525 nm Perfetto Molecular Probes LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain 1. * LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stains SYTOX Dead Cell stains *

23 Dead Cell Stains SYTOX SYTOX Dead Cell Stains 3 DNA SYTOX 22 SYTOX Dead Cell Stains DNA リンパ球のゲーティング 生存率のゲーティング A B A C CD4 Cy 5.5-PE fluorescence FSC-A SSC CD8 Q75 fluorescence 21. (A) (B) LIVE/DEAD Fixable Violet Dead Cell Stain Kit L34955 (C) (D) 2 Perfetto SP, Chattopadhyay PK, Lamoreaux L, et al. (26) J Immunol Methods 313: Elsevier D CD4 Cy 5.5-PE fluorescence FSC-A 生細胞 死細胞 LIVE/DEAD Fixable Violet fluorescence CD8 Q75 fluorescence B CD3 Alexa Fluor 488 fluorescence 生細胞 死細胞 SYTOX Red fluorescence CD8 R-PE fluorescence 22. SYTOX Dead Cell Stains Alexa Fluor 488 CD3 R-PE CD8 5 nm SYTOX Red Dead Cell Stain S nm/635 nm (A) 2 SYTOX (B) CD8 CD3 2 Molecular Probes 21

24 22 Molecular Probes Molecular Probes CellTrace TM Cell Proliferation Kit DNA Click-iT Plus EdU 11 Click-iT Plus EdU Flow Cytometry Assay Kits BrdU CV 5 GFP mcherr APC PerCP PE DNA EdU DNA Click-iT Plus EdU Flow Cytometry Assay Kit EdU DNA DNA BrdU DNA BrdU BrdU DNase DNA Click-iT Plus EdU Flow Cytometry Assay DNA 23 Click-iT Plus EdU Click-iT Plus Kit Click-iT Click-iT Plus R-PE R-PE GFP Click-iT Plus EdU Click-iT EdU 3 A 2 B 9 C Click-iT EdU plus Alexa Fluor 488 fluorescence FxCycle Violet fluorescence (x1 6 ) Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 488 Flow Cytometry Assay Kit FxCycle TM Violet Stain Jurkat 1 µm EdU 1 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 488 Flow Cytometry Assay Kit C1632 Alexa Fluor 488 FxCycle TM Violet Stain F nm Click-iT EdU Alexa Fluor nm FxCycle TM Violet Stain(A) S EdU DNA G2/M G/G1 (B) FxCycle TM Violet Stain DNA G/G1 G2/M S (C) Click-iT Plus EdU FxCycle TM 2 S Click-iT EdU plus Alexa Fluor 488 fluorescence FxCycle Violet fluorescence (x1 6 )

25 2 11. Click-iT Plus EdU Flow Cytometry Assay Kits DNA CellTrace TM Cell Proliferation Kits CellTrace TM Cell Proliferation Kits GFP CellTrace TM CellTrace TM CFSE Dye C34554 CellTrace TM Violet Dye C34557 CellTrace TM Far Red Dye C CellTrace TM CellTrace TM CFSE CellTrace TM Violet CellTrace TM CellTrace TM Violet CellTrace TM Far Red GFP A B C CellTrace Violet fluorescence CellTrace CFSE fluorescence CellTrace Far Red fluorescence 24. CellTrace TM (A) CellTrace TM Violet 8 CellTrace TM Violet CD3 MHCD3 2 PHC27 7 CD4 (B) CellTrace TM CFSE (C) CellTrace TM Far Red 7 T CD3 MHCD3 5 SYTOX Green S3486CellTrace TM CFSE CellTrace TM Far Red Attune Acoustic Focusing Cytometer CellTrace TM Violet 45 nm 45/4 nm CellTrace TM CFSE 488 nm 53/3 nm CellTrace TM Far Red 638 nm 66/2 nm 2 Molecular Probes 23

26 24 Molecular Probes SYTOX Blue fluorescence DNA G/G1 S G2/M Molecular Probes 12 Vybrant DyeCycle TM Stains side population A B 死細胞 生細胞 Vybrant DyeCycle Green fluorescence 2, 1,5 1, 5 Vybrant DyeCycle TM Stains DNA nm 25 Vybrant DyeCycle TM Stains 3 FxCycle TM Stains 488 nm FxCycle TM Violet Stain F1347 FxCycle TM PI/RNase Staining Solution F1797 FxCycle TM Far Red Stain F FxCycle TM Stains DNA Vybrant DyeCycle Green fluorescence 25. Vybrant DyeCycle TM Stains Jurkat Vybrant DyeCycle TM Green Stain V354 SYTOX Blue Dead Cell Stain S nm 45 nm (A) (B) DNA G/G1 G2/M S 12. Vybrant DyeCycle TM Stains DNA FxCycle TM Stains DNA

27 26. CellEvent Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit Molecular Probes 13 CellEvent Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit 3/7 Molecular Probes CellEvent Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit C DNA A SYTOX ADDvanced fluorescence B SYTOX ADDvanced fluorescence コントロール V CellEvent Caspase-3/7 Green fluorescence 誘導 V CellEvent Caspase-3/7 Green fluorescence Jurkat Jurkat T (A) DMSO (B) 1 µm 3 CellEvent Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit C nm Attune Acoustic Focusing Cytometer CellEvent 53/3 nm SYTOX AADvanced TM 69/5 nm (B) (A) A N V CellEvent Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit 3/7 1 V 1 MitoProbe TM JC-1 Assay Kit 2 Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe/Dead Cell Apoptosis Kit 3 N N A A Molecular Probes 25

28 26 Molecular Probes JC-1 red fluorescence - BL-3 JC-1 red fluorescence - BL-3 V Molecular Probes PS PS V PS Molecular Probes Alexa Fluor 27 1 V 4 D V V A 1 1 MitoProbe TM JC-1 Assay Kit 488 nm 633/635 nm MitoProbe TM JC-1 Assay Kit M34152 JC-1 3- CCCP DMSO PBSJC-1 J ~529 nm ~59 nm 28 A JC-1 蛍光 JC-1 蛍光 JC-1 蛍光 JC-1 蛍光 ヨウ化プロピジウム蛍光 µm JC-1 Jurkat MitoProbe TM JC-1 Assay Kit M C 5% CO2 2 PBS 488 nm Attune Acoustic Focusing Cytometer 53/3 nm >64 nm (A) (B) 1 µm 37 C 5 B A B ヨウ化プロピジウム蛍光 ヨウ化プロピジウム蛍光 V D Alexa Fluor 488 fluorescence V D Alexa Fluor 488 fluorescence 27. Alexa Fluor 488 V ジ ヨウ化プロピジウム Jurkat ロ Jurkat T (A) 1 µm 4 (B) Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V Alexa Fluor 488 & Propidium Iodide V13245 A V D A A

29 SYTOX AADvanced fluorescence SYTOX AADvanced fluorescence 29. Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe 5 Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe/Dead Cell Apoptosis Kit A Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe ESIPT 53 nm 585 nm F2N12S SYTOX AADvanced TM Dead Cell Stain A 262,144 B 262,144 F2N12S 緑色蛍光 196,68 131,72 65,536 A+D F2N12S 緑色蛍光 196,68 131,72 65,536 A+D L L 65, ,72 196,68 262,144 65, ,72 196,68 262,144 F2N12S 橙色蛍光 F2N12S 橙色蛍光 C 1 5 D D 1 5 D A L 1 3 L A ,25 2,5 3,75 5, F2N12S ratio 585 nm/53 nm fluorescence x 1, 1 1 1,25 2,5 3,75 5, F2N12S ratio 585 nm/53 nm fluorescence x 1, Jurkat T 1 µm 4 B D A CF2N12S 45 nm 585 nm 53 nm SYTOX AADvanced TM Dead Cell Stain 488 nm 695 nm F2N12S 2 A B C D F2N12S 2 585/53 nm SYTOX AADvanced TM Dead Cell Stain A = L = D = Molecular Probes 27

30 28 Molecular Probes SYTOX Blue fluorescence SYTOX Blue fluorescence CellROX Flow Cytometry Kits ROS ROS ROS CellROX 3 Molecular Probes CellROX Green Flow Cytometry Assay Kit C1492 CellROX Orange Flow Cytometry Assay Kit C1493 CellROX Deep Red Flow Cytometry Assay Kit C A B C 1 5 死細胞 3.1% ++.21% 1 5 死細胞 4.74% % CellROX Deep Red fluorescence 1 2 生細胞 96.1% ROS+.852% CellROX Deep Red fluorescence 1 2 生細胞.91% ROS+ 93.1% CellROX Deep Red fluorescence 3. ROS (A) CellROX Deep Red Flow Cytometry Assay Kit C1491 CellROX Deep Red Reagent Jurkat ROS N- NAC ROS tert- TBHP NAC TBHP (B C) CellROX Deep Red Reagent SYTOX Blue Dead Cell Stain Jurkat (B) PBS (C) 2 µm TBHP 3 CellROX Deep Red Flow Cytometry Assay Kit TBHP (C) ROS (B)

31 31. phrodo Red BioParticles phrodo E. coli BioParticles Phagocytosis Kits phrodo phrodo ph Molecular Probes phrodo ph ph phrodo Green E. coli BioParticles Phagocytosis Kit P35381 phrodo Red E. coli BioParticles Phagocytosis Kit A phrodo Phagocytosis Particle Labeling Kit A126 phrodo Red ネガティブコントロール ファゴサイトーシスされた粒子 phrodo dye fluorescence (585 nm) 1 µl 2 phrodo Red E. coli BioParticles Phagocytosis Kit A125 phrodo Red E. coli BioParticles 2 37 C x g nm BD FACSCalibur TM Cytometer nm 37 C phrodo Red BioParticles Molecular Probes 29

32 3 Molecular Probes 1 V139 Vybrant DyeCycle TM Ruby Stain 638/686 4 V1273 Ex/Em* LIVE/DEAD Fixable Blue Dead Cell Stain Kit UV 35/45 2 L2315 LIVE/DEAD Fixable Violet Dead Cell Stain Kit 416/451 2 L34955 LIVE/DEAD Fixable Aqua Dead Cell Stain Kit 367/526 2 L34957 LIVE/DEAD Fixable Yellow Dead Cell Stain Kit 4/575 2 L34959 LIVE/DEAD Fixable Green Dead Cell Stain Kit 495/52 2 L2311 LIVE/DEAD Fixable Red Dead Cell Stain Kit 595/615 2 L2312 LIVE/DEAD Fixable Far Red Dead Cell Stain Kit 65/665 2 L112 LIVE/DEAD Fixable Near-IR Dead Cell Stain 75/775 2 L1119 Kit LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Sampler 32 L3496 Kit SYTOX Blue Dead Cell Stain UV/ 444/48 1 ml S34857 SYTOX Green Dead Cell Stain 54/523 1 ml S3486 SYTOX Orange Dead Cell Stain 547/57 1 ml S34861 SYTOX Red Dead Cell Stain 64/658 1 ml S34859 SYTOX Dead Cell Stain Sampler Kit 1 S34862 SYTOX AADvanced TM Dead Cell Stain 546/647.2 ml S x.5 ml S1274 Click-iT Plus EdU Pacific Blue TM Flow 44/45 5 C1636 Cytometry Assay Kit Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 488 Flow 5 C1632 Cytometry Assay Kit 495/519 1 C1633 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 647 Flow 5 C1634 Cytometry Assay Kit 65/67 1 C1635 CellTrace TM Violet Cell Proliferation Kit 45/45 18 C34557 CellTrace TM CFSE Cell Proliferation Kit 492/517 1 C34554 CellTrace TM Far Red Cell Proliferation Kit 63/661 1 C34564 Vybrant DyeCycle TM Violet Stain 369/437 2 µl V353 Vybrant DyeCycle TM Green Stain 56/534 4 µl V354 Vybrant DyeCycle TM Orange Stain 519/563 4 µl V355 FxCycle TM Violet Stain 358/461 5 F1347 FxCycle TM PI/RNase Staining Solution 535/617 1 ml F1797 FxCycle TM Far Red Stain F1348 * Ex Em nm DNA / nm J

33 Ex/Em* CellEvent TM Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit / 511/533 (CellEvent TM Green) 546/647 1 C1427 (SYTOX AADvanced Stain) Annexin V, Pacific Blue TM conjugate 41/455 5 µl A35122 Annexin V, FITC conjugate 494/518 5 µl A13199 Annexin V, Alexa Fluor 488 conjugate 495/519 5 µl A1321 Annexin V, PE conjugate 496, 546, 565/ µl A35111 Annexin V, APC conjugate 65/66 25 µl A3511 Annexin V, Alexa Fluor 647 conjugate 65/665 5 µl A2324 Pacific Blue TM Annexin V/SYTOX ADvanced TM Apoptosis Kit / 41/455 Pacific Blue TM dye 546/647 (SYTOX AADvanced dye) 5 A35136 Dead Cell Apoptosis Kit with Alexa Fluor 488 Annexin V & Propidium Iodide 495/519 (Alexa Fluor 488 dye) 5 V /617 (PI) 25 V13245 Dead Cell Apoptosis Kit with FITC annexin V & Propidium Iodide 494/519 (FITC) 535/617 (PI) 5 V13242 Violet Ratiometric Asymmetry Probe/Dead Cell Apoptosis Kit / 45 53, 585 (F2N12S) 546/647 (SYTOX AADvanced TM dye) 1 A35137 MitoProbe TM JC-1 Assay Kit 514/529, 59 1 M34152 CellROX Green Flow Cytometry Assay Kit 58/525 (CellROX Green) 64/658 1 C1492 (SYTOX Red) CellROX Orange Flow Cytometry Assay Kit 532 nm 545/565 (CellROX Orange) 64/658 1 C1493 (SYTOX Red) CellROX Deep Red Flow Cytometry Assay Kit 64/665 (CellROX Deep Red) 444/48 1 C1491 (SYTOX Blue) phrodo Green E. coli BioParticles Phagocytosis Kit 59/533 1 P35381 phrodo Green S. aureus BioParticles Phagocytosis Kit phrodo Red E. coli BioParticles Phagocytosis Kit phrodo Phagocytosis Particle Labeling Kit 59/533 1 P /585 1 A125 56/585 1 A126 * Ex Em nm DNA / nm J Molecular Probes 31

34 4 14 Attune NxT Acoustic Focusing Cytometer Attune NxT Acoustic Focusing Cytometer cells /ml 1, events.5 5 µm = OFF = ON Attune NxT cytometer 14-color laser configurations 44/5 Pacific Blue ECFP Violet 45 nm 512/25 Pacific Green 63/48 Pacific Orange 71/5 Qdot 75 NA FSC NA SSC** Blue 488 nm 53/3 FITC EGFP, Emerald GFP 574/26* Propidium iodide EYFP 695/4 PerCP-Cy /6 PE-Cy 7 583/22 PE RFP Yellow 561 nm 62/15 PE-Texas Red mcherry, tdtomato, DsRed, mstrawberry 695/4 PE-Cy /6 PE-Cy 7 66/2 APC Red 638 nm 72/3 Alexa Fluor 7 78/6 APC-Alexa Fluor 75 * PE ** / 32 Molecular Probes

35 4 cm 58 cm 43 cm 29 kg % 1 24 VAC 5/6 Hz <15 W 1. m 65 dba 1 4 :Blue laser: 488 nm, 5 mw Violet laser: 45 nm, 5 mw Red laser: 637 nm, 1 mw Yellow laser: 561 nm, 5 mw : : 1.2NA :, 488/1 488/1 PMT : , µl/min : : 2 µl 4 ml : : 1.8 L, 1.8 L, 175 ml, 175 ml 1 L : L : 17 1 mm mm Levey-jennings 15 2 SmartGate Quad Stats math calculator Stain Index S / N FCS3.1 35, /.5 5 µm 8 MESF FITC 3 MESF PE 7 MESF APC Attune NxT Autosampler 96/384 <1% Molecular Probes 33

36 最新の価格および在庫数は 弊社ホームページ右上の 製品価格と在庫の検索 でご確認いただけます 研究用にのみ使用できます 診断目的及びその手続上での使用は出来ません 記載の社名および製品名は弊社または各社の商標または登録商標です 標準販売条件はこちらをご覧ください For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 214 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified. Cy is a registered trademark of GE Healthcare.FACScan and FACSCalibur are trademarks or registered trademarks of Becton, Dickinson and Company. TransFix is a registered trademark ofsheffield Teaching Hospitals NHS Trust. FIX & PERM is a registered trademark of Nordic Immunological Laboratories.Printed in Japan. MP97-A1411OB 販売店 ライフテクノロジーズジャパン株式会社本社 : 東京都港区芝浦 テクニカルサポート オーダーサポート TEL: FAX: 営業部 TEL: FAX: facebook.com/lifetechnologiesjapan

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